GlycoLink™ Micro Immobilization Kit
GlycoLink™ Micro Immobilization Kit
Thermo Scientific™

GlycoLink™ Micro Immobilization Kit

Thermo Scientific GlycoLinkマイクロ固定化キットには、アフィニティー精製アプリケーションやタンパク質間相互作用の研究に使用する、酸化糖基を介して糖タンパク質を固定化するアフィニティーカラムと試薬が含まれています。GlycoLinkマイクロ固定化キットの特長:•小規模な反応に最適—酸化した抗体または他の糖タンパク質を樹脂1 mlあたり50~500µ g固定化します• 高速かつ効率的—最短30分で固定化、4時間以内にほとんどの糖タンパク質の少なくとも90詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
8894210カラム
製品番号(カタログ番号) 88942
価格(JPY)
107,300
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数量:
10カラム
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Thermo Scientific GlycoLinkマイクロ固定化キットには、アフィニティー精製アプリケーションやタンパク質間相互作用の研究に使用する、酸化糖基を介して糖タンパク質を固定化するアフィニティーカラムと試薬が含まれています。

GlycoLinkマイクロ固定化キットの特長:

小規模な反応に最適—酸化した抗体または他の糖タンパク質を樹脂1 mlあたり50~500µ g固定化します
高速かつ効率的—最短30分で固定化、4時間以内にほとんどの糖タンパク質の少なくとも90 %のカップリングを達成(効率はグリコシル化の量と種類に依存します
特定の固定化—ヒドラジド活性化UltraLink樹脂は、糖(例えば、シアル酸)基がピリオド酸塩で穏やかに酸化された精製糖タンパク質にのみ共役します。
安定した接着—ヒドラゾン結合の共鳴構造が十分に安定しているため、1回のバッチで複数の親和性精製が可能で、安定化工程は不要です
抗体機能を保持—Fc領域を介してIgGを固定化することで、両方の抗原結合部位が標的を捕捉するために利用可能な状態を維持します

GlycoLinkキットは、ヒドラジド活性化樹脂と特殊な触媒を使用して、一般的にFc部分に豊富な炭水化物(グリコシル化)を持つポリクローナル抗体のアフィニティカラムを調製します。過ヨウ素酸酸化性糖質基を含むグリコシル化タンパク質(モノクローナル抗体も含む)は、これらのキットで固定化し、再利用可能なアフィニティーカラムを作成できます。このヒドラジド固定化化学によって固定化された抗体は、抗原結合部位を遮るものがなく、最適な精製能力を備えています。安定した糖タンパク質または抗体を持つ調製済みカラムは、結合能を大幅に損なうことなく、アフィニティー精製のために少なくとも5回再生および再利用できます。

アプリケーション:
•共有結合抗体を用いた抗原の精製
• 目的の糖タンパク質の結合パートナーを決定します
• 大規模なアフィニティ精製を行います

GlycoLink固定化キット法は、ポリクローナル抗体などの糖タンパク質の場合に特に有用です。それは、意図されたアフィニティ精製のために重要な活性結合部位に干渉しないドメインでの分子の付着を可能にすることができるからです。糖タンパク質中の糖鎖には、シスジオール基を持つ一般的な糖が含まれており、これらの糖はメタ過ヨウ素酸ナトリウムで容易に酸化され、アルデヒドを生成します。酸化によって生じたアルデヒド基は、ヒドラジドレジンのヒドラジド基と反応し、安定した共有結合を形成します。この反応はThermo Scientific GlycoLink結合触媒によって強化され、結合効率が向上し、インキュベーション時間が短縮されます。結合反応全体は、触媒を含む単純な非アミンバッファーで2~4時間で起こります。抗体や代表的な糖タンパク質との結合効率は一般的に85%を超えており、Thermo Scientific UltraLinkヒドラジン樹脂1ミリリットルあたり1~10mgのタンパク質を固定化することができます。

その他の製品データ
糖タンパク質の固定化・共役化の改善

関連製品
GlycoLink™固定化キット
UltraLink™ ヒドラジド樹脂
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
カラムタイプアフィニティー、UltraLink™レジン
概要GlycoLinkマイクロ固定化キット
フォーマットKit, Microcentrifuge, Spin Column
数量10カラム
固定相ヒドラジド
対応可能対象10カラム、1カラムあたり50~500 μgの糖タンパク質を固定化
容量(メートル法)Immobilizing 50 to 500 μg of GlycoProtein per Column
製品ラインGlycoLink
タイプ固定化キット
Unit SizeEach
組成および保存条件
対応範囲:1カラムあたり50~500µ gの糖タンパク質を固定化
•GlycoLink カラム、0.1 mL、10カラム
• GlycoLink 結合バッファー、100 mL
• アニリン、0.2 mL
• 洗浄バッファー、60 mL
• メタ過ヨウ素酸ナトリウム、0.5 g
•、Zebaスピン脱塩カラム、0.5 mL、10カラム
• PBSパック(500 mLを作成)、1パック
• カラムアクセサリ、各10

4℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

How many times can the same affinity column in the GlycoLink Immobilization Kit be used for purification?

The stability of the immobilized protein and the type of elution buffer used determines how many times a column can be reused. Typically, the columns can be reused at least five times without significant loss in performance.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

Will Hydrazide UltraLink Resins in the GlycoLink Immobilization kit couple chicken IgY?

Yes. Chicken antibodies have a total of 4 N-linked glycosylation sites and will couple to the resin.

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Can the Hydrazide UltraLink Resin in the GlycoLink Immobilization kit couple all types of antibodies?

The resin will couple any antibody that is adequately glycosylated. Although monoclonal antibodies are typically under-glycosylated, many have been effectively immobilized to this resin. To determine if a monoclonal antibody is glycosylated use the Thermo Scientific Glycoprotein Carbohydrate Estimation Kit (Cat. No. 23260).

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When oxidizing with sodium meta-periodate, is it possible to over-oxidize the antibody when using the GlycoLink Immobilization Kit?

If too much sodium meta-periodate is used or the sample is incubated for too long the oxidation can cause the protein to breakdown or favor an amine linkage to the resin. Furthermore, if used in excess, methionine residues might become oxidized. Typically, using 10 mM sodium meta-periodate for 30 minutes will oxidize only the carbohydrates and does not affect protein function.

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How do I oxidize a glycoprotein or antibody when using the GlycoLink Immobilization Kit?

The antibody or other glycoprotein is first diluted or desalted into the coupling buffer and transferred to a vial containing sodium meta-periodate at a final concentration of 10 mM (1 mM is sufficient for sialic acid residues). The mixture is incubated for 30 minutes at room temperature in the dark. Sodium meta-periodate concentration can be increased to 25mM if oxidation is not sufficient at 10 mM. Care must be taken not to over-oxidize the glycoprotein.

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