Thermo Scientific Fast DNA末端修復キットは、DNA末端の平滑化およびリン酸化に使用します。反応はわずか5分で完了し、その後は平滑末端ライゲーションに使用できます。
キットのすべてのコンポーネントには、混合済みの試薬が含まれているため、分注ステップが短縮され、利便性がもたらされます。末端修復酵素ミックスには、T4 DNAポリメラーゼとクレノウ断片の最適化された混合物が含まれており、断片化されたDNAの効果的な平滑化を実現します。また、DNA末端の効率的なリン酸化を実現する目的で、T4ポリヌクレオチドキナーゼ(PNK)が含まれています。10X末端修復反応ミックスには、最適化された反応バッファー、ATP、dNTPが含まれています。
断片化されたゲノムDNA(制限酵素消化、噴霧または超音波処理)、制限酵素消化プラスミドDNA、二本鎖cDNA、およびdAオーバーハングを含むPCR産物などのサンプルは、すべてキットに適合します。
機能DNA末端の修復反応中、断片化されたDNAは、5'リン酸基および3'ヒドロキシル基を含む平滑末端DNAに変換されます。末端修復酵素ミックスの5'→3'ポリメラーゼ活性は、5'突出DNA末端を満たし、3'→5'エキソヌクレアーゼ活性は3'オーバーハングを除去します。T4 PNKは、PCR産物などの非リン酸化DNAフラグメントの末端に5'リン酸を付加します。(下記の表1および図1を参照)。
特長•
効率的 - 0.5~5 µgのDNAを平滑化およびリン酸化します
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迅速 — 反応は5分で完了します
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使いやすい — 反応成分があらかじめ混合されているため、分注ステップが短縮されます
アプリケーション• 二本鎖DNA(噴霧されたDNA、超音波処理されたDNA、制限酵素消化DNA、cDNA、PCR産物)の平滑化とリン酸化
内容• 末端修復酵素ミックス
• 10X末端修復反応ミックス
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