Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

Citations & References (13)

Invitrogen™

Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

製品番号（カタログ番号）	数量
A12221	200 Assays

製品番号（カタログ番号） A12221

価格（JPY）

88,700

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200 Assays

Amplex™ Redグルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターを使用してグルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼ活性を検出する高感度でシンプルな手法を提供します。

蛍光マイクロプレートアッセイの全製品ラインアップをご覧ください。

•10 nMのL-グルタミン酸または40 µU/mLの精製されたL-グルタミン酸オキシダーゼという低濃度を検出できます
• 複数のタイムポイントでの測定が可能なフォーマットです
• 自己蛍光干渉を最小限に抑えるように設計されています

Amplex™ Redグルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼアッセイキットは、蛍光マイクロプレートリーダーまたはフルオロメーターを使用して、グルタミン酸活性の検出またはグルタミン酸オキシダーゼ活性の連続的なモニタリングを行う超高感度の手法を提供します。このアッセイでは、L-グルタミン酸がグルタミン酸オキシダーゼによって酸化され、α-ケトグルタル酸、NH₃、および過酸化水素が産生されます。L-アラニンおよびL-グルタミン酸–ピルビン酸トランスアミナーゼは、α-ケトグルタル酸のアミノ基転移によりL-グルタミン酸を再生する反応に含まれており、初期反応が複数サイクル繰り返されるため、生成される過酸化水素が有意に増幅されます。過酸化水素は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）の触媒作用による反応において1：1の化学量論比で10アセチル-3,7ジヒドロキシフェノキサジン（Amplex™ Red試薬）と反応し、高蛍光性産物であるレゾルフィンを生成します。

レゾルフィンの最大吸光波長と最大蛍光波長はそれぞれ571 nmと585 nmであるため、大部分の生物学的サンプルでは、自己蛍光による干渉はほとんど発生しません。

Amplex™ Redアッセイは、幅広い研究にご利用いただけます
検証済みのAmplex™ Redアッセイは幅広く用意されており、細胞シグナル伝達および脂質、神経生物学、炎症および免疫機能、代謝の研究にご利用いただけます。また、より高い感度と明るい蛍光性を提供する第二世代試薬であるAmplex™ UltraRed試薬（カタログ番号A36006）や、Amplex™ Red/UltraRed停止試薬も提供しています（カタログ番号A33855）。Amplex™ Red/UltraRed停止試薬を使用することで、ユーザーが決定した時点で蛍光シグナル生成反応を終了させることができるため、利便性と制御性が提供されます。停止試薬を添加してから少なくとも3時間は、蛍光シグナルは安定を保ちます。カスタムアッセイの設計およびパッケージもご利用いただけます。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

検出法蛍光

染色剤タイプその他の標識または色素

フォーマット96-ウェルプレート

数量200 Assays

出荷条件室温

使用対象（アプリケーション）グルタミン酸／グルタミン酸オキシダーゼアッセイ

使用対象 (装置)フルオロメータ, マイクロプレートリーダー

製品ラインAmplex

製品タイプRed Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

Unit SizeEach

組成および保存条件

フリーザー（-5℃～-30℃）に保存し、遮光してください。

よくあるご質問（FAQ）

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H₂O₂ oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H₂O₂ required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H₂O₂ in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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引用および参考文献 (13)

引用および参考文献

Abstract

Glutamate excitotoxicity is involved in cell death caused by tributyltin in cultured rat cortical neurons.

Authors:Nakatsu Y, Kotake Y, Komasaka K, Hakozaki H, Taguchi R, Kume T, Akaike A, Ohta S,

Journal:Toxicol Sci

PubMed ID:16207939

'Tributyltin, an endocrine-disrupting chemical, has been used as a heat stabilizer, agricultural pesticide, and component of antifouling paints. In this study, the neurotoxicity of tributyltin was investigated in cultured rat cortical neurons. Tributyltin caused marked time- and dose-dependent increases in the number of trypan blue-stained cells. Measurement of extracellular glutamate ... More

Iron alters glutamate secretion by regulating cytosolic aconitase activity.

Authors:McGahan MC, Harned J, Mukunnemkeril M, Goralska M, Fleisher L, Ferrell JB

Journal:Am J Physiol Cell Physiol

PubMed ID:15613494

'Glutamate has many important physiological functions, including its role as a neurotransmitter in the retina and the central nervous system. We have made the novel observations that retinal pigment epithelial cells underlying and intimately interacting with the retina secrete glutamate and that this secretion is significantly affected by iron. In ... More

Bispecific small molecule-antibody conjugate targeting prostate cancer.

Authors:Kim CH, Axup JY, Lawson BR, Yun H, Tardif V, Choi SH, Zhou Q, Dubrovska A, Biroc SL, Marsden R, Pinstaff J, Smider VV, Schultz PG,

Journal:

PubMed ID:24127589

'Bispecific antibodies, which simultaneously target CD3 on T cells and tumor-associated antigens to recruit cytotoxic T cells to cancer cells, are a promising new approach to the treatment of hormone-refractory prostate cancer. Here we report a site-specific, semisynthetic method for the production of bispecific antibody-like therapeutics in which a derivative ... More

Single cell glutamate analysis in Aplysia sensory neurons.

Authors:Drake TJ, Jezzini S, Lovell P, Moroz LL, Tan W

Journal:J Neurosci Methods

PubMed ID:15848241

'Glutamate is the major excitatory neurotransmitter in the central nervous system. However, techniques and assays available for the determination and detection of glutamate are limited. Here we have applied an effective glutamate assay toward the high-throughput analysis of single neurons. Initial physiological studies and recent immunohistochemical data strongly suggested that ... More

P2X agonist BzATP interferes with amplex-red-coupled fluorescence assays.

Authors:León D, Marín-García P, Sánchez-Nogueiro J, de la O FO, García-Carmona F, Miras-Portugal MT,

Journal:Anal Biochem

PubMed ID:17562321

'This paper does not have an abstract.'

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