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分子生物学試薬およびキット
RNA分離および精製製品
RecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE
Invitrogen™
RecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE
製品番号(カタログ番号):
AM1975
関連アプリケーション:
RNA Extraction
テクニカルサポート
オーダーサポート
Invitrogen™
RecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE
製品番号(カタログ番号):
AM1975
関連アプリケーション:
RNA Extraction
テクニカルサポート
オーダーサポート
製品番号(カタログ番号)
AM1975
ユニットサイズ
40 preps
価格(JPY)
価格
86,900
お問い合わせください ›
在庫と納期
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製品番号(カタログ番号)
ユニットサイズ
価格(JPY)
在庫と納期
AM1975
40 preps
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推奨事項
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FFPE向けのRecoverAll™全核酸単離キットは、ホルマリン固定またはパラホルマリン固定のパラフィン包埋(FFPE)組織からの全核酸の抽出に使用します。最大4つの20 µm切片または切片にしていない最大35 mgのコアサンプルから40回の精製を実施するうえで十分な量の試薬が付属しています。FFPE向けのRecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kitの特長:
• microRNAなどの全核酸をFFPE組織から単離する処理に最適化
• 一晩のプロテイナーゼK消化は不要で、午前中に脱パラフィン処理、午後にqRT-PCRを実施可能
•多くの場合、これらの固定されていない組織では50%を上回る収率が可能
•回収した核酸は、次世代シーケンシング、リアルタイムのRT-PCR、PCR、変異のスクリーニング、マイクロアレイ解析に適合
高難度のサンプルからの核酸の抽出
保存されている組織サンプルには、病状に関する貴重な情報が存在していますが、そのようなサンプルから分子分析に適した品質の核酸を単離することがこれまでは困難でした。標準的な保存技術では、組織構造を維持し、腐敗を防止するホルマリンが使用されていますが、同時にホルマリンには、核酸を捕捉し、タンパク質間の架橋とタンパク質と核酸との架橋を通じて核酸を修飾する効果があります。RNA(および一定の範囲のDNA)は、多くの分子解析技術に適しない程度までフラグメント化され、化学的に修飾されることが普通です。FFPE組織のRNAフラグメント化を元に戻すことはできませんが、RecoverAll™キットのプロテアーゼ消化条件は、microRNAなどのあらゆるサイズのRNAフラグメントが比較的短時間で最大量(図を参照)放出されるように設計されています。
RecoverAll™全核酸単離キットソリューション
RecoverAll™全核酸単離キットの手順で人手を必要とする作業時間は45分ほどで、通常は1日未満でRNAの処理が完了します。FFPEサンプルを、キシレンとエタノールによる一連の洗浄を使用して脱パラフィン処理します。次に、RNAまたはDNAの回収に適したインキュベーション時間で、長時間のプロテアーゼ消化条件の下に置きます。つづいて、迅速なガラスフィルター法を使用して核酸を精製し、水または低塩濃度バッファーのいずれかに溶出します。
ほとんどあらゆるダウンストリームアプリケーションにおける核酸
すべてのFFPE組織の場合と同様に、サンプルの固定と保存も、多くの場合は核酸にフラグメント化と修飾が発生する要因となります。このことから、天然状態のRNAをqRT-PCRの場合よりも多量に必要とするダウンストリームアプリケーション(マイクロアレイ解析など)では、最適な結果を得るための修飾が必要になることがあります。DNAは、RNAほど容易にはフラグメント化しませんが、ホルマリンに対する反応性はRNAより高いと思われるので、大量のDNAが放出されるためには、より長いプロテアーゼ消化時間(2日間)が必要です。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
Isolation Technology
スピンカラム(ガラス繊維フィルター)
精製時間
45分
溶出量
60 μL
サンプルタイプ
FFPE&固定サンプル, Paraffin-embedded (FFPE) Tissue
最終産物タイプ
ゲノムDNA、トータルRNA、マイクロRNA
高スループット適合性
ハイスループット非対応(手動)
使用対象(アプリケーション)
次世代シーケンシング、リアルタイム定量PCR(qPCR)、逆転写酵素PCR(RT-PCR)、microRNA解析、サザンブロッティング、ノーザンブロッティング、PCR、cDNAライブラリ構築
数量
40 Preps
出荷条件
Box 1: Room Temperature
Box 2: Dry Ice
出発物質量
切片にしていない最大35 mgのコアサンプル、最大4つの20 µm切片
収量
24 µg
組成および保存条件
• 16 ml消化バッファー(室温)
• 60 ml洗浄液1濃縮液(室温)
• 60 ml洗浄液2/3濃縮液(室温)
• 収集チューブ(室温)80本
• フィルターカートリッジ(室温)40個
• 19.2 ml単離添加剤(室温)
• 5 ml溶出液(-20℃、4℃、または室温)
• 160 μlプロテアーゼ(-20℃)
• 240 μl 10X DNaseバッファー(-20℃)
• 160 μl DNase(-20℃)
• 400 μl RNase A(-20℃)
このキットは、室温保管の部材と-20℃保管の部材の2つの構成で出荷されます。
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