Alexa Fluor™ 647 Hydrazide
Alexa Fluor™ 647 Hydrazide
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 647 Hydrazide

Alexa Fluor™ 647ヒドラジドは、細胞トレーサーとして、また多糖類または糖タンパク質中のアルデヒドまたはケトンを標識する反応性色素として有用です。Alexa Fluor™ 647は、633 nmレーザーラインに最適な励起の遠赤蛍光色素です詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
A205021 mg
製品番号(カタログ番号) A20502
価格(JPY)
65,700
Each
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数量:
1 mg
Alexa Fluor™ 647ヒドラジドは、細胞トレーサーとして、また多糖類または糖タンパク質中のアルデヒドまたはケトンを標識する反応性色素として有用です。Alexa Fluor™ 647は、633 nmレーザーラインに最適な励起の遠赤蛍光色素です。Alexa Fluor™ 647色素は、イメージングやフローサイトメトリーで安定したシグナルを生成するために使用され、水溶性でpH 4~10の影響を受けません。反応性色素製剤に加えて、細胞の標識と検出に最適化されたさまざまな抗体、ペプチド、タンパク質、トレーサー、および増幅基質に結合したAlexa Fluor™ 647色素も提供しています(詳細)。

このAlexaFluor™ヒドラジドに関する詳細情報:

• 蛍光色素標識:Alexa Fluor™ 647色素
• 反応基:ヒドラジド
• 反応性:
•複合体の多糖類または糖タンパク質のアルデヒドまたはキートーン Ex/Em:649/666 nm
• 吸光係数:250,000 cm-1M-1
• スペクトルが類似している色素:APC、Cy5
• 分子量:約1,200

細胞トラッキングおよびトレーシング用途
Alexa Fluor™ヒドラジドおよびヒドロキシルアミンは、低分子量、膜非透過性、アルデヒド固定性の細胞トレーサーとして有用であり、蛍光スペクトルが類似した他の蛍光色素由来の細胞トレーサーよりも明るい蛍光と優れた光安定性を示します。これらは、微量注入、パッチピペットからの注入、または当社のInflux™飲作用細胞ローディング試薬によって誘発された取り込みにより、簡単に細胞にロードできます。細胞トラッキングおよびトレーシングに関する詳細はこちら。

糖タンパク質および多糖類標識アプリケーション
Alexa Fluor™ヒドラジドおよび水酸化物は反応性分子で、アルデヒドまたはケトンを含む生体分子に蛍光標識を付加するために使用できます。アルデヒドおよびケトンは、過ヨウ素を介したビジオールの酸化により、多糖類および糖タンパク質に導入できます。ガラクトースオキシダーゼは、糖タンパク質の末端ガラクトース残基をアルデヒドに酸化するのにも使用できます。

ヒドラジド
とヒドロキシルアミンヒドラジン誘導体はケトンやアルデヒドと反応し、比較的安定したヒドラゾンを生成します。ヒドロキシルアミン誘導体(アミノオキシ化合物)はアルデヒドおよびケトンと反応してオキシムを生成します。オキシムは加水分解安定性に関して、ヒドラゾンよりも優れています。水素化ホウ素ナトリウム(NaBH 4)を使用すると、ヒドラゾーンとオキシムの両方を低減して、結合の安定性をさらに高めることができます。

タンパク質および抗体標識の詳細
当社は、お客様の出発物質および実験設定に適合するMolecular Probes™抗体およびタンパク質ラベリングキットを幅広く取り揃えています。その他の選択肢は、当社の抗体標識キットをご覧になるか、当社の標識化学選択ツールをご利用ください。標識キットの詳細については、Molecular Probes™ハンドブックのタンパク質および核酸の標識キット—セクション 1.2をご覧ください。

当社では、お客様に合わせてカスタムコンジュゲートを実施
当社のオンラインカタログで目的の製品が見つからない場合は、カスタム抗体またはタンパク質コンジュゲートをご用意ください。当社のカスタム結合サービスは効率的かつ機密性が確保され、品質が保証されています。当社はISO 9001:2000認証を取得しています。

関連製品
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50~100 μg用Antibody Conjugate Purification Kit(A33088
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
化学反応性カルボン酸、ケトン、アルデヒド
発光666 nm
励起649 nm
標識または色素Alexa Fluor™ 647
製品タイプヒドラジド
数量1 mg
反応性部分アミン,ヒドラジド
出荷条件室温
標識タイプAlexa Fluor色素
製品ラインAlexa Fluor
Unit SizeEach
組成および保存条件
室温で保存し、光から保護します。

よくあるご質問(FAQ)

What dye can I use that is non-reactive and can show an injection site?

