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Thermo Scientific™
CloneJET™ PCR Cloning Kit with DH10B Competent Cells
このパッケージには、CloneJET PCRクローニングキット（20または40反応）とDH10Bコンピテントセルが含まれています。DH10Bコンピテントセルは、このキットでの使用を対象に最適化されており、ライゲーション産物で直接、形質転換させることができます。CloneJET詳細を見る
製品番号（カタログ番号） K123240
価格（JPY）お問い合わせください ›
77,500
Each
数量:
40反応
このパッケージには、CloneJET PCRクローニングキット（20または40反応）とDH10Bコンピテントセルが含まれています。DH10Bコンピテントセルは、このキットでの使用を対象に最適化されており、ライゲーション産物で直接、形質転換させることができます。
CloneJET PCRクローニングキット
Thermo Scientific CloneJET PCRクローニングキットは、任意の熱安定性DNAポリメラーゼで生成されたPCR産物を極めて効率的にクローニングできる、高度なポジティブセレクションシステムです。あらゆる平滑末端または付着末端DNA断片のクローニングが可能です。このキットは、リン酸化DNA断片と非リン酸化DNA断片の両方で優れた効果を発揮します。同梱のポジティブセレクションベクターへのライゲーションに要する時間はわずか5分で、99％以上の組換えクローンを産生します。プルーフリーディング酵素で生成された平滑端末PCR産物は、クローニングベクターに直接ライゲーションされます。
ノンプルーフリーディングDNAポリメラーゼまたはDNAポリメラーゼの混合物を使用して生成されたPCR産物は、5分間のライゲーション反応を行う前に、キットに付属の耐熱性DNA平滑化酵素を用いて平滑化する必要があります。DH10Bコンピテントセルは、CloneJET PCRクローニングキットでの使用を対象に最適化されており、ライゲーション産物で直接、形質転換させることができます。
CloneJET PCRクローニングキットには、すぐに使える革新的なポジティブセレクションクローニングベクターpJET1.2/bluntが同梱されています。ベクターは致死性の制限酵素遺伝子を含んでいます。クローニング部位へのインサートDNAのライゲーションにより、その制限酵素遺伝子は機能を喪失します。結果として、組換えプラスミドを持つ細菌性細胞のみにコロニー形成させることが可能になります。インサートを持たない再環化pJET1.2/bluntベクターは、形質転換後、宿主大腸菌細胞を死滅させる致死制限酵素を発現します。このポジティブセレクションは、コロニースクリーニングのプロセスを大幅に加速し、青／白の選択に必要な追加コストを削減します。
•高速—わずか5分間のPCRクローニング
• 高性能—>99%のポジティブクローン
• クローニングバックグラウンドなし—ポジティブセレクションベクター
• 多用途—平滑末端または付着末端クローニングに最適
• 経済的—費用のかかる青白スクリーニングは不要
アプリケーションの例：
•10 kbまでの平滑末端または3'末端にdAを付加したPCR産物のクローニング
• 制限酵素で作成したDNA断片のクローニング
• クローン化DNAシーケンシング
• T7プロモーターからのクローン化インサートのin vitroおよびin vivo転写
CloneJET PCRクローニングキットの詳細›
DH10Bコンピテントセル
Thermo Scientific DH10Bコンピテントセルは、高効率で化学的な大腸菌コンピテントセルです。DH10B株は、メチルシトシンとメチルアデニンを含むDNAのクローニングに適しており、原核生物と真核生物のゲノムDNAの両方を効率的にクローニングできます。これらの細胞は、プラスミド由来ベクターを使用したcDNAライブラリの構築に最適です。ジェノタイプ：F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG
•高い形質転換効率：>1x109 cfu/μg pUC19 DNA
• ルーチンのハイスループットクローニングアプリケーションに最適
• バイアルパッケージごとに2反応に対応できる利便性
• S.O.C.増殖培地を同梱
関連製品
CloneJET PCRクローニングキット（コンピテントセルなし）
aLICator LICクローニングおよび再現システム
CloneJET PCRクローニングキット
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ノンプルーフリーディングDNAポリメラーゼまたはDNAポリメラーゼの混合物を使用して生成されたPCR産物は、5分間のライゲーション反応を行う前に、キットに付属の耐熱性DNA平滑化酵素を用いて平滑化する必要があります。DH10Bコンピテントセルは、CloneJET PCRクローニングキットでの使用を対象に最適化されており、ライゲーション産物で直接、形質転換させることができます。
