Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging
Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging
Invitrogen™

Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging

標識カルシウム指示薬は、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Ca2+の流入と放出に続いて細胞内Ca2+を測定したり、生体組織におけるCa2+多光子励起イメージングを含む多くのカルシウムシグナル伝達研究に使用されています。培養細胞を含むディッシュに溶解インジケーターを直接添加することで、これらカルシウムインジケーターのAMエステル型を細胞に添加できます。これらの細胞からの蛍光シグナルは、一般的に蛍光顕微鏡、蛍光マイクロプレートアッセイ、またはフローサイトメトリーを使用して測定されます詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C3015
または、製品番号C-3015
10 x 50 μg
製品番号(カタログ番号) C3015
または、製品番号C-3015
価格(JPY)
71,000
Each
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数量:
10 x 50 μg
標識カルシウム指示薬は、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Ca2+の流入と放出に続いて細胞内Ca2+を測定したり、生体組織におけるCa2+多光子励起イメージングを含む多くのカルシウムシグナル伝達研究に使用されています。培養細胞を含むディッシュに溶解インジケーターを直接添加することで、これらカルシウムインジケーターのAMエステル型を細胞に添加できます。これらの細胞からの蛍光シグナルは、一般的に蛍光顕微鏡、蛍光マイクロプレートアッセイ、またはフローサイトメトリーを使用して測定されます。

カルシウム、カリウム、pH、膜電位インジケータなどのイオンインジケータの詳細については、こちらを参照してください›

カルシウムインジケータ(AMエステル)仕様:
•ラベル(Ex/EM):カルシウムオレンジ™(549/576 nm)
• Ca2+結合時の蛍光強度の増加:約3倍
• Ca2+結合時の蛍光増加


Molecular Probes™カルシウムインジケーターの波長スペクトル特性のわずかな変化により
、これらのプローブは可視光によって励起され、励起に必要なエネルギーが低いため、細胞光損傷の可能性が低減されます。一般的に使用されているレーザーベースの装置(共焦点レーザースキャン顕微鏡など)は、これらのインジケータを効率的に励起でき、その放出は、細胞の自動蛍光および散乱バックグラウンドが問題にならないスペクトル領域にあります。

蛍光カルシウム指示薬の選択肢を拡大
™ 当社は、さまざまな実験シナリオで使用するMolecular Probesカルシウム指示薬を幅広く取り揃えています。たとえば、漏出の低減や区画化のためのデキストラン型や、高振幅カルシウムTransitiveを検出するためのBAPTAコンジュゲートなどです。詳細については、Molecular Probesハンドブックの「可視光で励起された蛍光Ca2+インジケータ」—セクション19.3™を参照してください。

UV-exitable Ca2+指示薬、タンパク質ベースCa2+指示薬、Ca2+指示薬のコンジュゲート用、その他の金属イオン(Mg2+、Zn2+)の蛍光ベースのインジケータ については、Molecular Probesハンドブック™のCa 2+、Mg 2+、Zn 2+およびその他の金属イオンのインジケータ—第19章を参照してください。

研究用途にのみご使用ください。動物またはヒトの治療または診断用途には使用できません。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプ蛍光色素ベース
数量10 x 50 μg
出荷条件室温
使用対象(アプリケーション)細胞の生存率と増殖
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡
製品ラインカルシウムオレンジ
製品タイプカルシウムインジケーター
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー(-5℃~-30℃)に保存し、遮光してください。

よくあるご質問(FAQ)

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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When using Calcium Crimson, AM, as an indicator of intracellular calcium flux, I am not getting a good degree of change. The cells also have GFP. What can I do?

This is a known drawback of Calcium Crimson, AM (as well as Calcium Orange, AM and Fura Red, AM, which are also in the same emission range). You can try increasing the concentration and washing out of any unlabeled dye from the media, to try to get better signal-to-background. If that fails, we recommend using Rhod-3 AM instead, which has a much better change in signal in that wavelength.

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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引用および参考文献 (28)

引用および参考文献
Abstract
AM-loading of fluorescent Ca2+ indicators into intact single fibers of frog muscle.
Authors:Zhao M, Hollingworth S, Baylor SM
Journal:Biophys J
PubMed ID:9168048
'The AM loading of a number of different fluorescent Ca2+ indicators was compared in intact single fibers of frog muscle. Among the 13 indicators studied, loading rates (the average increase in the fiber concentration of indicator per first 60 min of loading) varied approximately 100-fold, from approximately 3 microM/h to ... More
Intracellular Ca2+ dynamics during spontaneous and evoked activity of leech heart interneurons: low-threshold Ca currents and graded synaptic transmission.
Authors:Ivanov AI, Calabrese RL
Journal:J Neurosci
PubMed ID:10864951
'In oscillatory neuronal networks that pace rhythmic behavior, Ca(2+) entry through voltage-gated Ca channels often supports bursting activity and mediates graded transmitter release. We monitored simultaneously membrane potential and/or ionic currents and changes of Ca fluorescence (using the fluorescence indicator Ca Orange) in spontaneously active and experimentally manipulated oscillator heart ... More
The role of Ca(2+) in stimulated bioluminescence of the dinoflagellate Lingulodinium polyedrum.
Authors:von Dassow P, Latz MI
Journal:J Exp Biol
PubMed ID:12200401
'Many marine dinoflagellates emit bright discrete flashes of light nearly instantaneously in response to either laminar or turbulent flows as well as to direct mechanical stimulation. The flash involves a unique pH-dependent luciferase and a proton-mediated action potential across the vacuole membrane. The mechanotransduction process initiating this action potential is ... More
Ryanodine receptor mutations associated with stress-induced ventricular tachycardia mediate increased calcium release in stimulated cardiomyocytes.
Authors:George CH, Higgs GV, Lai FA
Journal:Circ Res
PubMed ID:12919952
'Ca2+ release from the sarcoplasmic reticulum mediated by the cardiac ryanodine receptor (RyR2) is a fundamental event in cardiac muscle contraction. RyR2 mutations suggested to cause defective Ca2+ channel function have recently been identified in catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia (CPVT) and arrhythmogenic right ventricular dysplasia (ARVD) affected individuals. We report ... More
Cell-permeant Ca2+ chelators reduce early excitotoxic and ischemic neuronal injury in vitro and in vivo.
Authors:Tymianski M, Wallace MC, Spigelman I, Uno M, Carlen PL, Tator CH, Charlton MP
Journal:Neuron
PubMed ID:8102532
'We report the characterization of the first successful treatment of neuronal ischemic injury in vivo by cell-permeant Ca2+ chelators. The chelators attenuated glutamate-induced intracellular Ca2+ increases and neurotoxicity in neuronal explant cultures. When infused intravenously in rats, permeant fluorescent BAPTA analogs accumulated in neurons in several brain regions. BAPTA-AM, infused ... More