Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 10,000 MW, Lysine Fixable (mini-Ruby)
Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 10,000 MW, Lysine Fixable (mini-Ruby)
Invitrogen™

Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 10,000 MW, Lysine Fixable (mini-Ruby)

標識デキストランは親水性多糖類で、細胞分裂のモニタリング、生細胞の動きの追跡、細胞質マトリックスのハイドロダイナミック特性の報告など、顕微鏡研究でもっとも一般的に使用されています。標識デキストランは、一般にマイクロインジェクションを介して細胞に導入されます。異なる蛍光スペクトルや長いトラッキングが必要ですか?その他の哺乳類細胞トラッキング製品をご覧ください。デキストラン仕様:•標識(Ex/Em詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
D331210 mg
製品番号(カタログ番号) D3312
価格(JPY)
101,600
Each
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数量:
10 mg
標識デキストランは親水性多糖類で、細胞分裂のモニタリング、生細胞の動きの追跡、細胞質マトリックスのハイドロダイナミック特性の報告など、顕微鏡研究でもっとも一般的に使用されています。標識デキストランは、一般にマイクロインジェクションを介して細胞に導入されます。

異なる蛍光スペクトルや長いトラッキングが必要ですか?その他の哺乳類細胞トラッキング製品をご覧ください。

デキストラン仕様

標識(Ex/Em):テトラメチルローダミン & ビオチン(555/580)
サイズ:10,000 MW
電荷:陰イオン
固定可能:リジンを介して固定可能

分子プローブの高い製造基準 ™ デキストラン
当社では、いくつかの分子量範囲で50種類を超える蛍光性およびビオチンデキストランコンジュゲートを提供しています。デキストランは親水性多糖類で、中程度から高分子量、優れた水溶性、および低毒性を特徴としています。また、一般的に免疫原性が低いことも示しています。デキストランは、ポリ(α-D-1,6グルコース)結合がまれであるため生物学的に不活性であり、ほとんどの内因性細胞グリコシダーゼによる開裂に耐性があります。

ほとんど™ の場合、分子プローブの蛍光性デキストランは、他のソースから入手可能なデキストランよりもはるかに明るく、高い負電荷を持っています。さらに、実用的な量の非標識色素を除去するための厳格な方法を使用し、さらに、低分子量の汚染物質がないように、薄層クロマトグラフィーでデキストランコンジュゲートをアッセイします。

置換基と分子量の幅広い選択
分子プローブ™デキストランは、当社のAlexa Fluor™色素(分子プローブデキストランコンジュゲート–表14.4)を含むビオチンまたはさまざまなフルオロフォアに結合されており、これらの公称分子量(MW)でご利用いただけます。3,000、10,000、40,000、70,000、500,000、2,000,000ダルトン。

デキストラン正味電荷と固定性
当社は、デキストラン分子に色素をスクシンイミジル結合させることで、ほとんどの場合中性または陰イオン性デキストランを生成します。ローダミングリーン™とAlexa Fluor 488デキストランの生成に使用される反応により、最終製品は中性、陰イオン性、陽イオン性になります。Alexa Fluor、Cascade Blue、ルシファーイエロー、フルオレセイン、Oregon Greenデキストランは本質的に陰イオン性ですが、ほとんどのデキストランには両性イオン性ローダミンB、テトラメチルローダミン、Texas Red™の色素が標識されたデキストランのほとんどは基本的に中性です。さらに高い陰イオン性デキストランを生産するために、当社は、デキストランキャリアに負電荷基を付加する独自の手順を開発しました。これらの製品は、“ポリアニオン性”デキストランに指定されています。

一部の用途では、その後の分析のためにデキストラントレーサーをホルムアルデヒドまたはグルタルアルデヒドで処理する必要があります。このような用途のために、当社では、ほとんどのフルオロフォアまたはビオチンのデキストランコンジュゲートの“リジン固定可能な”バージョンをご用意しています。これらのデキストランには共有結合したリジン残基があり、これによりデキストラントレーサーをアルデヒド介在性固定により周辺の生体分子に結合させ、免疫組織化学的および超構造的手法による検出が可能になります。 また、当社の10,000 MW Alexa Fluorデキストランコンジュゲートは、すべてアルデヒドベースの固定剤で固定できることもわかっています。

