Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging
Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging
Invitrogen™

Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging

標識カルシウム指示薬は、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Fluo-5F、Fluo-5N、およびFluo-4ffは、より低いCa2+結合親和性を持つFluo-4の類似体で、Fluo-3およびFluo-4の応答を飽和させる1 µM~1 mMの範囲で細胞内のカルシウム濃度を検出するのに適しています。培養細胞を含むディッシュに溶解インジケーターを直接添加することで詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
F1420410 x 50 μg
製品番号(カタログ番号) F14204
価格(JPY)
88,200
Each
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数量:
10 x 50 μg
標識カルシウム指示薬は、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Fluo-5F、Fluo-5N、およびFluo-4ffは、より低いCa2+結合親和性を持つFluo-4の類似体で、Fluo-3およびFluo-4の応答を飽和させる1 µM~1 mMの範囲で細胞内のカルシウム濃度を検出するのに適しています。培養細胞を含むディッシュに溶解インジケーターを直接添加することで、これらカルシウムインジケーターのAMエステル型を細胞に添加できます。これらのインジケーターは、アルゴンイオンレーザー光源による488 nmの励起に対応しているため、共焦点顕微鏡、フローサイトメトリー、およびマイクロプレートスクリーニングの各アプリケーションで有用です。

カルシウム、カリウム、pH、膜電位インジケーターなどのイオンインジケーターの詳細をご覧ください›

カルシウムインジケーター(AMエステル)の仕様:
•ラベル(Ca2+–結合型のEx/EM):fluo-5N(494/516 nm)
• Ca2+結合時の蛍光強度の増加:>
バッファー中のCa2+に対する100倍のKd:約90 μM
• Ca2+結合時に、波長のわずかな変化を伴いながら、蛍光強度が増加


TPENを使用した重金属陽イオンの制御
さらに、BAPTAベースのインジケーターはさまざまな重金属陽イオン(Mn2+、Zn2+、Pb2+など)に結合し、Ca2+よりもはるかに高い親和性を示します。これらのイオンの存在によって引き起こされるカルシウム測定値への摂動は、重金属選択性キレート剤であるTPENを使用して制御できます。

蛍光カルシウムインジケーターの幅広い選択肢
さまざまな実験シナリオで使用できる多様なMolecular Probes™カルシウムインジケーターをご用意しています。詳細については、Molecular Probesハンドブックの「可視光で励起された蛍光Ca2+インジケータ」—セクション19.3™を参照してください。

UV-exitable Ca2+指示薬、タンパク質ベースCa2+指示薬、Ca2+指示薬のコンジュゲート用、その他の金属イオン(Mg2+、Zn2+)の蛍光ベースのインジケータ については、Molecular Probesハンドブック™のCa 2+、Mg 2+、Zn 2+およびその他の金属イオンのインジケータ—第19章を参照してください。

研究用途にのみご使用ください。ヒトまたは動物の治療もしくは診断目的には使用できません。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプ蛍光色素ベース
数量10 x 50 μg
出荷条件室温
使用対象(アプリケーション)細胞の生存率と増殖
使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡, ハイコンテント装置, HTSリーダー, マイクロプレートリーダー, 蛍光イメージャー
製品タイプカルシウムインジケーター
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー(-5℃~-30℃)に保存し、遮光してください。

よくあるご質問(FAQ)

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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引用および参考文献 (15)

引用および参考文献
Abstract
The use of the indicator fluo-5N to measure sarcoplasmic reticulum calcium in single muscle fibres of the cane toad.
Authors:Kabbara AA, Allen DG
Journal:J Physiol
PubMed ID:11432994
'1. Single fibres from the lumbrical muscles of the cane toad (Bufo marinus) were incubated in fluo-5N AM for 2 h at 35 degrees C in order to load the indicator into the sarcoplasmic reticulum. Fluo-5N is a low-affinity calcium indicator (K(Ca) 90 microM). Successful sarcoplasmic reticulum (SR) loading was ... More
Cardiac alternans do not rely on diastolic sarcoplasmic reticulum calcium content fluctuations.
Authors:Picht E, DeSantiago J, Blatter LA, Bers DM,
Journal:Circ Res
PubMed ID:16946134
'Cardiac alternans are thought to be a precursor to life-threatening arrhythmias. Previous studies suggested that alterations in sarcoplasmic reticulum (SR) Ca2+ content are either causative or not associated with myocyte Ca2+ alternans. However, those studies used indirect measures of SR Ca2+. Here we used direct continuous measurement of intra-SR free ... More
Kinesin dependent, rapid, bi-directional transport of ER sub-compartment in dendrites of hippocampal neurons.
Authors:Bannai H, Inoue T, Nakayama T, Hattori M, Mikoshiba K
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:14676272
'Although spatially restricted Ca2+ release from the endoplasmic reticulum (ER) through intracellular Ca2+ channels plays important roles in various neuronal activities, the accurate distribution and dynamics of ER in the dendrite of living neurons still remain unknown. To elucidate these, we expressed fluorescent protein-tagged ER proteins in cultured mouse hippocampal ... More
Ca2+ blinks: rapid nanoscopic store calcium signaling.
Authors:Brochet DX, Yang D, Di Maio A, Lederer WJ, Franzini-Armstrong C, Cheng H
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:15710901
'Luminal Ca(2+) in the endoplasmic and sarcoplasmic reticulum (ER/SR) plays an important role in regulating vital biological processes, including store-operated capacitative Ca(2+) entry, Ca(2+)-induced Ca(2+) release, and ER/SR stress-mediated cell death. We report rapid and substantial decreases in luminal [Ca(2+)], called "Ca(2+) blinks," within nanometer-sized stores (the junctional cisternae of ... More
Sulfhydryl oxidation overrides Mg(2+) inhibition of calcium-induced calcium release in skeletal muscle triads.
Authors:Donoso P, Aracena P, Hidalgo C
Journal:Biophys J
PubMed ID:10866954
'We studied the effect of oxidation of sulfhydryl (SH) residues on the inhibition by Mg(2+) of calcium-induced calcium release (CICR) in triad-enriched sarcoplasmic reticulum vesicles isolated from rabbit skeletal muscle. Vesicles were either passively or actively loaded with calcium before eliciting CICR by dilution at pCa 4.6-4.4 in the presence ... More