BODIPY™ 581/591 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

BODIPY™ 581/591色素は明るい赤色の蛍光色素で、Rhodamine Red™およびAlexa Fluor™ 568と同様の励起および発光を示します。吸光係数と蛍光量子収率が高く、溶媒極性およびpHの変化に比較的影響を受けません。水溶性の高いフルオロフォアのAlexa Fluor™ 488色素およびフルオレセイン（FITC）とは異なり、BODIPY™色素は脂質、膜、およびその他の親油性化合物の染色に最適な独自の疎水性特性を有しています。BODIPY™ 581/591色素は、励起状態の寿命は比較的長く（通常5ナノ秒以上）、蛍光偏光ベースのアッセイや、多光子励起用の大きな2光子断面に有用です。反応性色素の組成に加えて、細胞の標識および検出用に最適化されたさまざまな抗体、ペプチド、タンパク質、トレーサー、および増幅基質にコンジュゲートしたBODIPY™ 581/591色素を提供しています。

BODIPY™ 581/591のNHS エステル（またはスクシンイミジルエステル）は、タンパク質または抗体に色素をコンジュゲートさせるための最も一般的なツールです。NHSエステルは、タンパク質、アミン修飾オリゴヌクレオチド、およびその他のアミン含有分子の第一級アミン（R-NH₂）の標識に使用できます。その結果、BODIPY™ 581/591コンジュゲートは、明るい蛍光、狭い発光帯域幅、比較的長い励起状態の寿命を示します。これは、蛍光偏光アッセイや2光子励起（TPE）顕微鏡に有用です。

この反応性色素は、フルオロフォアとNHSエステル基の間にC₃アルキルスペーサーを含みます。このスペーサーは、フルオロフォアを結合点から分離するのに役立ち、フルオロフォアとコンジュゲート先の生体高分子との相互作用を低減する可能性があります。

このBODIPY™ 581/591 NHSエステルの詳細情報：

フルオロフォア標識：BODIPY™ 581/591色素
反応基：NHSエステル（スクシンイミジルエステル）
反応性：タンパク質およびリガンドの一級アミン、アミン修飾オリゴヌクレオチド
コンジュゲートの励起／発光：581／591 nm
減衰係数：136,000 cm-1M-1
分子量：489.28

一般的なコンジュゲーション反応
アミン反応試薬は、実質的にすべてのタンパク質またはペプチドとコンジュゲート可能です。提供されるプロトコルは、IgG抗体に合わせて最適化されます。反応はどの量のタンパク質でも計れますが、最適な結果を得るためには、タンパク質の濃度を2 mg/mL以上にする必要があります。反応試薬とタンパク質の3つのモル比を使用して、3つの異なる標識度を試すことが推奨されます。

BODIPY™ NHSエステルは通常、高品質の無水ジメチルホルムアミド（DMF）またはジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解し、反応は室温で0.1～0.2 Mの炭酸水素ナトリウム緩衝液（pH 8.3）で1時間行います。末端アミンのpKaはリジンのエプシロンアミノ基のpKaよりも低いため、中性pHに近いバッファーを使用するとアミン末端をより選択的に標識できます。

コンジュゲート精製
標識抗体は、通常、Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30、または同等のゲルろ過カラムを使用して、遊離BODIPY™色素から分離されます。大容量または小容量のタンパク質の場合は、適切な分子量のカットオフまたは透析による精製を行うゲルろ過培地を選択してください。当社は、さまざまな量の抗体コンジュゲート用に最適化された精製キットを複数提供しています：
0.5～1 mg用Antibody Conjugate Purification Kit（A33086）
20～50 µg用Antibody Conjugate Purification Kit（A33087）
50～100 µg用Antibody Conjugate Purification Kit（A33088）

タンパク質および抗体の標識に関する詳細
当社は、 お客様の出発物質および実験のセットアップに適したMolecular Probes™抗体およびタンパク質標識キットを幅広く提供しています。その他の選択肢は、当社の抗体標識キットをご覧になるか、当社の標識化学選択ツールをご利用ください。標識キットの詳細については、Molecular Probes™ハンドブックのタンパク質および核酸の標識キット—セクション 1.2をご覧ください。

当社では、お客様に合わせてカスタムコンジュゲートを実施
当社のオンラインカタログで目的の製品が見つからない場合は、カスタム抗体またはタンパク質コンジュゲートをご用意ください。当社のカスタム結合サービスは効率的かつ機密性が確保され、品質が保証されています。当社はISO 9001：2000認証を取得しています。