Click-iT™ TUNEL比色IHC検出キットは、小規模で特異的な標識部分およびストレプトアビジン-ペルオキシダーゼ結合を使用して、組織および培養細胞サンプル中のアポトーシス細胞を同定するために使用されます。DNA断片化部位に標識部分を組み込むと、これらの部位にビオチン基を付加する「クリック」反応を触媒として検出することで、検出が可能となります。その後、ストレプトアビジン-ペルオキシダーゼおよびペルオキシダーゼ基質を添加すると、光学顕微鏡で検出して将来の分析のために保存できる暗褐色のシグナルが得られます。

その他のイメージベースのアポトーシス細胞検出ツール >

•組織または細胞サンプル中のアポトーシス細胞の検出に最適化されています
•改良された比色TUNELアッセイ—反応性部位が小さいため、ラベルの組み込みが容易になります
•感度の向上—特異的なラベルの組み込みにより、バックグラウンドが低くなり、より明るい信号が得られます
•内容が充実した結果—細胞の形態、細胞環境、アポトーシスシグナルが明確に可視化されます
•柔軟性—アッセイは50の独立したTUNELアポトーシス検査用に校正できます

アポトーシス後期は、核形態の変化、クロマチン凝縮、核エンベロープ分解、DNA断片化によって特徴づけられます。末端デオキシヌクレオチジル転移酵素-dUTPニックエンドラベリング（TUNEL）アッセイは、断片化されたDNAの3’-OH末端に末端デオキシヌクレオチジル転移酵素（TdT）によって修飾されたdUTPが取り込まれることに基づいています。比色TUNELアッセイでは、ビオチン部位と共役したdUTPを利用し、その後、ストレプトアビジン-ペルオキシダーゼ複合体とペルオキシダーゼ基質を添加することで、暗褐色のアポトーシスシグナルが得られます。しかし、比色TUNELアッセイはバックグラウンドが高くなりやすいため、シグナルの感度と特異性が低下します。

このような課題を解決するために開発されたClick-iT TUNEL比色IHC検出キットでは、アルキン基（小さな生体直交官能基）で修飾されたdUTPを利用することで、TdTによりヌクレオチドをより容易に取り込むことができるようになりました。取り込み後、特異性の高いクリック反応によりビオチンアジドとアルキン基が共有結合します。ストレプトアビジン-ペルオキシダーゼ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）にペルオキシダーゼ基質（DAB）を添加することで、アポトーシス細胞の比色検出が可能になります。クリック技術に固有の高い標識特異性により、バックグラウンドが低くなり、アポトーシス細胞の検出が向上します。

Click-iT TUNEL比色IHC検出キットは最適化されており、組織または細胞サンプルからのアポトーシス細胞の検出に必要なすべての試薬が含まれています。このキットに含まれる試薬は、50サンプルの検査に使用でき、一度に1～50サンプルの検査ができるように構成されています。