サーモフィッシャーN-PER Neuronal Protein Extraction Reagentは、神経組織および初代培養ニューロンのすべての細胞分画からタンパク質を効率的に抽出するために最適化された、独自の細胞溶解試薬です。
N-PER Neuronal Protein Extraction Reagentの特長:
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最適化—脳組織または初代培養ニューロンから膜タンパク質を含む効率的な全タンパク質抽出
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穏やかさ—歩留まりを犠牲にすることなくタンパク質の機能を維持
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多用途—プロテアーゼ阻害剤、還元剤またはキレート化剤、または必要なコファクターで補うことが可能
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互換性—抽出物は、全タンパク質、酵素学的および免疫学的アッセイおよびタンパク質精製法での使用に適合
N-PER試薬を用いて調製した脳組織抽出物などの神経細胞溶解物は、酵素活性アッセイ(例えば、ホスファターゼ、キナーゼ、ATPaseアッセイ)、イムノアッセイ(例えば、ウエスタンブロット、ELISA、RIAs)、タンパク質精製に適しています。N-PER Lysis Reagentは、30分以内にタンパク質抽出を完了させることができ、組織を機械的に破壊する必要があります(例、Dounce Homogenization、Polytron)。典型的なニューロンタンパク質の収量は、脳組織の1mgあたり70〜90µgのタンパク質、または10
6の一次ニューロン細胞からの総タンパク質の300µgです。
アプリケーション:• ニューロン組織や初代ニューロン細胞からの機能性タンパク質の単離
•神経細胞組織に特異的な酵素活性測定法の研究
•バイオマーカー分析のための神経組織からの溶解物の生成
代表的なニューロンの構造には、細胞体(ソーマ)、樹状突起、軸索などがあります。ニューロン細胞膜の独自の形態と豊富なスヒンゴ脂質およびコレステロール組成により、神経細胞タンパク質抽出物の調製には課題が生じます。N-PER Neuronal Protein Extraction Reagentは、脳や他の神経組織や初代培養神経細胞から機能性の高い天然タンパク質を抽出する際の課題を克服するために特別に調製されており、他の抽出法に比べてタンパク質収量が増加します。
N-PER Cell Lysis Reagentの穏やかな組成は、活性神経タンパク質を必要とする下流アプリケーションに最適です。さらに、N-PER Reagentは、酵素アッセイ(ホスファターゼ、キナーゼなど)、イムノアッセイ、さまざまなクロマトグラフィー手順、電気泳動などの多くのアプリケーションに対応しています。サーモフィッシャーHalt Protease Inhibitor CocktailまたはPhosphatase Inhibitor Cocktailは、使用直前に追加してタンパク質分解を防止したり、通常脳組織に存在する高リン酸酵素活性からの保護を強化することができます。
各抽出には、初代培養細胞の10cmシャーレあたり、組織1gに対してN-PER試薬10mLまたはN-PER試薬0.5~1mLの割合で行うことを推奨します。
その他の製品データ•
神経組織と初代細胞用に最適化されたタンパク質抽出試薬関連製品Pierce™ Primary Neuron Isolation Kit