Micrococcal Nuclease Solution (≥100 U/μL)

Thermo Scientific微小球菌核（MNase）は、クロマチン結合タンパク質を放出し、クロマチン免疫沈降（ChIP）実験において使用するために、クロマチンを断片化しながら細胞ライセートから核酸を除去するのに最適です。

微小球菌核（MNase）の特長：

•酵素は核酸を消化（DNAおよびRNA）
• 二本鎖、一本鎖、環状および線状核酸に効果的
• 二価のカルシウムイオンを含む中性からアルカリ性バッファー液条件において活発
•≧100ユニット／µL、10 mM Tris-HCl pH 7.5、50 mM NaCl、1 mM EDTA、50%グリセロールで提供

このミクロコッカスヌクレアーゼは、黄色ブドウ球菌由来の酵素の安定した液体形態です。小球菌ヌクレアーゼ（MNase）はDNAおよびRNAに対してエキソ-およびエンド-5'-ホスホジエステラーゼ活性を示します。この酵素は二本鎖、一本鎖、環状および線状核酸を消化します。もっとも高い活性はAT-またはAU-リッチ領域を優先に一本鎖および核酸基質に対して起こります。酵素活性はpH7～10において生じ、RNAおよびDNA基質消化におけるカルシウムに厳密に依存します。微小球菌核はクロマチン結合タンパク質を放出し、クロマチン免疫沈降（ChIP）実験において使用するために、クロマチンを断片化しながら細胞ライセートから核酸を除去するのに最適です。

微小球菌核（MNase）の特性：
• 製品は-20°Cにおいて液体です。使用中、酵素を氷上に置いてください。
• 小球菌ヌクレアーゼの活性はCaに依存します。反応性バッファーにおいてEGTAなどのカルシウムキレート剤の使用は避けてください。
• 酵素活性は塩濃度100 mM未満、pH 7～10にて起こります。最適な酵素活性は37℃において生じますが、酵素は室温でも活発です。Na+やK+の一価金属イオンは活性を減少させます。EGTAまたは10分間の65℃での加熱は酵素を不活性化します。

微小球菌核を使用するための一般化されたプロトコル（MNase）：
• サンプルを50 mM Tris-HCl pH 8.0、5 mM CaCl₂で希釈します
• 試料にヌクレオチドしか含まれていない場合（すなわち、タンパク質が含まれていない）、0.1mg/mLの最終濃度でBSAを添加します。
•小球菌ヌクレアーゼを添加し、ヌクレオチドが分解されるまで37℃でインキュベート反応を行います。
• オプション：最終濃度20 mMにEGTA、pH 8.0を加えることで反応を停止できます。

微小球菌核の仕様（製品コード88216）：
• 外見：透明無色の液体、不溶性物質なし。
•件数：≧100ユニット/Lµ
• 追加情報：1ユニットは吸収度を高度に重合したDNAにおいて25°C、260 nmで0.001/min/mL増加させるのに必要な酵素の量と定義します。

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