EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit

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Thermo Scientific™

EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit

Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kitには、10回のビオチン化反応に十分な試薬が含まれています（例：1反応あたり1～10 mgの抗体）。このキットに含まれるEZ-LinkスルホNHS-LCビオチン試薬は詳細を見る

製品番号（カタログ番号）	数量
21435	10 reactions

製品番号（カタログ番号） 21435

価格（JPY）

105,700

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10 reactions

Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kitには、10回のビオチン化反応に十分な試薬が含まれています（例：1反応あたり1～10 mgの抗体）。このキットに含まれるEZ-LinkスルホNHS-LCビオチン試薬は、長さ中程度で水溶性のビオチン化試薬で、一級アミンを持つ抗体、タンパク質、その他の分子を標識化します。

EZ-LinkスルホNHS-LCビオチンの特長：

•タンパク質標識—抗体をビオチン化して、ストレプトアビジン樹脂またはプローブを使用した固定化、精製、または検出を容易にします
• 細胞表面標識—負電荷を持つ試薬は細胞膜を透過しないため、細胞全体の表面タンパク質のみビオチン化します
• アミン反応性—リジン側鎖やポリペプチドのアミノ末端などの第一級アミン（-NH2）と反応します
• 可溶性—荷電スルホ-NHS基は、通常のNHSエステル化合物に比べて試薬の水溶性を向上させます
• 不可逆性—恒久的なアミド結合を形成するため、スペーサーアームを切断することはできません
• 中鎖—スペーサーアーム（標的に追加された全長）は22.4オングストロームで、適切な長さ（ビオチン結合のための立体障害を最小限に抑える）と適度な質量のバランスに優れています

スルホ-NHS-LC-ビオチンは、水溶性で切断できない非常に類似した3種類のEZ-Link試薬の1つで、溶液中の抗体、タンパク質、および他の一級アミン含有マクロ分子のシンプルかつ効率的なビオチン化を実現します。細胞表面タンパク質の特異的標識も、これら独自の水溶性かつ膜非透過性の試薬の一般的なアプリケーションです。スペーサーアームの長さのみが異なるこれら3つのスルホ-NHS-エステル試薬を利用することにより、ビオチン結合の立体障害が重要な要素となる標識および検出試験を最適化することが可能となります。スルホ-NHS-LC-ビオチンは、複数のパッケージサイズと完全なタンパク質標識キットで提供いたします。

弊社は、目的の研究アプリケーションにおいて、可能な限り高い製品の完全性、一貫性、および性能が保証されたビオチン試薬を製造しています。

ビオチンのN-ヒドロキシスルホスクシンイミド（NHS）エステルは、もっとも一般的なビオチン化試薬です。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で１級アミノ基（-NH2）と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質（抗体など）は一般的に、リジン（K）残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。

ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン（およびペグ化ペーサーを有するもの）は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含む種類は還元剤を使用して切断できるため、ビオチン基を標識タンパク質から切り離すことができます。

関連製品
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EZ-Link™ Micro Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。

概要EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit

標識スケール1～10 mg

製品ラインEZ-Link

製品タイプスルホNHS-LCビオチン化キット

数量10 reactions

Labeling Target抗体, タンパク質

標識または色素ビオチン

Unit SizeEach

組成および保存条件

対応範囲：標識化反応10回分、それぞれ1～10 mgの抗体で使用
• EZ-LinkスルホNHS-LCビオチン、25 mg
• PBSパック（500 mL作成用）、1パック
• Zebaスピン脱塩カラム（7K MWCO）、5 mL、10カラム
• HABA溶液、1 mL
• アビジン、10 mg

ビオチンおよびアビジン試薬は、-20℃で保存してください。キットのコンポーネントは、すべて4℃で保管してください。

よくあるご質問（FAQ）

In the EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation kit, what groups does Sulfo-NHS-LC-Biotin react with for biotinylation?

The NHS ester on this biotinylation reagent reacts with primary amines. In proteins and peptides, these occur at the amino terminus and the epsilon amine (side chain) of lysine residues.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How do the EZ-Link Micro Biotinylation Kits differ from the standard biotinylation kits?

The standard biotinylation kits contain components for labeling 1-10 mg of protein, and the Micro Biotinylation Kits are structured for labeling 50-200 µg of protein in 200-700 mL. The Micro kits contain the biotinylation reagents in small, individual packages and do not include components to perform the HABA assay.

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Can you provide the shelf-life for EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit?

EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended. Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf) for more details.