CloneJET PCRクローニングキットには、すぐに使える革新的なポジティブセレクションクローニングベクターpJET1.2/bluntが同梱されています。ベクターは致死性の制限酵素遺伝子を含んでいます。クローニング部位へのインサートDNAのライゲーションにより、その制限酵素遺伝子は機能を喪失します。結果として、組換えプラスミドを持つ細菌性細胞のみにコロニー形成させることが可能になります。インサートを持たない再環化pJET1.2/bluntベクターは、形質転換後、宿主大腸菌細胞を死滅させる致死制限酵素を発現します。このポジティブセレクションは、コロニースクリーニングのプロセスを大幅に加速し、青／白の選択に必要な追加コストを削減します。
•高速—わずか5分間のPCRクローニング
• 高性能—>99%のポジティブクローン
• クローニングバックグラウンドなし—ポジティブセレクションベクター
• 多用途—平滑末端または付着末端クローニングに最適
• 経済的—費用のかかる青白スクリーニングは不要
アプリケーションの例：
•10 kbまでの平滑末端または3'末端にdAを付加したPCR産物のクローニング
• 制限酵素で作成したDNA断片のクローニング
• クローン化DNAシーケンシング
• T7プロモーターからのクローン化インサートのin vitroおよびin vivo転写
CloneJET PCRクローニングキットの詳細›
DH10Bコンピテントセル
Thermo Scientific DH10Bコンピテントセルは、高効率で化学的な大腸菌コンピテントセルです。DH10B株は、メチルシトシンとメチルアデニンを含むDNAのクローニングに適しており、原核生物と真核生物のゲノムDNAの両方を効率的にクローニングできます。これらの細胞は、プラスミド由来ベクターを使用したcDNAライブラリの構築に最適です。ジェノタイプ：F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG
•高い形質転換効率：>1x109 cfu/μg pUC19 DNA
• ルーチンのハイスループットクローニングアプリケーションに最適
• バイアルパッケージごとに2反応に対応できる利便性
• S.O.C.増殖培地を同梱
関連製品
CloneJET PCRクローニングキット（コンピテントセルなし）
aLICator LICクローニングおよび再現システム
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
抗生物質耐性菌アンピシリン（AmpR）
菌株または酵母株DH10B
細胞タイプDH10B
クローニング法平滑PCR、制限酵素／MCS
効率≧1 x 10^9
使用対象（アプリケーション）PCRクローニング
反応数40反応
製品ラインThermo Scientific
製品タイプPCRクローニングキット
数量40反応
サンプルタイプPCR産物
出荷条件ドライアイス
ベクターpJET1.2／平滑
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
• サブクローニング用20 x DH10Bコンピテントセル（100 μL）
• 2 x pUC19 DNA（20 μL）（100 pg/μL）
• 2 x S.O.C.培地（5 mL）
• pJET1.2／平滑クローニングベクター（46 μL）（50 ng/L）
• 2X反応バッファー（600 μL）
• T4 DNAリガーゼ（46 μL）（5 U/μL）
• DNA平滑化酵素（46 μL）
• DNA平滑化酵素（46 μL）
• pJET1.2フォワードシーケンシングプライマー、10 μM水溶液（50 μL）
• pJET1.2逆シーケンシングプライマー、10 μM水溶液（50 μL）
• コントロールPCR産物、976 bp 3’-dAオーバーハング（8 μL）（12 ng/μL）
• ヌクレアーゼ不含の水、（1.25 mL）
• 2 x pUC19 DNA（20 μL）（100 pg/μL）
• 2 x S.O.C.培地（5 mL）
• pJET1.2／平滑クローニングベクター（46 μL）（50 ng/L）
• 2X反応バッファー（600 μL）
• T4 DNAリガーゼ（46 μL）（5 U/μL）
• DNA平滑化酵素（46 μL）
• DNA平滑化酵素（46 μL）
• pJET1.2フォワードシーケンシングプライマー、10 μM水溶液（50 μL）
• pJET1.2逆シーケンシングプライマー、10 μM水溶液（50 μL）
• コントロールPCR産物、976 bp 3’-dAオーバーハング（8 μL）（12 ng/μL）
• ヌクレアーゼ不含の水、（1.25 mL）