標識デキストランを使用する主な用途
標識デキストランの使用について説明する多数の引用があります。もっとも一般的な用途は次のとおりです。

生細胞における神経細胞トレーシング(順行性および逆行性)
生細胞における細胞系統トレーシング
神経解剖学的トレーシング
細胞間コミュニケーションの検査(ギャップジャンクション、創傷治癒期間、胚発生時など)
血管透過性と血液脳関門の完全性の調査
エンドサイトーシスの追跡
酸性化モニタリング(デキストラン色素の一部はpH感受性)
細胞質マトリックスの流体力学的特性に関する研究

研究用途にのみ使用できます。ヒトまたは動物の治療もしくは診断用には使用できません。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
標識または色素従来の色素
製品タイプデキストラン
数量10 mg
出荷条件室温
Excitation/Emission555/580 nm
製品ラインInvitrogen
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー(-5~-30度)に保存し、遮光してください。

よくあるご質問(FAQ)

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

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Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

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I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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引用および参考文献 (22)

引用および参考文献
Abstract
Versatile, high-resolution anterograde labeling of vagal efferent projections with dextran amines.
Authors:Walter GC, Phillips RJ, Baronowsky EA, Powley TL,
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:19056424
'None of the anterograde tracers used to label and investigate vagal preganglionic neurons projecting to the viscera has proved optimal for routine and extensive labeling of autonomic terminal fields. To identify an alternative tracer protocol, the present experiment evaluated whether dextran conjugates, which have produced superior results in the CNS, ... More
Astrocytes and microglial cells incorporate degenerating fibers following entorhinal lesion: a light, confocal, and electron microscopical study using a phagocytosis-dependent labeling technique.
Authors:Bechmann I, Nitsch R
Journal:Glia
PubMed ID:9179599
'Entorhinal lesion leads to anterograde degeneration of perforant path fibers in their main termination zone in the outer molecular layers of the dentate gyrus. Concomitantly, astrocytes become hypertrophic, and microglial cells alter their phenotype, suggesting participation in anterograde degeneration. This study analyzes the involvement of these lesion-induced activated glial cells ... More
Tracing of the entorhinal-hippocampal pathway in vitro.
Authors:Kluge A, Hailer NP, Horvath TL, Bechmann I, Nitsch R
Journal:Hippocampus
PubMed ID:9519887
'In vitro tract tracing allowing for continuous observation of the perforant path is a crucial prerequisite for experimental studies on the entorhinal-hippocampal interaction in an organotypic slice culture containing the entorhinal cortex, the perforant path, and the dentate gyrus (OEHSC). We prepared horizontal slices of the temporal entorhinal-hippocampal region of ... More
Persistent neuronal labeling by retrograde fluorescent tracers: a comparison between Fast Blue, Fluoro-Gold and various dextran conjugates.
Authors:Novikova L, Novikov L, Kellerth JO
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:9210570
'The permanence of retrograde neuronal labeling by the fluorescent tracers Fast Blue, Fluoro-Gold, Mini-Ruby, Fluoro-Ruby and Fluoro-Emerald was investigated in adult rat spinal motorneurons at 1, 4, 12 and 24 weeks after tracer application to a transected muscle nerve. After 1 week, the largest number of retrogradely labeled motoneurons was ... More
The use of Lucifer Yellow and Mini-Ruby for intracellular staining in fixed brain tissue: methodological considerations evaluated in rat and human autopsy brains.
Authors:Ohm TG, Diekmann S
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:7534362
The quality of intracellular filling of Mini-Ruby (MR) is comparable to that of Lucifer Yellow (LY) in both perfusion-fixed rat and immersion-fixed autopsy human tissue. In adult human brain, the use of MR avoids the co-conversion of the typical intracellular lipofuscin deposits as is invariably the case during the photoconversion ... More