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Exosome sind kleine Vesikel (30 bis 150 nm), die komplizierte RNA- und Protein-Frachten enthalten. Exosome werden als spezifisch ausgeschiedene Vesikel angesehen, die eine interzelluläre Kommunikation ermöglichen. Untersuchungen zu ihrer Funktion als auch ihrer Verwendbarkeit bei der Entwicklung minimalinvasiver Diagnostika stehen dabei im Vordergrund des Interesses.
Unsere Palette an Invitrogen Dynabeads Produkten und anderen Reagenzien, Hilfsmitteln und Protokollen für die Isolierung, Charakterisierung und Analyse des RNA- und Proteingehaltes sowie für das In-vitro- und In-vivo-Tracing tragen dazu bei, das Verständnis von Exosomen zu vertiefen.
Produkte für die Exosom-Forschung
Vollständige Isolierung der Exosome
Ultrazentrifugation kann langwierig und zeitaufwändig sein. Dank der Invitrogen Total Exosome Isolation Reagenzien, die flexibel einsetzbar und einfach skalierbar sind, können Sie nun leicht intakte Exosome aus einer Vielzahl von Ausgangsproben anreichern. Diese Reagenzien und zugehörigen Protokolle sind ideal für eine Reihe von Versuchsanordnungen einschließlich niedriger Eingangsvolumen und der Bearbeitung mehrerer Proben.
Isolierung von Exosom-Subpopulationen
Der aus Zellkulturen (mit Hilfe von Total Exosome Isolation Reagenzien bzw. Ultrazentrifugation) gewonnene Gesamtbestand der Exosome kann weiter durch immunmagnetische Separation entsprechend spezifischer Subpopulationen aufbereitet werden. Verwenden Sie dazu auf Dynabeads basierendes CD9, CD63, CD81, das EpCam-spezifische Reagenz oder kombinieren Sie Streptavidin-Reagenz mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl, um beliebige, auf einem Oberflächen-Antikörper basierende Populationen aufzureinigen.
Die visuelle Identifizierung exosomaler Vesikel kann sich als schwierig erweisen. Nur freie Exosome sind für den Nachweis im Durchfluss zu klein. Es gibt allerdings einige Methoden, die für die Analyse genutzt werden können.
- NanoSight Instrument – Mit einer Total Exosome Isolation Reagenz gewonnene Exosome können mit dem NanoSight Instrument auf ungefähre Größenordnung und Konzentration analysiert werden.
- Lichtmikroskopie – Exosomale RNA oder Membrankomponenten lassen sich markieren, sodass Exosome im Mikroskop visualisiert werden können. Invitrogen spezialisierte Zentrifugationssäulen sind zum Entfernen nicht gebundener Farbstoffe erhältlich. Diese Säulen ermöglichen auch im Vergleich zu herkömmlichen Methoden einen einfacheren Pufferaustausch, die einfachere Entsalzung oder Entfernung von Kontaminanten mit niedrigem Molekulargewicht (< MW 3.000).
- Elektronenmikroskopie (EM) – Einer der Vorteile des Invitrogen Dynabeads magnetischen Trennverfahrens zur Extraktion reiner und spezifischer Exosome ist, dass Sie direkt zur EM-Analyse übergehen können. Sie können Untergruppen des aus der Zellkultur angereicherten Gesamtbestands der Exosome mit Hilfe von Invitrogen CD9, CD63, CD81 oder dem EpCam-spezifischen Reagenz analysieren oder das Invitrogen Streptavidin-Reagenz in Kombination mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl verwenden.
- Durchflusszytometrie – Immunmagnetische Erfassung von Exosomen auf der Oberfläche der Dynabeads ermöglicht für gewöhnlich einen klaren und definierten FFC/SSC-Nachweis in weniger als einer Stunde. Sie können Untergruppen des Exosomgesamtbestands, der aus Zellkulturen angereichert wurde, mit dem CD63-spezifischen Reagenz oder mit dem Streptavidin-Reagenz in Kombination mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl analysieren.
Es wurde nachgewiesen, dass Exosome verschiedene Moleküle von einer Zelle in eine andere transportieren. Diese Fracht umfasst Proteine, Lipide, mRNA (Fragmente und vollständig), rRNA, miRNA und verschiedene ncRNA.
- Isolierung von RNA und Proteinen – Gleichzeitige Isolierung von Proteinen und Gesamt-RNA aus derselben Probe vorangereicherter Exosome wird durch Anwendung des Invitrogen Total Exosome RNA and Protein Isolation Kits möglich. Das Kit ist mit allen Protokollen für die Isolierung von Exosomen kompatibel.
- Protein-Analyse – Spezifische monoklonale Antikörper (CD9, CD63 und CD81) ermöglichen den Nachweis zellulärer und exosomaler Antigene durch Western Blot-Analyse. Wenn Sie mehrere Proteinproben auf dem gleichen Gel vergleichen und dabei exosomale Proteinkomplexe intakt halten möchten, sollten Sie die schnelle und schonende Immunpräzipitationsmethode auf der Grundlage von Dynabeads mit Invitrogen Protein A oder Protein G in Kombination mit einem primären Antikörper Ihrer Wahl in Erwägung ziehen.
- RNA-Analyse – Mit dem Total Exosome RNA and Protein Isolation Kit gewonnene exosomale RNA kann z. B. durch qRT-PCR mit Applied Biosystems TaqMan Assays, RNA-Sequenzierung oder mittels Next-Generation-Sequenzierung analysiert werden. Exosomale RNA und Membrankomponenten sind mit fluoreszierenden Farbstoffen markierbar, wobei nicht integrierter Farbstoff mittels spezieller Invitrogen Zentrifugationssäulen entfernt werden kann.