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Is there any advantage of choosing a Sulfo-NHS biotin with a longer spacer arm than EZ-Link Sulfo NHS Biotin?

Sometimes. The biotin has to insert 9 angstrom into the pocket of avidin, streptavidin or NeutrAvidin to bind. If steric hindrance may be a problem, using a biotinylation reagent with a longer spacer arm (Sulfo-NHS-LC Biotin or Sulfo-NHS-LC-LC Biotin) may result in greater purification or deteciton.

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Why would I chose a Sulfo-NHS Biotin over its non-sulfonated counterpart?

The sodium sulfonate group lends water solubility to the reagent.
Note: The actual biotin moiety that is added is identical between NHS and Sulfo-NHS biotins that vary only in the addition of the sodium sulfonate on the leaving group. Researchers preferring a more water soluble biotin be added to their molecule should consider a PEGylated version of biotin.

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引用および参考文献 (13)

引用および参考文献

Abstract

Capture and display of antibodies secreted by hybridoma cells enables fluorescent on-cell screening.

Authors:Puligedda RD, Sharma R, Al-Saleem FH, Kouiavskaia D, Velu AB, Kattala CD, Prendergast GC, Lynch DR, Chumakov K, Dessain SK

Journal:MAbs

PubMed ID:30794061

'Hybridoma methods for monoclonal antibody (mAb) cloning are a mainstay of biomedical research, but they are hindered by the need to maintain hybridomas in oligoclonal pools during antibody screening. Here, we describe a system in which hybridomas specifically capture and display the mAbs they secrete: On-Cell mAb Screening (OCMS™). In ... More

HIV-1 Envelope Recognition by Polyreactive and Cross-Reactive Intestinal B Cells.

Authors:Planchais C, Kök A, Kanyavuz A, Lorin V, Bruel T, Guivel-Benhassine F, Rollenske T, Prigent J, Hieu T, Prazuck T, Lefrou L, Wardemann H, Schwartz O, Dimitrov JD, Hocqueloux L, Mouquet H

Journal:Cell Rep

PubMed ID:30970259

'Mucosal immune responses to HIV-1 involve the recognition of the viral envelope glycoprotein (gp)160 by tissue-resident B cells and subsequent secretion of antibodies. To characterize the B cells "sensing" HIV-1 in the gut of infected individuals, we probed monoclonal antibodies produced from single intestinal B cells binding to recombinant gp140 ... More

Optimizing ultrasound molecular imaging of secreted frizzled related protein 2 expression in angiosarcoma.

Authors:Tsuruta JK, Schaub NP, Rojas JD, Streeter J, Klauber-DeMore N, Dayton P

Journal:PLoS One

PubMed ID:28333964

Secreted frizzled related protein 2 (SFRP2) is a tumor endothelial marker expressed in angiosarcoma. Previously, we showed ultrasound molecular imaging with SFRP2-targeted contrast increased average video pixel intensity (VI) of angiosarcoma vessels by 2.2 ± 0.6 VI versus streptavidin contrast. We hypothesized that redesigning our contrast agents would increase imaging ... More

BDNF inhibits neurodegenerative disease-associated asparaginyl endopeptidase activity via phosphorylation by AKT.

Authors:Wang ZH, Wu W, Kang SS, Liu X, Wu Z, Peng J, Yu SP, Manfredsson FP, Sandoval IM, Liu X, Wang JZ, Ye K

Journal:JCI Insight

PubMed ID:30135302

AEP is an age-dependent lysosomal asparaginyl endopeptidase that cleaves numerous substrates including tau and a-synuclein and mediates their pathological roles in neurodegenerative diseases. However, the molecular mechanism regulating this critical protease remains incompletely understood. Here, we show that Akt phosphorylates AEP on residue T322 upon brain-derived neurotrophic factor (BDNF) treatment ... More

Targeting CD46 for both adenocarcinoma and neuroendocrine prostate cancer.

Authors:Su Y, Liu Y, Behrens CR, Bidlingmaier S, Lee NK, Aggarwal R, Sherbenou DW, Burlingame AL, Hann BC, Simko JP, Premasekharan G, Paris PL, Shuman MA, Seo Y, Small EJ, Liu B

Journal:JCI Insight

PubMed ID:30185663

Although initially responsive to androgen signaling inhibitors (ASIs), metastatic castration-resistant prostate cancer (mCRPC) inevitably develops and is incurable. In addition to adenocarcinoma (adeno), neuroendocrine prostate cancer (NEPC) emerges to confer ASI resistance. We have previously combined laser capture microdissection and phage antibody display library selection on human cancer specimens and ... More

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