Lipofectamine™ Stem Transfection Reagent
Pair with TrueCut Cas9 Protein v2 to help achieve higher editing efficiency.
Lipofectamine™ Stem Transfection Reagent
Invitrogen™

Lipofectamine™ Stem Transfection Reagent

Lipofectamine Stemトランスフェクション試薬は、さまざまな幹細胞で初期の分化を最小限に抑えながら、最大限の効率を達成できるように最適化されています。DNA、RNA、Cas9リボヌクレオタンパク質(RNP)複合体を同時に導入できます。Lipofectamine詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
STEM000151.5 mL
STEM000030.3 mL
STEM000080.75 mL
STEM000010.1 mL
製品番号(カタログ番号) STEM00015
価格(JPY)
144,300
1.5 mL
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数量:
1.5 mL
Lipofectamine Stemトランスフェクション試薬は、さまざまな幹細胞で初期の分化を最小限に抑えながら、最大限の効率を達成できるように最適化されています。DNA、RNA、Cas9リボヌクレオタンパク質(RNP)複合体を同時に導入できます。Lipofectamine Stem試薬は、フィーダーフリーをはじめとする各種の培地システムと適合するため、幹細胞培養ワークフローのサポートと簡素化に役立ちます。多能性幹細胞(PSC)および神経幹細胞(NSC)で最大80%以上のトランスフェクション効率を、間葉系幹細胞(MSC)で最大45%のトランスフェクション効率を実現できます。

細胞の生存率や細胞増殖を阻害せずに幹細胞に核酸を導入するのは、細胞の感度により困難な場合があります。Lipofectamine Stemは低毒性試薬であり、必要となる核酸の量はわずかです。そのため、分化を誘導することなく幹細胞の正常性を維持し、増殖を継続できます。Lipofectamine Stem試薬には、次の特長があります。

優れた性能—他の試薬と比べ、iPSC、hESC、NSC、MSCで最大3倍の効率を発揮
汎用性—1種類の試薬でDNA、RNA、Cas9タンパク質、コトランスフェクションに対応
細胞に優しい試薬—分化を誘導することなく細胞増殖を維持
柔軟性—接着および懸濁で細胞に核酸を導入—エレクトロポレーションに代わる手法

幹細胞の遺伝子編集で高い効率性を達成
遺伝子編集アプリケーションでは一般に、細胞にDNA、RNA、タンパク質を同時に導入する機能が必要になります。Lipofectamine Stemトランスフェクション試薬は、ヒト幹細胞にCRISPR/Cas9複合体を同時に導入し、効率的な遺伝子編集を可能にするように設計されています。この試薬は、CRISPR/Cas9のオールインワンベクターなどの大型DNAプラスミドのトランスフェクションに使用でき、幅広いRNA(tracr/crRNA複合体を含むCas9 mRNA、シングルガイド(sg)RNAなど)とタンパク質(tracr/crRNAまたはsgRNAと結合したCas9タンパク質など)を同時に導入できます。

エレクトロポレーションに代わる毒性の低い手法A
エレクトロポレーション手法で幹細胞に核酸を導入するのは難しく厄介な作業です。エレクトロポレーションプロトコルでは、最大限の効率を達成するとともに毒性を最小限にするために、単一細胞の浮遊培養を推奨しています。逆転写プロトコルを使用するLipofectamine Stemトランスフェクション試薬は、幹細胞のエレクトロポレーションに代わる効率的で毒性の低い手法となります。わずかな量の核酸でエレクトロポレーションと同等レベルの効率性を達成するだけでなく、分化を誘導することなく増殖を維持します。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
分類動物由来成分不含
使用対象(アプリケーション)Transfection
製品ラインLipofectamine
製品タイプトランスフェクション試薬
数量1.5 mL
適合血清不可
出荷条件室温
細胞タイプ幹細胞
サンプルタイプ細胞
Transfection Technique脂質ベースのトランスフェクション
Unit Size1.5 mL
組成および保存条件
冷蔵庫(2~8℃)に保存し、遮光。

よくあるご質問(FAQ)

With Lipofectamine Stem Transfection Reagent, how can I improve the transfection efficiency in my stem cells?

To obtain the highest percent of stem cells transfected with Lipofectamine Stem Transfection Reagent, we highly recommend that you follow cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. If the density of your stem cells is greater than 50% or they are being grown as colonies in other media, more Lipofectamine Stem Transfection Reagent may improve transfection efficiency. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I co-transfect plasmid and Cas9 protein (RNP) with Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to co-deliver multiple payloads, including DNA, mRNA, and Cas9 protein (RNP) into stem cells.

At what density should I plate my stem cells before transfecting them using Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Cell confluency can impact the amount of Lipofectamine Stem Transfection Reagent that is needed for efficient transfection. Stem cells that are near confluency do not transfect well. Plating density should be such that cells are not overgrown 24 hours after transfection. To obtain the highest percent of stem cells transfected, we highly recommend that you dissociate both colony type and monolayer cultures into small clumps of 3-5 cells. If you are growing human pluripotent stem cells in a 24-well plate in Essential 8 Medium on Vitronectin, plate the cells to achieve 30-60% confluency on the day of transfection. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I use Lipofectamine Stem Transfection Reagent to transfect neural stem cells (NSCs)?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to transfect a wide range of stem cell types, while supporting continued proliferation without inducing differentiation. It is our recommended solution for transfecting neural stem cells.

I used Lipofectamine Stem Transfection Reagent. Why are only the outer cells of my stem cell colonies transfected ?

For cells that have aggregated into large colonies, transfection attempts may result in ONLY the outer cells of the colonies being successfully transfected. Transfection in suspension at the time of passaging and re-plating can maximize access of the reagent to all the cells and increase transfection efficiency. We recommend cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. To avoid cell aggregates that form large colonies, gently dissociate colonies to small clumps of 3-5 cells to promote efficient transfection. Follow recommended seeding densities for the cell culture medium and passaging reagents used so that cells are at the recommended starting confluency of 30-60% at the time of transfection and have room to grow for 24-48 hours during transfection.