RiboPure™ RNA Purification Kit, blood
Invitrogen™

RiboPure™ RNA Purification Kit, blood

RiboPure™血液キットは、全血から高品質RNAを直接単離するためのキットです。このキットは、2種類のRNA精製手法を組み合わせて、下流手順の品質を損なう可能性のある血液成分(タンパク質、ヘム、ゲノムDNA、およびRNase)を効率的に除去します詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
AM192840 preps
製品番号(カタログ番号) AM1928
価格(JPY)
127,100
Each
数量:
40 preps
RiboPure™血液キットは、全血から高品質RNAを直接単離するためのキットです。このキットは、2種類のRNA精製手法を組み合わせて、下流手順の品質を損なう可能性のある血液成分(タンパク質、ヘム、ゲノムDNA、およびRNase)を効率的に除去します。このキットには、1回あたり0.3~0.5 mLの全血サンプルから40回のRNA精製を行うのに十分な試薬が含まれています。RiboPure™血液キットには、以下のような利点があります。

•全血からトータルRNAを直接精製 — 白血球を事前に回収する必要はありません
• シンプルで迅速な手順 — 30分未満で血液からRNAを精製できます
• RNAlater™溶液が付属 — 血液サンプルを室温で3日間以上保管できます
• DNA-free™試薬が付属 — RT-PCRやアレイ解析でRNAを使用できます

アプリケーション
RiboPure™血液キットは、RNA精製の前に白血球を単離する必要がないため、全血から高純度のRNAを高収率で生成できます。RiboPure™血液キットを使用して回収したRNAは、リアルタイムでのRT-PCRやアレイ解析など、最も困難なアプリケーションで使用できます。RNAの平均収量は、全血0.5 mLあたり2~4 µgです(変動は、サンプルの白血球数の違いによるものです)。

全血中のRNAの安定化
RNA解析のために血液サンプルを採取する際は、RNAを単離する前にサンプルを保管しておく必要があるケースがよく見られます。RiboPure™血液キットには、全血中のRNAを安定化するためのRNAlater溶液が含まれています。また、細胞の遺伝子発現プロファイルの「凍結」も行います。処理済みサンプルは、室温で長期間(最大3日間以上)安全に保管できます。RNAlater™溶液で保管された血液サンプルは、直接処理された血液サンプルと同等の品質のRNAを生成します(図を参照)。

シンプルな手順で高純度のRNAを生成
RiboPure™血液キットの手順は、3つのステップで構成されています。1)RNAlaterで処理された全血または新鮮な全血に溶解液を直接添加します。2)フェノール/クロロホルム抽出により、初期のRNA精製を行います。3)ガラス繊維フィルターで最終的なRNA精製を行います。その後、キットに含まれているDNA-free™試薬を使用して、追加のDNase処理を実行できます。DNase処理を含むすべての手順を1時間未満で完了できます。

関連製品
当社のGLOBINclear™キットを使用して、選択的にグロビン転写物を除去することにより、RNAを白血球(WBC)mRNA用に濃縮できます。Mouse RiboPure™血液RNA単離キット(カタログ番号AM0951)を使用すると、マウスまたはラットの血液からトータルRNA(およびオプションでmicroRNA)を回収することもできます。Mouse RiboPure™血液キットには、RNAの分解を防ぎ、RNAプロファイルを保持するために、RNAlater溶液があらかじめ充填されたサンプルチューブが含まれています。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
最終産物タイプトータルRNA
使用対象(アプリケーション)マイクロアレイ解析、リアルタイム定量PCR(qPCR)、逆転写酵素PCR(RT-PCR)、ノーザンブロッティング
高スループット適合性ハイスループット非対応(手動)
反応数40プレップ
製品ラインAmbion、RiboPure
精製時間30分
数量40 preps
出発物質量最大0.5 mlの全血
収量4 µg
フォーマットフィルターカートリッジ, チューブ
Isolation Technology有機抽出, スピンカラム
サンプルタイプ血液
TargetトータルRNA
Unit SizeEach
組成および保存条件
• 25 ml溶出液(4℃)
• 40 ml溶解液(4℃)
• 25 ml酸性フェノール:クロロホルム(4℃)
• 5 ml酢酸ナトリウム溶液溶液(4℃)
• 35 ml洗浄溶液1(室温/4℃)
• 70 ml洗浄溶液2/3濃縮液(室温/4℃)
• 100 ml RNAlater™溶液(室温)
• 40×フィルターカートリッジ(室温)
• 80×収集チューブ(室温)
• 100 µl DNase I、8 U/µl(-20℃、霜が付かないこと)
• 850 µl 20X DNaseバッファー(-20℃)
• 1.2 ml DNase不活性化試薬(-20℃)
• 1 mlホルムアルデヒドローディング色素(-20℃)

このキットには、300~500 µlの全血から40回のRNA分離を行うのに十分な試薬が含まれています。

よくあるご質問(FAQ)

What is the difference between the RiboPure Blood Purification Kit (Cat. No. AM1928) and Mouse RiboPure Blood RNA Isolation kit (Cat. No. AM1951)?