The non-reactive Alexa Fluor and Alexa Fluor hydrazide derivatives may be used for injection site visualization. Other options include the fluorescent polystyrene microspheres, FluoSpheres, and dye-conjugated dextrans. The hydrazide derivatives and 'fixable' dextrans are retained by cross-linking using an aldehyde-based fixative.

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I injected a fluorescent tracer, but cannot detect it after tissue is fixed and sectioned. What am I doing wrong?

Confirm that the tracer you are using crosslinks to proteins or has a primary amine for fixation-either a hydrazide, lysine fixable dextran, or a protein conjugate.
Use aldehyde-based fixatives to cross link the amines on the tracer.
Inject a larger amount or higher concentration of the tracer. Tracers are generally injected at 1-20% concentrations (10 mg/mL or higher).
Confirm that you are using the correct fluorescent filter for detection. You can perform a spot test by pipetting a small amount of the undiluted stock solution of the tracer onto a slide, then view under the filter you are using on your microscope. This will confirm if the tracer fluorescence can be detected and the fluorescent microscope filter is working properly.
Review tissue fixation and handling procedures to confirm if any reagents or processing procedures could be affecting the tracer.

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I have labeled my neurons with an Alexa Fluor conjugated biocytin to look at transport but I wanted to examine only retrograde transport and biocytin appears to be moving retrograde and anterograde. What should I do?

Observing both types of transport is typical for biocytin. The conjugated cholera toxin subunit B products have been observed to travel only retrogradely.

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Do you have a neuronal tracer similar to Lucifer Yellow but in another fluorescent color?

Lucifer Yellow CH is a hydrazide, so any of our Alexa Fluor or fluorescent hydrazides could potentially be used. A listing of them can be found here. (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing/hydrazides-biocytins.html#prd)

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How do I know which tracer to choose for my experiment?

Factors to consider are size of tracer, method of delivery (injection, direct application to tissue, etc.), and if the tracer needs to be fixable. Here are some links to details about the various classes of neuronal tracers we offer and how to choose between them:

Neuronal Tracing (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing.html)
Choosing a Tracer (https://www.thermofisher.com/us/en/home/references/molecular-probes-the-handbook/fluorescent-tracers-of-cell-morphology-and-fluid-flow/choosing-a-tracer.html)
Imaging Analysis (http://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/bioprobes-50-journal.pdf)

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引用および参考文献 (4)

引用および参考文献
Abstract
Zebrafish calls for reinterpretation for the roles of p/q calcium channels in neuromuscular transmission.
Authors:Wen H, Linhoff MW, Hubbard JM, Nelson NR, Stensland D, Dallman J, Mandel G, Brehm P,
Journal:J Neurosci
PubMed ID:23616544
A long-held tenet of neuromuscular transmission is that calcium-dependent neurotransmitter release is mediated by N-type calcium channels in frog but P/Q-type channels in mammals. The N-type assignment in frog is based principally on pharmacological sensitivity to ?-conotoxin GVIA. Our studies show that zebrafish neuromuscular transmission is also sensitive to ?-conotoxin ... More
Conformations of the signal recognition particle protein Ffh from Escherichia coli as determined by FRET.
Authors:Buskiewicz I, Peske F, Wieden HJ, Gryczynski I, Rodnina MV, Wintermeyer W,
Journal:J Mol Biol
PubMed ID:16005894
The signal recognition particle (SRP) initiates the co-translational targeting of proteins to the plasma membrane in bacteria by binding to the N-terminal signal sequence emerging from the translating ribosome. SRP in Escherichia coli is composed of one protein, Ffh, and 4.5S RNA. In the present work, we probe the structure ... More
Differential regulation of macropinocytosis by Abi1/Hssh3bp1 isoforms.
Authors:Dubielecka PM, Cui P, Xiong X, Hossain S, Heck S, Angelov L, Kotula L,
Journal:PLoS One
PubMed ID:20479892
BACKGROUND: Macropinocytosis, which is a constitutive cellular process of fluid and macromolecule uptake, is regulated by actin cytoskeleton rearrangements near the plasma membrane. Activation of Rac1, which is proposed to act upstream of the actin polymerization regulatory Wave 2 complex, has been found to correlate with enhanced macropinocytosis. One of ... More
Selective release of molecules from Weibel-Palade bodies during a lingering kiss.
Authors:Babich V, Meli A, Knipe L, Dempster JE, Skehel P, Hannah MJ, Carter T,
Journal:Blood
PubMed ID:18252862
Exocytosis of specialized endothelial cell secretory organelles, Weibel-Palade bodies (WPBs), is thought to play an important role in regulating hemostasis and intravascular inflammation. The major WPB core proteins are Von Willebrand factor (VWF) and its propolypeptide (Proregion), constituting more than 95% of the content. Although the composition of the WPBs ... More