Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit
Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit
Thermo Scientific™

Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit

Thermo ScientificマキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キットは、ファーストストランドcDNAの高効率な合成用システム一式となっています。キットは、M-MuLV RTのin vitro進化で得られた高機能酵素、マキシマHマイナス逆転写酵素(RT)を使用します詳細を見る
製品番号(カタログ番号)内容反応数
K1681Kit with dsDNase20反応
K1651Kit only20反応
K1652Kit only反応100回分
K1682Kit with dsDNase反応100回分
製品番号(カタログ番号) K1681
価格(JPY)
39,300
Each
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内容:
Kit with dsDNase
反応数:
20反応
一括またはカスタム形式をリクエストする
Thermo ScientificマキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キットは、ファーストストランドcDNAの高効率な合成用システム一式となっています。キットは、M-MuLV RTのin vitro進化で得られた高機能酵素、マキシマHマイナス逆転写酵素(RT)を使用します。この酵素は、M-MuLV RTの誘導体の中で最も高い耐熱性を持ち、RNase H活性がありません。マキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キットを使用すると、高温(最高65℃)で最大20 kbの長いcDNAを合成でき、他のシステムの完全長cDNA生成能力に取って代わることができます。合成速度が向上しているため、反応は30分で完了します。

特長

• 反応温度の上昇—cDNAのファーストストランドは42~65℃の温度範囲で合成できます
• 完全長ファーストストランドcDNAの高収量—最大20 kbのRNAテンプレートを使用
• 柔軟なプライミング—オリゴ(dT)18、ランダムヘキサマー、または遺伝子特異的プライマー

アプリケーション

• RT-PCR用ファーストストランドcDNA合成
• cDNAライブラリーの作成
• ハイブリダイゼーション用プローブの生成
• アンチセンスRNA合成

内容

• マキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キットには、マキシマHマイナス酵素ミックス、オリゴ(dT)18およびランダムヘキサマープライマー、5倍のRTバッファー、dNTPミックス、ヌクレアーゼフリーの水が含まれます。

反応物質に関する追加情報

• マキシマHマイナス酵素ミックスには、マキシマHマイナス逆転写酵素RiboLock RNase阻害剤が含まれています。RiboLock RNase阻害剤は、RNAテンプレートを温度55℃までRNase A、B、およびCによる分解から効果的に保護します。
•キットには、オリゴ(dT)18およびランダムヘキサマープライマーが含まれます。ランダムヘキサマープライマーは非特異的にテンプレートRNAに結合するため、全RNA中のすべてのRNAからcDNAを合成するために使用されます。オリゴ(dT)18プライマーは、ポリ(A)RNAの3'末端へ選択的にアニールし、ポリ(A)末端が付加したmRNAからのみcDNAを合成します。遺伝子特異的なプライマーをキットとともに用いて、特定の配列からの合成を行うこともできます。
10 mM dNTPミックスは、dATP、dTTP、dCTP、dGTPのプレミックス水溶液です。
ヌクレアーゼフリー水は、反応設定およびサンプルDNAの希釈用です。エンドデオキシリボヌクレアーゼ、エキソデオキシリボヌクレアーゼ、リボヌクレアーゼ、およびホスファターゼが存在しないことが、適切な品質テストで確認されました。

関連製品
マキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キット、dsDNase付き
マキシマHマイナスファーストストランドcDNA合成キット
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
最終産物タイプ第一鎖cDNA
フォーマットキット
内容Kit with dsDNase
反応数20反応
最適反応温度50°C∼55°C
数量20×20 μL反応
反応形態キット
試薬タイプ逆転写
逆転写酵素Maxima H Minus
リボヌクレアーゼH活性低減
出荷条件ドライアイス
サイズ(最終製品)最長20 kb
原料RNA
技術Reverse Transcription
使用対象(アプリケーション)RT-PCR
GC-Rich PCR Performance
反応速度30 min.
Unit SizeEach
組成および保存条件
Maxima HマイナスファーストストランドcDNA合成キットには、Maxima Hマイナス酵素ミックス、dsDNase、10X dsDNaseバッファー、オリゴ(dT)18およびランダムヘキサマープライマー、5X RTバッファー、dNTPミックス、ヌクレアーゼフリー水が含まれています。
-20℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

How can I inactivate Thermo Scientific dsDNase?

dsDNase can be inactivated by incubating the sample at 55°C for 5 min in the presence of 10 mM DTT.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. It is also recommended to use RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides. In contrast, reverse transcriptases with intrinsic RNase H activity are often favored in qPCR applications.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

Does dsDNase cleave ssDNA?

No, dsDNase cleaves only double-stranded DNA. However, if ssDNA forms double-stranded structures, it will act as a target for dsDNase. Because of this, long and complex ssDNA may be partially degraded. Therefore we recommend additional dsDNase inactivation step for RT-PCR amplification of targets 3 kb or longer. The inactivation step should be performed by 5 min incubation at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT.

Can dsDNase be added directly to a reverse transcription reaction to remove genomic DNA?

No. RT reaction composition inhibits dsDNase activity, and genomic DNA removal may be incomplete.