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Extraction d’ARN par type d’échantillon
Que vous commenciez par des cellules en culture ou des échantillons de tissus, ou que vous manipuliez des plantes, des bactéries ou des cellules de mammifères, les réactifs et kits d’extraction d’ARN Ambion vous offrent le produit idéal pour vos recherches. La marque Ambion comprend des produits Invitrogen traditionnels tels que les Réactifs TRIzol et les kits de purification PureLink, ainsi que des produits Ambion de premier ordre comme les kits et les réactifs Cells-to-CT, MagMAX et RNAlater.
Quel kit d’extraction d’ARN d’un échantillon sanguin vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Optimisé pour les échantillons liquides | Kit spécialisé de déplétion d’érythrocytes non nucléés | Format de plaque de filtration à 96 colonnes, pour les besoins de HTP | HTP optimisé pour la purification à partir d’échantillons sanguins stabilisés | Format HTP, capable de récupérer l’ARN de toutes tailles (y compris les microARN) | Rendement d’ARN élevé directement à partir du sang total, pas besoin d’isoler les WBC | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRIzol LS | Kit de sang d’ARN total PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | MagMAX pour kit d’isolement d’ARN de tubes de prélèvement sanguin stabilisés | Isolement d’ARN total MagMAX mirVana | Kit RiboPure Blood | |
| Meilleure vente | ✓ | |||||
| Réactifs de stabilisation compatibles | EDTA, héparine, citrate, ARNlater | EDTA, héparine, citrate | EDTA, héparine, citrate | Tubes Tempus ou PaxGene | EDTA ou citrate | EDTA, héparine, citrate, ARNlater |
| Réactif de stabilisation inclus | ✓ RNAlater | |||||
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonnes de silice rapides et pratiques dans un format de plaque | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend une extraction organique et une colonne de silice (aucune précipitation requise) |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 12 tubes en 2 heures | 96 échantillons en <1 heure | 30 minutes | |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | ✓ |
Pour de plus amples informations sur la manipulation de sang, consultez nos articles techniques :
Protocoles complémentaires
- Protocole de fractionnement sanguin pour le prélèvement de globules blancs
- Isolement de petits ARN à l’aide du kit RiboPure Blood
Conseils relatifs à la paillasse
Articles TechNotes
- Conseils et astuces pour manipuler des échantillons sanguins
- Extraction du microARN des échantillons sanguins - TechNotes 13(1)
- Récupération d’ARN à haut débit à partir d’échantillons de mammifères, de plantes et de virus - TechNotes 13(1)
- Amélioration de l’isolement d’ARN pour l’analyse d’échantillons et bien plus - TechNotes 10(3)
- Amélioration du profilage d’expression génétique avec les échantillons sanguins de souris - TechNotes 13(4)
- Méthodes améliorées pour le profilage d’expression génétique à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 13(3)
- Amélioration de la sensibilité des biopuces grâce aux échantillons d’ARN de sang total - TechNotes 12(3)
- Isolement de l’ARN des globules blancs capturés par un nouveau système de filtration - TechNotes 12(4)
- Isolement de l’ARN à faible et haut débit à partir d’échantillons de tissus exempts de cellules et de sang - TechNotes 13(2)
- Expression de miARN dans les globules blancs - TechNotes 11(3)
- Obtention de l’ARN de la plus haute qualité à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 16(1)
- Purification d’ARN directement à partir de sang total - TechNotes 11(4)
- Quantification de miARN à partir de quelques gouttes de sang de souris - TechNotes 14(4)
- Gros plan sur la recherche : Données de biopuces supérieures à partir des échantillons sanguins - TechNotes 14(4)
- Extraction d’ARN à partir du sang : Choisir le meilleur système pour vos études d’expression génétique - TechNotes 14(2)
- ARN de sang total de souris pour le profilage d’expression - TechNotes 13(3)
- Isolement d’ARN robuste à haut débit à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 12(3)
- Profilage d’expression génétique supérieur avec des échantillons de sang total humain - TechNotes 14(3)
- ARN total de sang total pour le profilage d’expression - TechNotes 12(2)
La purification de l’ARN à partir de cellules en culture a toujours été une procédure très répétitive, chronophage et exigeante en main d’œuvre, impliquant souvent l’utilisation de produits chimiques organiques toxiques. Les produits développés par nos experts en ARN vous permettent d’isoler l’ARN d’un rendement, d’une pureté et d’une intégrité maximum à l’aide de plusieurs formats technologiques (extraction organique, colonnes en fibre de verre, billes magnétiques et combinaisons de ces formats).
Vous pouvez également analyser des lysats cellulaires cultivés sans isoler au préalable l’ARN. En un temps considérablement réduit, vous obtiendrez des résultats de qPCR équivalents ou supérieurs à ceux de l’ARN purifié. Les produits Invitrogen comme les gammes de produits Cells-to-CT et Single Cell-to-CT offrent des performances et des avantages exceptionnels en termes de manipulation.
