Syn-PER™ Synaptic Protein Extraction Reagent
Syn-PER™ Synaptic Protein Extraction Reagent
Thermo Scientific™

Syn-PER™ Synaptic Protein Extraction Reagent

サーモフィッシャーSyn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、神経組織および初代培養ニューロンからの機能性シナプスタンパク質を含むシナプスソームを効率的に単離するための独自の細胞溶解試薬です。Syn-PER Synaptic Protein Extraction詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
87793100 mL
製品番号(カタログ番号) 87793
価格(JPY)
63,100
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数量:
100 mL
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サーモフィッシャーSyn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、神経組織および初代培養ニューロンからの機能性シナプスタンパク質を含むシナプスソームを効率的に単離するための独自の細胞溶解試薬です。

Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentの特長:

効率的なシナプス抽出—ニューロン組織1ミリグラムあたり10µgのシナプスタンパク質、または初代培養ニューロン(106細胞)の35mmディッシュあたり4µgのシナプスタンパク質を収集
穏やかな組成—生存可能なシナプトソームを分離し、これらのシナプスを溶解してネイティブのシナプスタンパク質を抽出し、リン酸化タンパク質の完全性を維持
迅速な手順—無傷のシナプス懸濁液を1時間以内に収集
シンプルなプロトコル—超遠心分離のステップが不要

。Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentのアプリケーション:
• 神経伝達物質放出研究に向けた機能的なシナプトソームの単離
• シナプス前後のタンパク質を抽出することによる、シナプスにおけるタンパク質組成と機能変化の特定
• シナプスに関連する不安定または一過性のタンパク質リン酸化イベント保持と研究

Syn-PER Reagentは、生物学的に活性なシナプス前とシナプス後のタンパク質(すなわち、無傷の膜およびシナプスのタンパク質複合体)を含むシナプトソームを調製するために使用されます。新鮮な神経組織や初代培養ニューロンと併用することで、Syn-PER Reagentで調製したシナプスソームを使用してシナプス伝達を研究できます。これらの抽出物に含まれるシナプスソームタンパク質は、ウェスタンブロッティング、免疫沈降、酵素活性アッセイ、タンパク質間相互作用研究などの下流アプリケーションにも使用できます。Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、リン酸化タンパク質の分解を最小限に抑えるため、リン酸化タンパク質の完全性維持が必要な研究に最適です。

Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagentは、シナプス前と後のシナプトソームのタンパク質を高収率で効率的に増強します。非変性細胞溶解試薬は、神経伝達物質放出アッセイ、酵素アッセイ(ホスファターゼ、キナーゼなど)、免疫測定法、さまざまなクロマトグラフィー手順、電気泳動など、多くの下流アプリケーションに対応しています。またSyn-PER Reagentは、ホスファターゼ阻害剤がない場合でも、市販のほとんどの抽出バッファーよりもリン酸化タンパク質の完全性を保持します。SYN-PER Reagentには、プロテアーゼ阻害剤やホスファターゼ阻害剤は含まれていません。ただし、サーモフィッシャーHalt ProteaseやPhosphatase Inhibitorなどの阻害剤は、使用直前に追加することでタンパク質分解を防止したり、通常脳組織に存在する高リン酸酵素活性からの保護を強化できます。

シナプトソームは、神経組織のホモジナイゼーション中に生成される単離された神経末端です。シナプトソーム調製物は、ミトコンドリアとシナプス小胞を含む完全なシナプス前末端を、シナプス後膜とシナプス後密度とともに含んでいるため、シナプス前後のタンパク質の抽出に使用することができます。シナプトソームは、機能性イオンチャネル、受容体、酵素、および無傷のシナプス小胞を含んでいるため、シナプス機能の研究に一般的に使用されます。この小胞には神経伝達物質を取り込んで放出することができます。通常、シナプトソームの調製には、複数の超遠心分離ステップと密度勾配が含まれ、この細胞分画を他のオルガネラから分離します。

詳細な製品データ
機能性シナプトソームを単離する方法

関連製品
N-PER™ Neuronal Protein Extraction Reagent
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
フォーマット液体
数量100 mL
容量(メートル法)100 mL
製品ラインSyn-PER
製品タイプオルガネラ単離、細胞内分画
Unit SizeEach
組成および保存条件
製品を受け取り後、4℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

Will yield be the same with cultured neurons when using Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent (Cat. No. 87793), as compared to using fresh tissue?

We can not guarantee that the total synaptic yield from cultured neurons should be comparable to using fresh tissue.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Will yield be the same if I pellet and freeze neurons in culture when using Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent (Cat. No. 87793), as compared to using fresh tissue?

We have tested using Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent with frozen (mouse) brain tissue and total synaptic protein yields were comparable to fresh brain tissue.

Please note, frozen tissues are not recommended for synaptosome function tests such as neurotransmitter release and up take assays because synaptosomes from frozen tissues are not viable. This is a difference between frozen and fresh tissue in terms of application.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can I perform RNA extraction after using Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent (Cat. No. 87793)?

Yes. RNA extraction can be performed after using Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent (Cat. No. 87793). After the lysis step, you will need to perform two centrifugations (step 4 and 5 in the manual, the first at low speed to discard the tissue or cell debris. The second one, at higher speed, will pellet synaptosomes. The supernatant arising from this step will include the cytosolic fraction (step 6).

If the synaptosomes are intact and have RNA inside, the RNA should be extractable by the kit or method of your choice.

Please note: This extraction procedure should be experimentally tested.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNA Sample Collection, Protection, and Isolation Support Center.

Can you provide the shelf-life for the Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent?

The Syn-PER Synaptic Protein Extraction Reagent is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended (4 degrees C). Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf) for more details.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

引用および参考文献 (3)

引用および参考文献
Abstract
Autism-Associated Insertion Mutation (InsG) of Shank3 Exon 21 Causes Impaired Synaptic Transmission and Behavioral Deficits.
Authors:Speed HE, Kouser M, Xuan Z, Reimers JM, Ochoa CF, Gupta N, Liu S, Powell CM
Journal:
PubMed ID:26134648
'SHANK3 (also known as PROSAP2) is a postsynaptic scaffolding protein at excitatory synapses in which mutations and deletions have been implicated in patients with idiopathic autism, Phelan-McDermid (aka 22q13 microdeletion) syndrome, and other neuropsychiatric disorders. In this study, we have created a novel mouse model of human autism caused by ... More
Presynaptic alpha-synuclein aggregation in a mouse model of Parkinson's disease.
Authors:Spinelli KJ, Taylor JK, Osterberg VR, Churchill MJ, Pollock E, Moore C, Meshul CK, Unni VK
Journal:
PubMed ID:24501346
'Parkinson''s disease and dementia with Lewy bodies are associated with abnormal neuronal aggregation of a-synuclein. However, the mechanisms of aggregation and their relationship to disease are poorly understood. We developed an in vivo multiphoton imaging paradigm to study a-synuclein aggregation in mouse cortex with subcellular resolution. We used a green ... More
Motor Training Promotes Both Synaptic and Intrinsic Plasticity of Layer II/III Pyramidal Neurons in the Primary Motor Cortex.
Authors:Kida H, Tsuda Y, Ito N, Yamamoto Y, Owada Y, Kamiya Y, Mitsushima D
Journal:Cereb Cortex
PubMed ID:27193420
Motor skill training induces structural plasticity at dendritic spines in the primary motor cortex (M1). To further analyze both synaptic and intrinsic plasticity in the layer II/III area of M1, we subjected rats to a rotor rod test and then prepared acute brain slices. Motor skill consistently improved within 2 ... More