Thermo Scientific T-PER組織タンパク質抽出試薬を使用すると、組織サンプルから総タンパク質を穏やかに抽出できます。
T-PER組織タンパク質抽出試薬の特長: •
シンプルな手順 — 組織試料を組織とT-PER試薬の割合が1:20(w/v)になるように均質化し、ペレット状細胞/組織片になるまで遠心分離します
•
穏やかで便利 — 界面活性剤は透析によって迅速かつ簡単に除去できるため、追加の成分(プロテアーゼ阻害剤、塩類、還元剤、キレート剤など)を加えることが可能
•
柔軟性 — ライセートは、レポーターアッセイ、プロテインキナーゼアッセイ、免疫測定法、タンパク質精製に使用可能
•
適合性— ライセートは、レポーターアッセイ、プロテインキナーゼアッセイ、免疫測定法、およびタンパク質精製に使用できます。
製品の詳細この組織細胞溶解試薬は、均質化によって哺乳類組織試料からタンパク質を効率的に溶解するために、25 mMビシンおよび150 mM塩化ナトリウム(pH 7.6)を含む溶液中に独自の界面活性剤を添加しています。そのシンプルな組成は、プロテアーゼ阻害剤、塩類、還元剤、キレート剤などの添加物を加えることができ、多くのサンプルタイプや溶解アプリケーションに幅広く役立ちます。T-PER試薬で調製された細胞ライセートは、レポーターアッセイ(例:ルシフェラーゼ、β-ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ)、プロテインキナーゼアッセイ(例:プロテインキナーゼA(PKA)、プロテインキナーゼC(PKC)、チロシンキナーゼ)、免疫測定法(例:ウェスタンブロッティング、ELISA、RIA)、タンパク質精製にそのまま使用できます。
さまざまなサンプルからの均一で効率的な組織タンパク質抽出は、組織組成や抽出方法が異なるため、困難です。心臓や腎臓などの線維性コラーゲン組織では、凍結融解法や乳鉢乳棒法でタンパク質を抽出する場合、界面活性剤の助けなしには効率的に抽出できません。それに対して、脾臓や肝臓などの軟組織からタンパク質を最適に抽出するには、穏やかな抽出プロトコルが必要です。T-PER試薬は、機械的な抽出法とは違い、すべての組織で使用できるように設計されています。穏やかな界面活性剤は、機能を損なうことなくタンパク質の可溶化を促進し、この試薬の中性pHと塩濃度により、細胞内コンパートメントからのより効率的な抽出が可能になり、均一なライセートが得られます。
T-PER試薬は、新鮮組織および凍結組織のタンパク質収量について検証されています。予想されたとおり、凍結組織と凍結融解プロトコルのほうが高いタンパク質収量が得られました。さらに、T-PER試薬は、細胞膜(Na-K+ ATPase、pan-カドヘリン)、細胞質( HSP90、MAPK)、ミトコンドリア(COXIV)、核(HDAC1)などのさまざまな細胞コンパートメントから標的タンパク質を効率的に抽出し、脳(シナプトフィシンフォーム)および心臓組織(トロポニンT心臓アイソフォーム)から組織特異的マーカーを抽出することが示されています。
関連製品M-PER™ Mammalian Protein Extraction Reagent