HisPur™ Ni-NTA Resin
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Thermo Scientific™

HisPur™ Ni-NTA Resin

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resinは高結合能かつ高性能のニッケル-IMACレジンで、Hisタグ融合タンパク質のルーチンアフィニティー精製に使用できます。HisPur Ni-NTA Resinの特長:•高結合能—レジン1 mLあたり最大60詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
88222100 mL
8822110 mL
88223500 mL
製品番号(カタログ番号) 88222
価格(JPY)
162,300
Each
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数量:
100 mL
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Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Resinは高結合能かつ高性能のニッケル-IMACレジンで、Hisタグ融合タンパク質のルーチンアフィニティー精製に使用できます。

HisPur Ni-NTA Resinの特長:

高結合能—レジン1 mLあたり最大60 mgの6xHisタグ付きタンパク質を結合
多用途—未変性または変性条件でタンパク質を精製
適合性—Thermo Scientific Cell Lysis Reagentsおよびさまざまなバッファー添加剤と併用可能
経済的—レジンは5回まで再利用可能
簡便—調製済みバッファーはキットフォーマットで提供
柔軟—バルクレジン、スピンカラム、クロマトグラフィーカートリッジ、および96ウェルフィルタープレートなど、さまざまなフォーマットで提供

特別に調製された担体は、ニトリロ三酢酸(NTA)キレート部位で誘導体化され、二価ニッケルイオン(Ni2+)を添加されたアガロースビーズで構成されています。固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)レジンは、組換えHisタグ付きタンパク質精製において卓越した結合能と性能を提供します。

組換えタンパク質の発現および精製は、タンパク質の調節、構造、および機能の研究における中枢です。大部分の組換えタンパク質は短いアフィニティータグとの融合として発現し、もっとも一般的なものはポリヒスチジン(6xHis)タグです。組換えHisタグ付きタンパク質の精製に使用される方法は固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)です。このクロマトグラフィーは、ヒスチジン側鎖と連携するニッケルイオンまたはコバルトイオンで荷電したキレートレジンで構成されています。

HisPur Ni-NTA Resinは、Thermo Scientific B-PER Bacterial Protein Extraction Reagentsで得られるような細菌ライセートから高レベルの過剰発現Hisタグ融合タンパク質を効果的に精製します。レジンはさまざまなスケールのバッチ結合およびスピンカラム法で優れた性能を発揮します。性能は他社の一般的なNi-NTAレジンと同等か、またはより高い効果を示します。HisPur Ni-NTA Resinは高品質かつ安定で、回復性のあるアフィニティー担体です。試験により、最低でも5回の繰り返し使用では性能は低減しないことが確認されています。これらのデータは、通常の使用において、レジンは構造的分解、またはニッケルイオン浸出に対する高い耐性があることを示しています。

HisPur Ni-NTA ResinおよびHisPur Cobalt ResinはIMACの代替形態で、Hisタグ結合を担うキレート金属イオンとして、前者はニッケルを、後者はコバルトを使用します。Ni-NTAレジンは、キレートの4つの金属結合部位により、高いタンパク質結合と低い金属イオン浸出を実現できるため、6xHisタグ付きタンパク質精製でもっとも一般的なIMACレジンです。コバルトは結合が強くなく、より識別的に結合するため、Hisタグ付タンパク質精製において高純度を実現できますが、一般的に収量は低下します。

利用可能なフォーマット:
レジンスラリー—架橋型6%アガロースビーズ;10 mL、100 mL、500 mLボトル
スピンカラム—0.2 mL(微量遠心機)、1 mL、3 mLカラム
精製キット—3種類すべてのカラムサイズをそろえた完全キット
クロマトグラフィーカートリッジ—HisPurクロマトグラフィー用カートリッジデータの詳細を参照
96-ウェルスピンプレート

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研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
カラムタイプアフィニティー、アガロースレジン
概要HisPur Ni-NTA Resin
フォーマットBottle
数量100 mL
固定相二価ニッケル、金属キレート
ターゲットHisタグ付きタンパク質
容量(メートル法)Up to 60 mg of 6xHis-Tagged Protein Binding per mL Resin
形状液体懸濁液
製品ラインHisPur
タイプ樹脂
Unit SizeEach
組成および保存条件
4℃で保存

よくあるご質問(FAQ)

Can the HisPur Ni-NTA Spin plates (Cat. No. 88230) be regenerated and reused, or are they for single-use only?

The resin can be re-used at least five times; this is also for the resin in the plates. Regeneration is possible using this procedure (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011700_HisPur_NiNTA_Resin_UG.pdf) Since the resin bed volume in each well is 50 µL, you can use 250 µL twice to give a total of 10 resin-bed volume.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

How do I perform Ni-NTA bead regeneration with the HisPur Ni-NTA Resin (Cat. No. 88221)?

Please refer to page 2 (buffer preparation) and page 3 (procedure) of the manual (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0011700_HisPur_NiNTA_Resin_UG.pdf) for information regarding bead regeneration.

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Can ProBond or Ni-NTA beads be used for large-scale preparations?

ProBond and Ni-NTA beads can be used in FPLC columns. However, the beads can only withstand low pressure (~43.5 psi max).

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What should the typical protein recovery be when using the Probond Purification System or Ni-NTA Purification system?

Both systems are qualified by purifying 2 mg of myoglobin protein on a column and performing a Bradford assay. Protein recovery must be 75% or higher.

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What is the difference between HisPur Nickel Resin and HisPur Cobalt Resin?

Nickel has a higher affinity for histidines than does cobalt. It binds multiple histidines more tightly than cobalt, and requires more stringent conditions than is necessary for cobalt. The lower affinity of cobalt for multiple histidines typically results in less nonspecific binding of histidine-rich proteins that lack a his-tag compared to nickel resins.

HisPur Ni-NTA resin has a high capacity of up to 60 mg of 6xHis-tagged protein per milliliter. It is a versatile resin that can work under both native and denaturing conditions, and can also be used with a variety of lysis reagents and buffer additives.

HisPur Cobalt resin utilizes proprietary tetradentate chelating resin charged with cobalt. This system recovers highly purified protein with lower imidazole concentrations and has low metal leeching properties.

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引用および参考文献 (2)

引用および参考文献
Abstract
Selective binding, magnetic separation and purification of histidine-tagged protein using biopolymer magnetic core-shell nanoparticles.
Authors:Zhou Y,Yan D,Yuan S,Chen Y,Fletcher EE,Shi H,Han B
Journal:Protein expression and purification
PubMed ID:29154996
In previous studies, we synthesized the magnetic core-shell structured Fe(3)O(4)/PMG/IDA-Ni(2+) nanoparticles. The Ni(2+) on the surface of nanoparticles provides abundant docking sites for histidine, and the composite nanoparticles showed potential applications in the separation and purification of histidine-tagged (His-tagged) proteins. Meanwhile, the presence of the superparamagnetic core (Fe(3)O(4)) in the ... More
Diffusion and capture permits dynamic coupling between treadmilling FtsZ filaments and cell division proteins.
Authors:Baranova N,Radler P,Hernández-Rocamora VM,Alfonso C,López-Pelegrín M,Rivas G,Vollmer W,Loose M
Journal:Nature microbiology
PubMed ID:31959972
Most bacteria accomplish cell division with the help of a dynamic protein complex called the divisome, which spans the cell envelope in the plane of division. Assembly and activation of this machinery are coordinated by the tubulin-related GTPase FtsZ, which was found to form treadmilling filaments on supported bilayers in ... More