NovaBright™ Phospha-Light™ EXP Assay Kit for SEAP (Secreted Placental Alkaline Phosphatase) Reporter Gene Detection

NovaBright™ Phospha-Light™ EXP Assay Kitは、分泌型胎盤性アルカリホスファターゼ（SEAP）または非分泌型胎盤アイソザイムPLAPを超高感度で検出する第2世代化学発光レポーター遺伝子アッセイです。このアッセイは、超高感度検出と5桁のダイナミックレンジを組み合わせています。このアッセイシステムは、高性能アルカリホスファターゼ基質であるCSPD™、独自の次世代化学発光エンハンサー、内在性の非胎盤性アルカリホスファターゼ活性を特異的に阻害するよう設計された独自のバッファーシステムを使用しており、前世代の化学発光アッセイや比色および蛍光検出メソッドよりも優れた性能を提供します。この新しいキットは、他のアッセイよりもはるかにシンプルな手順を実現します。このアッセイは均一で、必要なのはすぐに使用できる状態で提供される2つの溶液のみです。長時間のグローライト発光カイネティクスは安定した光シグナルを提供し、読み取り時間の柔軟性を実現します。アッセイのシグナルは、インジェクターのないシンプルなルミノメーターで測定できます。SEAPは細胞培養培地に分泌されるレポータータンパク質で、培地の一部を検査することによって検出されます。SEAPは培地に放出されるため、細胞溶解は不要です。ただしこのアッセイでは、細胞溶解後に胎盤性アルカリホスファゼ（PLAP）アイソザイムの検出も可能です。アルカリホスファターゼレポーター酵素の高感度検出は、遺伝子発現、ウイルス機能アッセイ、ワクチン開発、ウイルスベクターや遺伝子治療用遺伝子導入法の開発、in vivo遺伝子発現モニタリング、新しい細胞機能アッセイなどのライフサイエンス研究の多くの分野において多数のアプリケーションを可能にします。この分泌型アルカリホスファターゼ（SEAP）アッセイは、トランスフェクション効率を最適化するのにもっとも簡単で迅速な方法の1つです。NovaBright™ Secreted Placental Alkaline Phosphatase (SEAP) Enzyme Reporter Gene Chemiluminescent Reporter Gene Detection Kit 2.0の前世代のキットは、確立済みの細胞株やトランスフェクション初代細胞において、遺伝子ノックダウン／RNA干渉の測定結果などとして遺伝子発現を測定するレポーター遺伝子アッセイに幅広く使用されています。このアッセイは、ウイルス遺伝子発現アッセイ、ウイルスの複製、ウイルス融合性、ウイルスの中和、ウイルス媒介細胞融合、ウイルスの感染性などのさまざまなウイルス機能アッセイに使用されています。SEAPレポータータンパク質の使用は、トランスジェニック動物、トランスフェクション動物、またはウイルスベクター感染動物の血清サンプルをアッセイすることで、in vivoレポーター遺伝子アッセイを可能にします。NovaBright™レポーター遺伝子アッセイシステムは、トランスジェニックまたはトランスフェクション動物（マウス、ラット、マーモセット、サルなど）の血清、ブタ血清、およびニワトリ卵尿膜腔液中のSEAPレベルを測定するのに使用されています。マウスのSEAPタンパク質（mSEAP）は、トランスジェニックマウスにおけるSEAPタンパク質の安定性を向上させるために最近開発され、NovaBright™ SEAPアッセイはmSEAPの高感度検出に使用されています。レポーター遺伝子（遺伝子発現）アプリケーションに加えて、このアッセイシステムは、SEAP-リガンドキメラを用いた受容体-リガンド結合アッセイ、プロテアーゼ媒介分泌、および分泌経路活性において機能レポーターとしてSEAPを測定するのに使用されます。NovaBright™アッセイシステムは、細胞の非胎盤性アルカリホスファターゼをバイオマーカーとして測定するのにも使用されています。