GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kitは、複数の重複するDNA断片を15~60分間の1ステップの等温反応でシームレスにリンクさせる技術により、DNAのアセンブリとクローニングを可能にします。異なる長さのDNAフラグメントを、フラグメント間の相補的なオーバーラップを使用して同様にアセンブルします。このアプローチ固有の柔軟性は、小規模および大規模なDNAコンストラクトに適しており、単一のインサートと複数のインサートの両方に対応します。得られる産物は、形質転換、PCR、ローリングサークル増幅(RCA)などのさまざまなダウンストリームアプリケーションに使用できます。GeneArt GibsonアセンブリHiFiクローニングキット、エレクトロコンピテントセルは、マスターミックス、ポジティブコントロール、水、ElectroMAX DH10Bエレクトロコンピテント大腸菌を含むキット一式です。
GeneArt GibsonアセンブリHiFiクローニングキットの特長:
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シンプル — 最大6つのDNAフラグメントを、1回の反応でシームレスにアセンブルおよびクローニングします
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効率的 — 高い忠実性で、他の方法よりも多くの適切なクローンが得られます
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柔軟 — 設計ガイドラインにより、ご希望のあらゆるベクターにアセンブリできます
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便利 — マスターミックスキット、および、ケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセル入りのクローニングキットとしてご利用いただけます
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信頼性 — 科学文献での引用は4,000件を超えており、優れた成果が示されています
複数のフラグメントのシームレスなアセンブリGeneArt GibsonアセンブリHiFiクローニングはシンプルなワンステッププロセスです。最大6つのフラグメントを独自の酵素ミックスで組み合わせ、余分な配列や傷を残さずに末端の相同性を共有してDNAフラグメントをアセンブルします(シームレス)。15~60分間インキュベーションすると、アセンブリ反応の一部でケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセルが形質転換され、翌日に解析可能なクローンが得られます。必要な20~40塩基対の末端相同性は、合成用のde novoフラグメントに設計されているか、カスタムDNAオリゴを用いたPCR増幅によって容易に設計できます。この特殊な酵素ミックスは、シームレスで共有結合されたDNAコンストラクトを形成し、高い効率を実現します。
最大限の効率を実現する堅牢なメソッドGeneArt GibsonアセンブリHiFiメソッドでは共有結合の最終産物が得られるため、ケミカルコンピテントセルまたはエレクトロコンピテントセルを利用して形質転換効率を最大限に高めることができ、特に困難なコンストラクトでは、適切なクローンが見つかる確率が上昇します。制限酵素、ライゲーション、組換え部位は必要ありません。この方法は、不要な余分の塩基がない完全にシームレスなコンストラクトを提供します。
優れた汎用性を提供しますGeneArt GibsonアセンブリHiFiメソッドは汎用性を提供します。DNAセグメントの迅速な組み合わせ、追加、削除、交換により多くの技術を合理化し、サブクローニングの必要性を排除し、クローニングワークフローの時間と労力を節約します。
便利なフォーマットGeneArt GibsonアセンブリHiFiキットには、以下のような複数のフォーマットがあります。
•GeneArt GibsonアセンブリHiFiクローニングキット、エレクトロコンピテントセル(ElectroMAX DH10Bエレクトロコンピテントセル付き)(このページ)
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GeneArt GibsonアセンブリHiFi クローニングキット、ケミカルコンピテントセル(One Shot TOP10ケミカルコンピテントセル付き)
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GeneArt GibsonアセンブリHiFiマスターミックスキット(細胞なしクローニングキット)
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.