The former (Cat. No. AM1928) is for isolation of RNA from human blood and the latter (Cat. No. AM1951) is for isolation of RNA from mouse and rat blood. Both kits have the same columns but differ in protocol and the wash 1 buffer, wash 2/3 buffer, and sodium acetate solutions. We do not recommend using the mouse kit for human blood samples. The mouse kit accommodates the difference in viscosity of mouse/rat vs. human blood and also the higher mouse and rat blood RNA yield. The mouse kit allows recovery of either total RNA containing small RNAs or total RNA depleted of small RNAs based on which protocol in the manual was followed. With the RiboPure Blood Purification Kit, using the standard protocol in the manual, you can isolate total RNA depleted of small RNAs, but with an alternate protocol, you can isolate total RNA containing small RNAs. Alternatively, if you need small RNAs alone, then you should follow the above alternate protocol for isolation of total RNAs containing small RNAs, and then follow Section IVA in the mirVana miRNA Isolation Kit manual (Cat. No AM1560).

What is the composition of the elution solution in the RiboPure-Blood Purification Kit (Cat. No. AM1928)?

Its composition is 0.1 mM EDTA in nuclease-free water.

What is the column cut-off size for the RiboPure RNA Purification Kits?

The column cut-off size is 200 nt. Using a RiboPure kit is not appropriate for miRNA recovery. For miRNA isolation, we would suggest using a mirVana kit, the TRIzol Plus RNA Purification Kit, or the PureLink RNA Micro Kit.

What are the differences in technology between the PureLink RNA Mini Kit and RiboPure RNA Purification Kits?

The PureLink RNA Mini Kit provides rapid column-based purification of total RNA, without organic lysis (phenol/chloroform). You can obtain up to 1,000 µg of purified RNA from a single extraction. The RiboPure RNA Purification Kits combine a phenol/guanidine thiocyanate solution with a glass-fiber filter purification method.

Do you have any tips for RNA isolation when working with blood samples?

Please visit our website for tips for working with blood samples.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNA Sample Collection, Protection, and Isolation Support Center.

引用および参考文献 (5)

引用および参考文献
Abstract
Stability of cord blood RNA measured by house keeping transcripts: relevance for large-scale studies of childhood leukaemia.
Authors:Olsen M, Madsen HO, Hjalgrim H, Ford A, Schmiegelow K
Journal:Leukemia
PubMed ID:17051240
Comparison of the MagNA pure LC automated system and the RiboPure-Blood RNA manual method for RNA extraction from multiple myeloma bone marrow samples conserved in an RNA stabilizer.
Authors:Garcia-Effron G, Gamarra S, Crooke A, Martínez-Sánchez P, Lahuerta J, Martínez-López J
Journal:Int J Lab Hematol
PubMed ID:17474887
'A total of 62 frozen bone marrow specimens conserved in RNA later (Ambion) were processed using two different extraction methods, the MagNA Pure LC system (MAG; Roche) and the manual RiboPure-Blood RNA method (RIBO; Ambion); Beta glucoronidase RNA (GUS) was amplified by LightCycler PCR to evaluate the quality of both ... More
Expression profile of MicroRNAs in young stroke patients.
Authors:Tan KS, Armugam A, Sepramaniam S, Lim KY, Setyowati KD, Wang CW, Jeyaseelan K
Journal:PLoS One
PubMed ID:19888324
The methods currently available for diagnosis and prognosis of cerebral ischaemia still require further improvements. Micro-RNAs (small non-coding RNAs) have been recently reported as useful biomarkers in diseases such as cancer and diabetes. We therefore carried out microRNA (miRNA) profiling from peripheral blood to detect and identify characteristic patterns in ... More
MicroRNA expression in the blood and brain of rats subjected to transient focal ischemia by middle cerebral artery occlusion.
Authors:Jeyaseelan K, Lim KY, Armugam A
Journal:Stroke
PubMed ID:18258830
Several hundred small RNAs called microRNAs (miRNAs) have been identified and characterized from various organisms, including humans. In humans, some of these miRNAs have been found to regulate (patho)physiologic conditions such as tumor progression/regression, cholesterol and glucose homeostasis, etc. In this report, we present data on the miRNAs expressed under ... More
Nonsense mutations in hERG cause a decrease in mutant mRNA transcripts by nonsense-mediated mRNA decay in human long-QT syndrome.
Authors:Gong Q, Zhang L, Vincent GM, Horne BD, Zhou Z
Journal:Circulation
PubMed ID:17576861
Long-QT syndrome type 2 (LQT2) is caused by mutations in the human ether-a-go-go-related gene (hERG). More than 30% of the LQT2 mutations result in premature termination codons. Degradation of premature termination codon-containing mRNA transcripts by nonsense-mediated mRNA decay is increasingly recognized as a mechanism for reducing mRNA levels in a ... More