CellLight™ Late Endosomes-GFP, BacMam 2.0
CellLight™ Late Endosomes-GFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Late Endosomes-GFP, BacMam 2.0

CellLight™後期エンドソーム-GFP、BacMam 2.0は、生細胞中の後期エンドソームを緑色蛍光タンパク質(GFP)で標識する簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細はこちらこのすぐに使用可能なコンストラクトをBacMam詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C105881バイアル(s)
製品番号(カタログ番号) C10588
価格(JPY)
52,000
Each
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数量:
1バイアル(s)
CellLight™後期エンドソーム-GFP、BacMam 2.0は、生細胞中の後期エンドソームを緑色蛍光タンパク質(GFP)で標識する簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細はこちら

このすぐに使用可能なコンストラクトをBacMam 2.0技術を使用して細胞に導入し、GFPのRab7aへの融合を発現させます。オルガネラのpHおよび標識に関わらず、生細胞における後期エンドソームGFPの挙動を観察し、複数のトラッキング色素またはトレーシング色素を使用して動的細胞プロセスをイメージングできます。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞をホルムアルデヒドで固定し、免疫細胞化学技術を用いたマルチプレックスイメージングを行うこともできます。

CellLight™テクノロジーとは:
迅速で便利:CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
高効率:初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
柔軟性:マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
低毒性:CellLight™試薬は哺乳類細胞では複製されず、バイオセーフティレベル(BSL)1の取り扱いに適合します。

BacMamテクノロジー

CellLight™後期エンドソーム-GFP、BacMam 2.0はRab7aとemGFPの融合コンストラクトで、細胞の後期エンドソーム-GFPを正確かつ特異的に標的にします。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル(BSL)1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。
仕様
Green
検出法蛍光
染色剤タイプGFP(EmGFP)
発光可視
励起波長域488⁄510
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡, フローサイトメーター, 蛍光イメージャー
形状液体
製品ラインCellLight, Molecular Probes
数量1バイアル(s)
出荷条件湿氷
標的機能エンドサイトーシス
標識タイプ蛍光タンパク質
製品タイプエンドソーム
SubCellular Localizationエンドソーム
Unit SizeEach
組成および保存条件
2°C∼6°Cで、遮光してください。冷凍不可。

よくあるご質問(FAQ)

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか?

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。 接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。 もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (21)

引用および参考文献
Abstract
A Rab11a-enriched subapical membrane compartment regulates a cytoskeleton-dependent transcytotic pathway in secretory epithelial cells of the lacrimal gland.
Authors:Xu S, Edman M, Kothawala MS, Sun G, Chiang L, Mircheff A, Zhu L, Okamoto C, Hamm-Alvarez S,
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:21984810
'Despite observations that the lacrimal gland has been identified as the principal source of dimeric immunoglobulin A (dIgA) in tears, the mechanism used by lacrimal gland acinar cells (LGACs) to transcytose dIgA produced by interstitial plasma cells is not well-characterized. This study identifies a transcytotic pathway in LGACs regulated by ... More
Visualizing the endocytosis of phenylephrine in living cells by quantum dot-based tracking.
Authors:Ma J, Wu L, Hou Z, Song Y, Wang L, Jiang W,
Journal:
PubMed ID:24855959
'To study the intracellular receptor-drug transportation, a fluorescent probe consisting of phenylephrine-polyethylene glycol-quantum dots conjugate was employed to track endocytosis process of phenylephrine in living cells. This type of movement was studied by continuously filming fluorescent images in the same cell. We also calculated the movement parameters, and divided the ... More
Particles on the move: intracellular trafficking and asymmetric mitotic partitioning of nanoporous polymer particles.
Authors:Yan Y, Lai ZW, Goode RJ, Cui J, Bacic T, Kamphuis MM, Nice EC, Caruso F,
Journal:
PubMed ID:23713907
'Nanoporous polymer particles (NPPs) prepared by mesoporous silica templating show promise as a new class of versatile drug/gene delivery vehicles owning to their high payload capacity, functionality, and responsiveness. Understanding the cellular dynamics of such particles, including uptake, intracellular trafficking, and distribution, is an important requirement for their development as ... More
Intracellular dynamics and fate of polystyrene nanoparticles in A549 Lung epithelial cells monitored by image (cross-) correlation spectroscopy and single particle tracking.
Authors:Deville S, Penjweini R, Smisdom N, Notelaers K, Nelissen I, Hooyberghs J, Ameloot M,
Journal:
PubMed ID:26164626
Novel insights in nanoparticle (NP) uptake routes of cells, their intracellular trafficking and subcellular targeting can be obtained through the investigation of their temporal and spatial behavior. In this work, we present the application of image (cross-) correlation spectroscopy (IC(C)S) and single particle tracking (SPT) to monitor the intracellular dynamics ... More
Probing site-exclusive binding of aqueous QDs and their organelle-dependent dynamics in live cells by single molecule spectroscopy.
Authors:Dong C, Chowdhury B, Irudayaraj J,
Journal:Analyst
PubMed ID:23493749
Understanding the biophysical and chemical interactions of nanoprobes and their fate upon entering live cells is critical for developing fundamental insights related to intracellular diagnostics, drug delivery and targeting. In this article we report herein a single molecule analysis procedure to quantitate site-specific exclusive membrane binding of N-acetyl-L-cysteine (NAC)-capped cadmium ... More