mirVana™ miRNA Isolation Kit, with phenol
<i>mir</i>Vana&trade; miRNA Isolation Kit, with phenol
Invitrogen™

mirVana™ miRNA Isolation Kit, with phenol

mirVana™ miRNA単離キットは、ガラス繊維フィルター(GFF)ベースの効率的な方法を使用して、組織や細胞から小型RNAを迅速に単離します。この方法では、数キロベースから10-merまでのサイズのトータルRNAを単離できます。各キットには、トータルRNA詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
AM156040 Preps
製品番号(カタログ番号) AM1560
価格(JPY)
83,200
Each
カートに追加
数量:
40 Preps
価格(JPY)
83,200
Each
カートに追加
mirVana™ miRNA単離キットは、ガラス繊維フィルター(GFF)ベースの効率的な方法を使用して、組織や細胞から小型RNAを迅速に単離します。この方法では、数キロベースから10-merまでのサイズのトータルRNAを単離できます。各キットには、トータルRNA(小型RNAを含む)を40回単離するのに十分な試薬と消耗品、大型RNA分画と小型RNA分画を20回分離するのに十分な試薬と消耗品が含まれています。

このキットの特長:

•小型RNAを含むトータルRNAを効率的に単離
• 小型RNA(200 nt未満)を濃縮して下流での分析の感度を向上
• 30分のシンプルな手順
• miRNA、siRNA、shRNA、snRNAの分析に最適
• ほとんどすべての種類の細胞や組織に適合

小型RNAの効率的な回収
現行のRNA精製手順では、有機抽出を行った後で、アルコール沈殿を行うか、GFFまたはケイ酸塩マトリックス上で核酸分子を吸着します。しかし、前者の手順はアルコール沈殿が必要であり、これは時間がかかるうえに、小型RNAを効率的に回収できません。後者の手順は通常、かなりの量の小型RNAが失われます。mirVana™ miRNA Isolation Kitは、有機抽出の後、特殊な結合および洗浄条件の下でGFFによる精製を行います。その結果、大型のmRNAやリボソームRNAから10-mer程度の小型のRNAまで、すべてのRNAをほとんどすべての種類の細胞や組織から効果的に回収できます。mirVana™ miRNA単離キットは、102~107個の培養細胞または0.5~250 mgの組織で構成されたサンプルから、小型RNAを含むトータルRNAを単離できます。

小型RNAの濃縮
mirVana™ miRNA単離キットは、10 ntを超えるすべてのRNAを効率的に精製しますが、小型RNA種で特異的に濃縮または除去されたRNA分画を単離する手順も含まれています。mirVana™ miRNA Isolation Kitの濃縮手順により、約200 nt以下のサイズのRNA分子を大型RNA種から効率的に精製できます。この方法で得られたRNA製剤は、miRNA、siRNA、snRNAが高度に濃縮されています。mirVana™ miRNA Isolation Kitを使用して小型RNAを濃縮すると、トータルRNAを用いて同じアッセイを実施した場合と比較して、小型RNAの検出感度が向上し、バックグラウンドも少なくなります。

関連製品
標準キットに含まれる酸性フェノール:クロロホルムなどの有機化学薬品の輸送コストを懸念されるお客様のために、mirVana™ miRNA Isolation Kit without Phenolを提供しています。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
溶出量100 μL
最終産物タイプトータルRNA、トランスクリプトームRNA、siRNA、snRNA、microRNA
使用対象(アプリケーション)MicroRNA解析
高スループット適合性ハイスループット非対応(手動)
精製時間30分
数量40 Preps
出荷条件Room Temperature
出発物質量最大250 mgの組織、最大10^7個の細胞
収量Cells: ≤16 μg RNA per 50,000 cells
Tissue: ≤160 μg per 5 mg
Isolation Technologyスピンカラム(ガラス繊維フィルター), 有機物抽出
サンプルタイプ細菌, 細胞, 植物サンプル, 組織, ウイルスサンプル, 酵母, Enzymatic Reactions
Unit SizeEach
組成および保存条件
• 30 ml miRNA洗浄溶液I(室温)
• 50 ml洗浄溶液2/3(室温)
• 80×収集チューブ(室温)
• 40×フィルターカートリッジ(室温)
• 100 ml溶解/結合バッファー(4℃)
• 10 ml miRNAホモジネート添加剤(4℃)
• 100 ml酸性フェノール:クロロホルム(4℃)
• 1.4 mlゲルローディングバッファーII(-20℃)
• 5 ml溶出液(-20℃、4℃、または室温)

よくあるご質問(FAQ)

What kit would you recommend for isolation of miRNA from tissue, cells, or liquid samples?

