Thermo Scientific Pierce EDCは、カルボキシルとアミンに反応する、スペーサーを持たないクロスリンカーです。EDCはまずカルボキシル基と反応し、アミン反応性O-アシルイソ尿素中間体を形成します。この中間体はアミノ基と迅速に反応してアミド結合を形成し、イソ尿素副産物を放出します。この中間体は水溶液中では不安定であるため、2ステップの結合手順では安定化のためにN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)を使用します。アミンと反応しなかった場合、中間体は加水分解し、カルボキシルが再生されてN置換尿素が放出されます。副反応としてN-アシル尿素が生成され、これは通常、タンパク質の疎水性領域にあるカルボキシルに限定されます。
Thermo Scientificの計量不要製品は、分注済みのフォーマットで提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。
EDCの特性:
•反応基
:
カルボジイミド• 反応標的
:カルボキシル基を活性化してアミノ基(1級アミン)に結合
•
複数の結合戦略 — EDCを単独で標的基と反応させるか、
NHSまたは
スルホ-NHSを添加して反応効率を向上させたり、後続のアミンとの反応のために活性中間体を安定化
•
中性連結 — カルボキシルとアミンの間に中性アミド結合を形成
•
水溶性試薬 — 水性の生理的バッファー中の反応に直接添加
•
可溶性の反応副産物 — 水または希酸による洗浄で容易に除去可能
•
高純度の結晶試薬 — 高品質の活性化誘導体の作成に使用
EDCの特性• 分子式:C
8H
17N
3·HCl
• 分子量:191.7
• スペーサーアームの鎖長:0 Å
• CAS番号:25952-53-8
• 反応基:
カルボジイミド• 反応性:pH 4.7~6.0(至適)でカルボキシル基と活性中間体を形成し、中間体が1級アミンと反応
1-エチル-3-[3-ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDCまたはEDAC)はスペーサーを持たないクロスリンカーで、カルボキシル基を1級アミンに結合させるために使用されます。このクロスリンカーは、ペプチド合成におけるアミド結合の形成、免疫原を作成するためのハプテンのキャリアタンパク質への結合、5'リン酸基を介した核酸の標識、生体分子のアミン反応性NHSエステルの作成など、さまざまなアプリケーションに使用されます。EDCはカルボキシルと反応して、アミン反応性の
O-アシルイソ尿素中間体を形成します。この中間体は、近隣にアミノ基が存在しない場合、加水分解してカルボキシル基に戻ります。EDCは、
N-ヒドロキシスルホスクシンイミド(Sulfo-NHS)の存在下で、カルボキシル基をアミン反応性スルホ-NHSエステルに変換するのに使用できます。そのためには、EDCをカルボキシル含有分子と混合し、スルホ-NHSを添加します。
アプリケーション:• ペプチドおよびタンパク質間のカルボキシル基およびアミノ基を結合
• ハプテンを免疫原性キャリアタンパク質に結合(例:
ペプチドのKLHへの結合)
•
ペプチド抗原をアフィニティ精製抗体に固定• NHS活性化、アミン反応性標識化合物の作成
• タンパク質をカルボキシル基コートビーズまたは表面に結合
• アミン反応性Sulfo-NHSエステルによるナノ粒子の活性化
• 5'リン酸基を介したDNAの標識(技術情報#30を参照)
製品リファレンス:クロスリンカーアプリケーションガイド--この製品に関連する最近の文献を検索できます
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.