Imject™ EDC BSA Spin Kit
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Thermo Scientific™

Imject™ EDC BSA Spin Kit

Thermo Scientific Imject EDC BSAスピンキットは、精製ウシ血清アルブミンキャリアタンパク質のパッケージで、アミンまたはカルボキシルペプチド抗原を用いた効果的な免疫原を簡単に調製できます。BSAは、免疫化および抗体産生のためのペプチド抗原の調製に使用される一般的な免疫原性キャリアタンパク質です。MES詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
776725 x 2 mg
製品番号(カタログ番号) 77672
価格(JPY)
126,500
Each
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数量:
5 x 2 mg
Thermo Scientific Imject EDC BSAスピンキットは、精製ウシ血清アルブミンキャリアタンパク質のパッケージで、アミンまたはカルボキシルペプチド抗原を用いた効果的な免疫原を簡単に調製できます。

BSAは、免疫化および抗体産生のためのペプチド抗原の調製に使用される一般的な免疫原性キャリアタンパク質です。MES バッファー中の調製は、カルボキシル反応性カルボジイミドの EDC (または EDAC) と呼ばれるクロスリンカーを介する、ペプチドキャリアのコンジュゲーションに最適化されています。Imject EDC Spin Kitには、すぐ使用可能なBSAキャリアタンパク質のユニット、最適化した反応バッファーと円滑なスピン脱塩(カラム)が含まれ、EDC法を使用する免疫原調製に使用できます。

Imject EDC BSA Spin Kitの特長:

便利なキット—内容は、凍結乾燥BSA(MESバッファー中)、EDC架橋剤、アクセサリコンポーネントで、すぐに使える注入用免疫原を簡単に調製可能
• 高収量のコンジュゲーション—各分子に59個のリジン残基があり、これらの残基のうち30~35個は、結合試薬と反応可能な一級アミンを持つ
検証済みの高品質—精製BSA(フラクションV)は、グルタルアルデヒド、NHSエステル、またはEDC架橋法ですぐに使用可能
適合性のある溶解性—多数のカルボシキル基がBSAの負電荷(pI 5.1)と高い水溶性を示すため、幅広い結合条件で使用できる
免疫原性—67 kDaのBSAは一次免疫原として機能するのに十分な大きさを備えている。または、ハプテンに対する免疫応答を生成するキャリアタンパク質としてKLHを使用した後、抗体スクリーニングやイムノアッセイで非関連タンパク質キャリアとして使用できる

キャリアタンパク質は大きく複雑な分子で、注入することで免疫応答を誘起できます。小さな抗原(ペプチドまたは薬物化合物)に対する特異的な抗体を確実に生成するには、これらハプテンをより大きく複雑な分子(通常はタンパク質)に共有結合させ、免疫原性を高める必要があります。キャリアタンパク質は、免疫原性、溶解性、および十分なハプテンキャリアコンジュゲーションが達成されるかどうかに基づいて選択します。Imject BSAはバッファーに溶解しやすく、グルタルアルデヒド、NHSエステル、EDCなどのクロスリンク試薬とのコンジュゲーションで標的となる、一級アミンとカルボキシル基を多く含みます。Imject BSAは、ハプテンの結合用に安定性と溶解性が最適化されたバッファー中で精製および凍結乾燥されています。

ウシ血清アルブミン(BSA)は、ほとんどの血漿タンパク質と同様に非常に安定で溶解しやすいために、さまざまな用途で実験に用いられる便利なタンパク質です。また分子量 (67 kDa) は免疫原として十分な大きさです。結果として、BSA は、ハプテンとその他の弱い抗原を、抗体産生の目的で、免疫原性を増強するためのコンジュゲーション用として広く利用されるキャリアタンパク質のひとつです。また、KLHまたはその他の免疫原性キャリアを使用して産生される抗体をスクリーニングするために必要なマイクロプレートやその他のアッセイ技術用の独立したハプテンキャリアタンパク質も提供します。

