eBioscience™ Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set
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Invitrogen™

eBioscience™ Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set

細胞内固定および透過化バッファーセットは、細胞内染色およびフローサイトメトリー解析で使用するように設計されており、蛍光色素で標識化された抗体の非特異的染色を低減し、蛍光シグナル/ノイズ比が高まるように、特に調製されています。最初のステップで、タンパク質を架橋する固定バッファーで生細胞を「固定」できます。2番目のステップで、透過処理バッファーを使用して膜に穴を開け、細胞内染色抗体を効率的に細胞内に入れることができます詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
88-8824-001 kit
製品番号(カタログ番号) 88-8824-00
価格(JPY)
40,800
Each
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数量:
1 kit
細胞内固定および透過化バッファーセットは、細胞内染色およびフローサイトメトリー解析で使用するように設計されており、蛍光色素で標識化された抗体の非特異的染色を低減し、蛍光シグナル/ノイズ比が高まるように、特に調製されています。最初のステップで、タンパク質を架橋する固定バッファーで生細胞を「固定」できます。2番目のステップで、透過処理バッファーを使用して膜に穴を開け、細胞内染色抗体を効率的に細胞内に入れることができます。細胞の透過化が終わったら、透過処理バッファーを使用して後続の洗浄ステップ、抗体添加、インキュベーションを行う必要があります。試料を処理する前の最終的な洗浄ステップと細胞の再懸濁は、フローサイトメトリー染色バッファーを使用して行われます(cat.00-4222)。通常、このキットはケモカインやサイトカインなど、分泌経路内のタンパク質と細胞質タンパク質の両方を染色するために使用されます。核内染色には推奨されません。核染色については、「Foxp3/Transcription Factor Buffer Set」(cat.00-5523)を参照してください。

固定ステップに進む前に、固定可能ないずれかの生存判別色素(eFluor™ 450、506、660、780、520、または455UV)を使用して、生細胞に標識を付けることをお薦めします。

報告されている用途
フローサイトメトリー解析、フローサイトメトリー解析後の細胞内染色

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
製品ラインeBioscience
数量1 kit
製品タイプバッファーセット
溶液タイプFixation/Permeabilization Buffer
Unit SizeEach

よくあるご質問(FAQ)

Do you offer an alternative for the discontinued 3-Germ Layer ICC Kit (Cat. No. A25538)?

We do not have a direct alternative for the discontinued 3-Germ Layer ICC Kit (Cat. No. A25538). However, we do have alternative primary and secondary antibodies, as well as reagents, that can be used for trilineage differentiation. Please note that we have not internally validated the use of all these reagents together.

We recommend the following primary antibodies:

Alpha-Smooth Muscle Actin Monoclonal Antibody (1A4 (asm-1)) (Cat. No. MA5-11547)

alpha-Fetoprotein Monoclonal Antibody (AFP3) (Cat. No. 14-6583-80)

beta-3 Tubulin Monoclonal Antibody (2G10) (Cat. No. MA1-118)

We recommend the following secondary antibodies:

Goat anti-Mouse IgG2a Cross-Adsorbed, Alexa Fluor 555 (Cat. No. A21137)

Goat anti-Mouse IgG2a Cross-Adsorbed, Alexa Fluor 594 (Cat. No. A21135)

https://www.thermofisher.com/antibody/product/Goat-anti-Mouse-IgG1-Cross-Adsorbed-Secondary-Antibody-Polyclonal/A-21121

We recommend using the following reagents:

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/88-8824-00

NucBlue Fixed Cell ReadyProbes Reagent (DAPI) (Cat. No. R37606)

Blocker BSA (Cat. No. 37520)

DPBS (10X), no calcium, no magnesium (Cat. No. 14200075)

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What fixative should I use to fix my cells or tissues for antibody labeling?

Aldehyde-based fixatives (e.g., formaldehyde, glutaraldehyde) crosslink various cellular components, which helps retain proteins and cell morphology, but some antigens can be masked by the crosslinking, requiring antigen retrieval methods to unmask the antigen binding sites. Also, aldehyde-based fixation requires permeabilization to allow entry of antibodies. Organic solvents such as methanol and acetone condense proteins and permeabilize the cells, but cell morphology can be compromised. Surface antigens can be labeled without fixation.

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Can eVolve-conjugated antibodies be used in combination with intracellular staining?

Yes! eVolve conjugates were designed to be compatible with eBioscience's intracellular staining buffers including the Foxp3/Transcription Factor Staining Buffer Set (Cat. No. 00-5523-00) and the Intracellular Fixation and Permeabilization Buffer Set (Cat. No. 88-8824-00).

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