Pierce™ SMCC

Thermo Scientific Pierce SMCCは、N-ヒドロキシスクシンイミド（NHS）エステル基およびマレイミド基を有するヘテロ二官能性クロスリンカーで、アミン含有分子やスルフヒドリル基含有分子との共有結合を可能にします。NHSエステルはpH 7～9で一級アミンと反応してアミド結合を形成し、マレイミドはpH 6.5～7.5でスルフヒドリル基と反応して安定なチオエーテル結合を形成します。水溶液中において、NHSエステル加水分解は、pHによって速度が上昇する競合反応です。マレイミド基はNHSエステル基よりも安定していますが、ゆっくりと加水分解し、7.5を超えるpH値でスルフヒドリル基に対する反応特異性を失います。このような理由から、これらのクロスリンカーとの結合は通常pH 7.2～7.5で行われ、NHSエステル（アミン標的）との反応はマレイミド（スルフヒドリル標的）反応の前に、または同時に行われます。

この試薬のスペーサーアームにあるシクロヘキサン環は、この環を含まない類似の試薬と比較して、マレイミド基の加水分解速度を低下させます。この特徴により、SMCCでマレイミドを活性化させたタンパク質を凍結乾燥させ、後にスルフヒドリル基含有分子に結合するために保存できます。マレイミド活性化タンパク質製品の多くは、このように生産されています。

Thermo Scientific No-Weigh製品は、あらかじめ分注された形で提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。

SMCCの特長：

•反応基：NHSエステルおよびマレイミド
•反応対象：アミノ基およびスルフヒドリル基
•切断不可能
•Sulfo-SMCCより高い水溶性（まずDMFまたはDMSOに溶解）
•高純度の結晶試薬は高純度マレイミド活性化誘導体の作成に使用可能
•シクロヘキサンクロスリンクはマレイミド基の安定性を向上させるため、SMCCはタンパク質のマレイミド活性化に最適なクロスリンカーです。マレイミド基は、0.1 Mのリン酸ナトリウムバッファー、pH 7.0、4℃で64時間安定しています。

スクシンイミジル-4-（N-マレイミドメチル）シクロヘキサン-1-カルボン酸（SMCC）は、切断不可能な膜透過性クロスリンカーです。アミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド（NHSエステル）とスルフヒドリル反応性マレイミド基を含有しています。NHSエステルは、pH 7～9で1級アミンと反応して安定したアミド結合を形成します。マレイミドはpH 6.5～7.5でスルフヒドリル基と反応して、安定したチオエーテル結合を形成します。SMCCおよびSulfo-SMCCのマレイミド基は、スペーサーアーム内のシクロヘキサンクロスリンクにより、最大pH 7.5まで安定しています。

アプリケーション：
• 抗体の酵素標識 - 酵素と抗体の両方の特異性を保持
• 1ステップまたは2ステップのクロスリンク反応により特異的なバイオコンジュゲートを作成
• ハプテン結合用のスルフヒドリル反応性、マレイミド活性化キャリアタンパク質を作成

仕様：
当社は、SMCCが特異性が非常に高いバイオコンジュゲートおよびマレイミド活性化タンパク質を作成するよう、非常に高度な仕様に従って製造しているため、データの完全性を確保し、最高レベルのクロスリンクの一貫性を提供します。SMCCの各ロットは、以下の最低限の仕様を満たすことが試験されています。

• 同一性：IRスキャンでは、SMCCクロスリンカーの構造および官能基に特有のピークのみが現れる
• 純度：NMRで≧ 92%

製品リファレンス：
クロスリンカーアプリケーションガイド - この製品に関する最近の参考文献を検索