カルボジイミドのクロスリンカーEDCはカルボキシル基を持つハプテン(例えばペプチド抗原のC-末端)をBSAキャリアタンパク質に結合します。この EDC を用いる免疫原の調製法は、配列の中央部にアスパラギン酸残基やグルタミン酸残基 (カルボン酸塩) およびリジン残基 (一級アミン) を持たないペプチド抗原に理想的な方法です。ペプチドにはカルボキシレートとアミンの両方が含まれるため、EDC を用いたコンジュゲーションでは、ペプチド抗原の重合とキャリアタンパク質に対するコンジュゲーションがランダムに行われます。これにより、重合したペプチド抗原がキャリアタンパク質に高レベルで結合、さらに抗体産生においても、さまざまな配向でペプチド抗原の提示が行われることになります。しかし、ペプチド抗原の内部配列に、一級アミン (リジン残基) またはカルボキシル基 (アスパラギン酸、グルタミン酸残基) が含まれる場合、重要な (望まれる) 抗原決定部位が EDC コンジュゲーションによりブロックされることがあります。このような場合は、リン酸緩衝液中の精製されたBSAにホモバイ官能性アミン反応性架橋剤を使用するか、または独自の末端システインでペプチドを合成し、Malemide-Activated BSAを含むキットを使用してキャリアタンパク質コンジュゲートを調製します。

詳細な製品データ
免疫原調製用キャリアタンパク質活性化およびコンジュゲーションデータ

関連製品
Imject™ BSA(PBS中)
Imject™ BSA(MESバッファー中)
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
概要Imject EDC BSA Spin Kit
フォーマットキット
数量5 x 2 mg
製品ラインImject
Unit SizeEach
組成および保存条件
対応範囲:EDCコンジュゲーション反応および完全な免疫原調製5回分、それぞれ最大2 mgのペプチドを含む
• Imject BSA(MESバッファー中)、5 x 2 mg
• Imject EDCコンジュゲーションバッファー、30 mL
• EDC架橋剤、5 x 10 mg
• Imject精製バッファー塩、5 x 0.84 g
• Zebaスピン脱塩カラム、7K MWCO、2 mL、5本

4℃で保管してください。

よくあるご質問(FAQ)

What do I need to consider when designing a peptide for antibody production?

We recommend that hydrophobic residues comprise 50% or less of all the residues in your sequence. Make sure there is at least one charged residue for every five amino acids: this is generally known to enhance the solubility of the peptide. Peptides (compared to polypeptides, which fold and bury the hydrophobic amino acids) are too small to fold, so just a few hydrophobic amino acids may leave them insoluble.

Other guidelines include:
Peptides containing multiple Cys, Met, and Trp can be hard to synthesize.
Some sequences are problematic in solid-phase peptide synthesis or cleavage and are best avoided; these include Asp-Pro sequences or stretches of amino acids that require bulky protecting groups on their side chains during synthesis.
Glycine is often good for antigenicity as it has only a hydrogen side chain; this allows for complete rotation.
Please note that we offer a Custom Antibody Production service (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html) that includes the use of our proprietary Antigen Profiler and Antigen Preparation tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html).

What is the optimal peptide length for antibody production?

Most peptide antigens range in length from 12 to 16 residues and are relatively easy to synthesize. Peptides of 9 residues or shorter have been effective antigens for antibody production, but peptides longer than 16 amino acids may contain several epitopes and form secondary structures. Peptides in excess of 18 residues begin to present more synthetic challenges. Before you synthesize your peptide, we recommend doing a BLASTP search using your peptide sequence. This is to make sure that the peptide is not homologous or identical to a sequence in a completely unrelated protein in the host animal.

Please note that we offer a Custom Antibody Production service (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html) that includes the use of our proprietary Antigen Profiler and Antigen Preparation tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html).

What happens if antibodies are stored improperly?

Improper storage of antibodies can lead to:
- Degradation: Loss of activity and specificity
- Aggregation: Formation of precipitates or clumps
- Reduced performance: Poor results in assays or experiments

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Antibodies and Immunoassays Support Center.

Is your EDAC compound the same as your EDC compound?

Yes, both acronyms are used for the same compound. The chemical name for EDC is 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide and the chemical name for EDAC is N-3-(3-dimethylaminopropyl)-N-ethyl-carbodiimide. Both of these compounds are structurally equivalent.

What do antibody pair kits contain, how many samples can I process, and how can I find a list of antibody pair kits by target?

Antibody pair kits contain capture antibody, detection antibody, recombinant standard and HRP conjugate. Each contains enough reagents to process forty 96-well plates. A list of Antibody Pair Kits (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/antibody-pair-kits.html) is available by target.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Antibodies and Immunoassays Support Center.