Thermo Scientific Pierce Magnetic HA-Tag IP/Co-IP Kitは、HA融合タンパク質の免疫沈降アッセイやHAタグ付きベイトタンパク質を用いたco-IP実験を行うための、特異的な免疫親和性磁気ビーズと試薬が含まれています。
HA-Tag IP/Co-IP Kitの特長:
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特異的磁気ビーズ—c高品質の抗HA単クローン性抗体を共有結合的に固定化することで、高収率での免疫沈降を可能にしました
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低非特異的結合—安定したプレブロッキングされたビーズと特異的抗体は、オフターゲット結合を最小限に抑えます
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スムーズな溶出—低 pH 溶出バッファーは、抗体の浸出汚染なしに HA タグ付きタンパク質相互作用複合体を確実に回収します
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便利で高速—キット一式と簡単な手順で、約1時間でIPまたはCo-IP実験を実行するための最適化されたプロトコルを提供します
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高汎用性—磁性ビーズは、手動および自動の磁気単離ワークフローに対応しています(Thermo Scientific KingFisher機器など)
タンパク質A/G ビーズによる捕捉に基づく従来のIP手順とは異なり、このキットでは、あらかじめ固定化された抗HA抗体を含む磁気ビーズを使用します。これらのPierce抗HA磁気ビーズは、生物学的サンプルからのHAタグ付きタンパク質複合体の特異的な結合を確実にします。抗体がビーズに共有結合しているため、IPターゲットは容易に溶出され、抗体汚染なしに回収されます。IPキット一式には、磁性ビーズ、溶解/洗浄バッファー、低pH溶出バッファー、中和バッファー、HAタグ陽性コントロール溶解液、SDS-PAGE用非還元サンプルバッファーが含まれています。手動および自動ワークフロー用のプロトコルが用意されています。40個のIPまたはco-IPアッセイを行うのに十分な成分が提供される。
ヒトインフルエンザウイルスHAタンパク質に由来する血球凝集素(HA)ペプチド(YPYDVPDYA)は、組換えタンパク質発現に使用されるいくつかの融合タンパク質タグの1つです。Pierce磁気HAタグIP/Co-IPキットは、特異的な高親和性固定化抗体(クローン2-2.2.14)を使用して、細菌や哺乳類細胞溶解液、およびピアースのヒト
in vitro翻訳キットで調製した溶解液からHAタグ付き融合タンパク質を迅速に精製します。ビーズをHAタグ付きタンパク質を含む細胞溶解液とインキュベートし、融合タンパク質を捕捉し、ビーズをその後洗浄し、低pH溶出バッファーまたは非還元サンプルバッファーを用いて溶出する。プロトコルとバッファーはIPおよびco-IP反応に最適化されており、溶出サンプル内で特定のタンパク質相互作用複合体を濃縮します。抗HA抗体は、ウエスタンブロット分析によるHAタグ付きタンパク質の検出に使用できます。
このキットに使用されている磁気ビーズの結合容量やその他の特性については、
Pierce抗HA磁気ビーズ(製品コード88836)を参照してください。
関連製品Pierce™ HA-Tag IP/Co-IP KitFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.