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Invitrogen™

ViraPower™ II Lentiviral Gateway™ Expression System

多くの哺乳類細胞タイプおよび実験的状況において、標準的なトランスフェクションが困難な場合があります。 ViraPower™ Lentiviral Expression Systemは、分裂細胞および非分裂細胞の両方に対する効率的なウイルスデリバリーシステムにより、これらの課題を克服します。レンチウイルスシステムは詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
K367201 kit
製品番号(カタログ番号) K36720
価格(JPY)
520,900
Each
数量:
1 kit
多くの哺乳類細胞タイプおよび実験的状況において、標準的なトランスフェクションが困難な場合があります。 ViraPower™ Lentiviral Expression Systemは、分裂細胞および非分裂細胞の両方に対する効率的なウイルスデリバリーシステムにより、これらの課題を克服します。レンチウイルスシステムは、完全に分化された細胞または成長停止細胞においても、長期的な遺伝子発現の解析に有効です。 このシステムを使用することにより、従来のトランスフェクション試薬またはその他のウイルスシステムの限界を超えて、遺伝子発現の分析能力を広げることができます。 ViraPower™Lentiviral Expression Systemは、実質的にどの細胞株においても有効な結果を得るために必要な、高レベルの安定遺伝子発現を可能とします。

強力な発現
ViraPower™Lentiviral Expression Systemにより、高レベルの安定遺伝子発現を簡単に実現することができます。 最初に、対象の遺伝子をレンチウイルス発現ベクターの1つにクローンニングし、One Shot™ Stbl3コンピテントセルを使用して組換体を選択します。 次に、対象の遺伝子を含むベクターを、最適化されたViraPower™レンチウイルスパッケージングミックスとともに293FT細胞にコトランスフェクトします。 ViraPower™パッケージングミックスは、レンチウイルスパッケージングタンパク質(gag⁄polおよびrev)およびVSV-G膜タンパク質を生産する、事前に最適化されたプラスミドの混合液です。 VSV-G膜タンパク質は、 広範囲の哺乳類細胞に遺伝子導入するを組み換えウイルス粒子に付与します。 24-48時間後、対象の遺伝子を含む複製能力のないウイルス粒子を有する培養上清を採取します。
ウイルス力価を決定した後、あらゆる哺乳類細胞に効率的に遺伝子導入を行えます。 別々に調製したウイルス液を使用して、複数遺伝子の導入も行えます。
安定発現
従来のMoloney(MLV)ベースのレトロウイルスシステムと異なり、ViraPower™Lentiviral Systemは、ターゲット細胞核に遺伝子が挿入する際にゲノム複製は必須ではありません。 cis-エレメントを利用したインポートメカニズムにより、パッケージされた遺伝子は即座に核にインポートされ、ホストゲノムに安定導入されます。 一過性発現により、24時間以内に遺伝子発現を検出することができます。 さらに、BlasticidinまたはZeocin™を使用して安定細胞株を作成することができます。 遺伝子導入に複製が必要ないため、非分裂細胞に導入することができます。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
構成または誘導システム構造的
供給タイプLentiviral
使用対象(アプリケーション)ウイルス発現
製品タイプLentiviral Expression System
数量1 kit
選択剤(真核生物)ブラストサイジン
ベクターpLenti
クローニング法Gateway
製品ラインGateway, ViraPower
プロモーターCMV
タンパク質タグV5 Epitope Tag
Unit SizeEach
組成および保存条件
pLenti6.2⁄V5-DEST™ Gateway™ Vector Kit
• 6 μg of pLenti6.2⁄V5-DEST™ vector (40 μLofvector at 150 ng⁄μL in TE Buffer, pH 8.0)
• 10 μg of pLenti6.2⁄V5-GW⁄lacZ™ plasmid(20μL of plasmid at 0.5 μg⁄μL in TE Buffer, pH 8.0)
• One Shot™ Stbl3™ Chemically Competent E. coli(Cat # C737303): 21 x 50-μL of Stbl3™ Cells, 6 mL of S.O.C.Medium and 50 μL of pUC19 control DNA (10 pg⁄μL).

ViraPower™ Bsd Lentiviral Support Kit (Cat # K497000)
• 195 μg of ViraPower™ Packaging Mix (Contains 195μL of a mixture of pLP1, pLP2, and pLP⁄VSVG plasmids, at 1μg⁄μL in TE Buffer, pH 8.0)
• 0.75 ml of Lipofectamine™ 2000 (Cat # 11668027)
• 50 mg of Blasticidin powder (Cat # R21001)
• 293FT Cell Line (Cat # R70007): 1 vial containing 3 X 106frozen cells in 1 mL of Freezing Medium.

Storage
• Vectors: -20°C
• ViraPower™ Packaging Mix: -20°C
• Blasticidin: -20°C
• Lipofectamine™ 2000: 4°C (do not freeze)
• One Shot™ Stbl3™ Chemically Competent E. coli:-80°C
• 293 FT Cells: Liquid Nitrogen

よくあるご質問(FAQ)

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.