For tissue or cells, we recommend the mirVana miRNA Isolation Kit (Cat. No. AM1560), while for liquid samples, we recommend the mirVana Paris RNA and Native Protein Purification Kit (Cat. No. AM1556). For high-throughput miRNA isolation we recommend using the MagMAX mirVana Total RNA Isolation kit (Cat. No. A27828)

What are different methods for cleaning up my miRNA sample?

- Precipitation of miRNA: Follow the instructions for the mirVANA miRNA Isolation Kit or the mirVANA PARIS RNA and Native Protein Purification Kit.
- Double phenol/guanidium (chaotropic reagent) extraction: Disrupt tissue with phenol/guanidine, then extract with phenol, centrifuge, remove the supernatant, and precipitate the RNA.
- Glass-fiber filter: Disrupt the tissue in a chaotropic agent, bind the RNA to a glass-fiber filter, then wash off unbound DNA/protein/salt/nucleotides and elute the RNA.

What type of sample can be used with TaqMan MicroRNA Assays?

One to ten nanograms of total RNA per 15 µL RT reaction is recommended for use with the TaqMan MicroRNA Assay. We have successfully detected miRNAs in as little as 25 pg of total RNA (~100 cells) in samples where the miRNA was highly abundant. The total RNA isolation procedure used must preserve small RNA species. We recommend the Invitrogen mirVana miRNA Isolation Kit (Cat. No. AM1560) or TRI reagent (Cat. No. AM9738).

When using the mirVana miRNA Isolation Kit, with phenol (Cat. No. AM1560), can I store homogenized tissue RNA lysate in the lysis buffer at -80 degrees C?

Yes, the RNA lysates can be stored at -80 degrees C for up to 2 months.

What kit do you recommend to capture small RNA that is &gt;17 nt in size?

We recommend using the mirVana miRNA Isolation Kit (Cat. No. AM1560, AM1561), both of which are designed to capture small RNAs, such as miRNAs, tRNAs, etc. Purification of RNAs as small as 20 nt has been obtained in-house using these kits. Note: Cat. No. AM1561 does not contain phenol, but is required for the procedure. Phenol can be purchased separately (Cat. No. AM9720).

引用および参考文献 (6)

引用および参考文献
Abstract
[Differential expression profile of microRNA between hyperplastic scar and normal skin].
Authors:Ning P, Liu DW, Mao YG, Peng Y, Lin ZW, Liu DM,
Journal:Zhonghua Yi Xue Za Zhi
PubMed ID:22781298
To explore the miRNA differential expression profiles of hyperplastic scar and normal skin so as to further elucidate the pathogenesis of hyperplastic scar and search for new therapeutic targets. The total RNA was extracted from 5 human hyperplastic scar and normal skin tissues by Trizol. The specimens were collected from ... More
Circulating microRNAs in serum: novel biomarkers for patients with bladder cancer?
Authors:Scheffer AR, Holdenrieder S, Kristiansen G, von Ruecker A, Müller SC, Ellinger J,
Journal:World J Urol
PubMed ID:23266581
'PURPOSE: Recent studies indicate that circulating microRNAs in serum/plasma are a novel class of non-invasive biomarkers with diagnostic and prognostic information. So far, circulating microRNAs have not been analyzed in patients with bladder cancer. METHODS: We collected serum from patients with non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC), muscle invasive bladder cancer ... More
[Isolation, identification and analysis of the expression profile of miRNAs in Aedes albopictus].
Authors:Zheng PM, Wu JY, Gu JB, Tu ZJ, Chen XG,
Journal:Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao
PubMed ID:20423824
'To verify the miRNA in Aedes albopictus and characterize the expression profile of several miRNAs across all the life stages of Aedes albopictus. Based on the published miRNA sequences of Anopheles gambiae and Aedes aegypti, 6 DIG-labeled antisense probes were synthesized. The total RNAs from Aedes albopictus in 6 developmental ... More
MicroRNA expression profiles in the progression of prostate cancer-from high-grade prostate intraepithelial neoplasia to metastasis.
Authors:Leite KR, Tomiyama A, Reis ST, Sousa-Canavez JM, Sañudo A, Camara-Lopes LH, Srougi M,
Journal:Urol Oncol
PubMed ID:21880514
'Models of the multistep process related to cancer progression have been designed for many cancers including prostate. The aim of this study is to propose a new model including a possible role for recently described micro RNAs in prostate cancer (CaP) progression. Sixty-three patients underwent radical prostatectomy to treat localized ... More
A model for data analysis of microRNA expression in forensic body fluid identification.
Authors:Wang Z, Luo H, Pan X, Liao M, Hou Y,
Journal:Forensic Sci Int Genet
PubMed ID:21903498
MicroRNAs (miRNAs, 18-25 bases in length) are small, non-coding RNAs that regulate gene expression at the post-transcriptional level. MiRNA expression patterns, including presence and relative abundance of particular miRNA species, provide cell- and tissue-specific information that can be used for body fluid identification. Recently, two published studies reported that a ... More