Gibco Exosome-Depleted FBS übertrifft andere auf dem Markt erhältliche Exosom-arme FBS bei weitem.
- ≥90 % der Exosome wurden entfernt
- Jede Charge ist für die Zellkultur getestet
- Speziell für die Erforschung der Exosome entwickelt
Vollständige Isolierung der Exosome
Ultrazentrifugation kann langwierig und zeitaufwändig sein. Dank der Invitrogen Total Exosome Isolation Reagenzien, die flexibel einsetzbar und einfach skalierbar sind, können Sie nun leicht intakte Exosome aus einer Vielzahl von Ausgangsproben anreichern. Diese Reagenzien und zugehörigen Protokolle sind ideal für eine Reihe von Versuchsanordnungen einschließlich niedriger Eingangsvolumen und der Bearbeitung mehrerer Proben.
Isolierung von Exosom-Subpopulationen
Der aus Zellkulturen (mit Hilfe von Total Exosome Isolation Reagenzien bzw. Ultrazentrifugation) gewonnene Gesamtbestand der Exosome kann weiter durch immunmagnetische Separation entsprechend spezifischer Subpopulationen aufbereitet werden. Verwenden Sie dazu auf Dynabeads basierendes CD9, CD63, CD81, das EpCam-spezifische Reagenz oder kombinieren Sie Streptavidin-Reagenz mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl, um beliebige, auf einem Oberflächen-Antikörper basierende Populationen aufzureinigen.
Die visuelle Identifizierung exosomaler Vesikel kann sich als schwierig erweisen. Nur freie Exosome sind für den Nachweis im Durchfluss zu klein. Es gibt allerdings einige Methoden, die für die Analyse genutzt werden können.
- NanoSight Instrument – Mit einer Total Exosome Isolation Reagenz gewonnene Exosome können mit dem NanoSight Instrument auf ungefähre Größenordnung und Konzentration analysiert werden.
- Lichtmikroskopie – Exosomale RNA oder Membrankomponenten lassen sich markieren, sodass Exosome im Mikroskop visualisiert werden können. Invitrogen spezialisierte Zentrifugationssäulen sind zum Entfernen nicht gebundener Farbstoffe erhältlich. Diese Säulen ermöglichen auch im Vergleich zu herkömmlichen Methoden einen einfacheren Pufferaustausch, die einfachere Entsalzung oder Entfernung von Kontaminanten mit niedrigem Molekulargewicht (< MW 3.000).
- Elektronenmikroskopie (EM) – Einer der Vorteile des Invitrogen Dynabeads magnetischen Trennverfahrens zur Extraktion reiner und spezifischer Exosome ist, dass Sie direkt zur EM-Analyse übergehen können. Sie können Untergruppen des aus der Zellkultur angereicherten Gesamtbestands der Exosome mit Hilfe von Invitrogen CD9, CD63, CD81 oder dem EpCam-spezifischen Reagenz analysieren oder das Invitrogen Streptavidin-Reagenz in Kombination mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl verwenden.
- Durchflusszytometrie – Immunmagnetische Erfassung von Exosomen auf der Oberfläche der Dynabeads ermöglicht für gewöhnlich einen klaren und definierten FFC/SSC-Nachweis in weniger als einer Stunde. Sie können Untergruppen des Exosomgesamtbestands, der aus Zellkulturen angereichert wurde, mit dem CD63-spezifischen Reagenz oder mit dem Streptavidin-Reagenz in Kombination mit einem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl analysieren.
Es wurde nachgewiesen, dass Exosome verschiedene Moleküle von einer Zelle in eine andere transportieren. Diese Fracht umfasst Proteine, Lipide, mRNA (Fragmente und vollständig), rRNA, miRNA und verschiedene ncRNA.
- Isolierung von RNA und Proteinen – Gleichzeitige Isolierung von Proteinen und Gesamt-RNA aus derselben Probe vorangereicherter Exosome wird durch Anwendung des Invitrogen Total Exosome RNA and Protein Isolation Kits möglich. Das Kit ist mit allen Protokollen für die Isolierung von Exosomen kompatibel.
- Protein-Analyse – Spezifische monoklonale Antikörper (CD9, CD63 und CD81) ermöglichen den Nachweis zellulärer und exosomaler Antigene durch Western Blot-Analyse. Wenn Sie mehrere Proteinproben auf dem gleichen Gel vergleichen und dabei exosomale Proteinkomplexe intakt halten möchten, sollten Sie die schnelle und schonende Immunpräzipitationsmethode auf der Grundlage von Dynabeads mit Invitrogen Protein A oder Protein G in Kombination mit einem primären Antikörper Ihrer Wahl in Erwägung ziehen.
- RNA-Analyse – Mit dem Total Exosome RNA and Protein Isolation Kit gewonnene exosomale RNA kann z. B. durch qRT-PCR mit Applied Biosystems TaqMan Assays, RNA-Sequenzierung oder mittels Next-Generation-Sequenzierung analysiert werden. Exosomale RNA und Membrankomponenten sind mit fluoreszierenden Farbstoffen markierbar, wobei nicht integrierter Farbstoff mittels spezieller Invitrogen Zentrifugationssäulen entfernt werden kann.
Gibco Exosome-Depleted FBS übertrifft andere auf dem Markt erhältliche Exosom-arme FBS bei weitem.
- ≥90 % der Exosome wurden entfernt
- Jede Charge ist für die Zellkultur getestet
- Speziell für die Erforschung der Exosome entwickelt
| Wir haben 10 der bekanntesten Wissenschaftler zur Exosom-Forschung befragt. Schauen Sie sich jede Episode an: |