Quel kit d’isolement d’ARN des cellules en culture vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| ARN intact ultra-pur | Format de colonne rapide et pratique pour l’ARN (>200 nt) | Format de plateau de filtre rapide et pratique, basé sur colonne, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique basée sur colonne à partir d’une entrée d’échantillon limitée (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique pour les petites espèces d’ARN | Système complet pour cellules à qRT-PCR sans purification d’ARN | |
| Réactif TRIzol | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’ARN micro-échelle PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Kits Cells-to-CT | |
| Meilleure vente | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 20 minutes | 30 minutes | <10 minutes |
| Méthode de lyse cellulaire | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Extraction organique suivie d’une précipitation à l’alcool | Lyse Cells-to-CT |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 1 x 107 cellules | 5 x 106 à 1 x 108 cellules | 5 x 106 à 1 x 108 cellules | Jusqu’à 5 x 105 cellules | 102 à 107 cellules de culture | 10 à 100 000 cellules |
| Application | Toutes les méthodes d’expression d’ARN | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | Analyse de microARN | qRT-PCR |
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la conservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries animaux intacts. Elle élimine la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide pour un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’extraction d’ARN des échantillons FFPE vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Isolement à faible débit d’ARN et d’ADN à partir de la même coupe FFPE | Isolement évolutif de l’ARN et de l’ADN à partir de la même coupe FFPE | |
|---|---|---|
| Kit d’isolement d’acide nucléique total RecoverAll pour FFPE | Kit ADN/ARN FFPE Ultra MagMAX | |
| Temps de préparation | 4,5 heures (temps total pour 16 échantillons) 2,5 heures de main-d’œuvre | 4 heures (temps total pour 96 préparations) 1 heure de main-d’œuvre |
| Produit fini extrait | ARN total, microARN, ADNg | ARN total, microARN, ADNg |
| Méthode d’isolement | purification de colonne | purification de billes mag. |
| Déparaffinage requis | ✓ | ✓ |
| Compatible avec l’automatisation (post-déparaffinage) | ✓ (scripts pour KF Flex et Duo Prime) | |
| Plage d’échantillons FFPE compatible | coupes jusqu’à 4 x 20 microns (tissu de 300 mm2) | coupes jusqu’à 2 x 20 microns (tissu de 300 mm2) |
| Volume de l’échantillon | ADN purifié de ~50 µl ARN purifié de ~50 µl | ADN purifié de ~50 ul ARN purifié de ~50 µl |
| Compatible avec les panels d’ADN Ion AmpliSeq (par ex. panel Cancer Hotspot v2) | ✓ | ✓ |
| Compatible avec les panels d’ADN Ion AmpliSeq (par ex. cancer ARN et fusion ARN) | ✓ | ✓ |
Pourquoi l’isolement d’ARN d’échantillons FFPE est-il si difficile ?
La récupération d’ARN de qualité à partir d’échantillons FFPE peut être une tâche difficile. Le processus de fixation entraîne une réticulation entre les acides nucléiques et les protéines, et modifie de manière covalente l’ARN en ajoutant des groupes monométhyliques aux bases. Ainsi, les molécules sont rigides et sensibles au cisaillement mécanique, et les réticules peuvent compromettre l’utilisation de l’ARN comme substrat pour la transcription inverse. Par conséquent, pour utiliser les tissus FFPE comme source pour l’analyse de l’expression génétique, une méthode fiable est nécessaire pour l’extraction de l’ARN de la matrice réticulée.
Comment pouvez-vous améliorer vos chances de réussite avec des tissus FFPE ?
Plusieurs facteurs peuvent avoir un impact sur la qualité globale et le rendement de l’ARN isolé des tissus FFPE. Voici quelques recommandations pour répondre à plusieurs facteurs clés :
- Approvisionnement de tissus en amont et préparation des échantillons de tissus : si possible, les tissus doivent être fixés dans l’heure suivant la résection chirurgicale. Une importante dégradation de l’ARN peut se produire avant la fin du processus de fixation. Le temps de fixation optimal est de 12 à 24 heures, avec du formol neutre tamponné ou du paraformaldéhyde. Les tissus fixés doivent être minutieusement déshydratés avant le processus d’enrobage.
- Stockage de bloc : le stockage de blocs sans faces coupées, dans la mesure du possible, empêche les dommages continus dus à l’exposition à l’oxygène atmosphérique, à l’eau et à d’autres facteurs environnementaux comme la lumière et l’infestation (champignons, insectes, etc.).
- Type, taille et quantité de tissu utilisés pour l’isolement d’ARN : l’épaisseur de tissu recommandée est de 10-20 µm. Le nombre de coupes utilisées est déterminé par le type de tissu (qui a un impact sur la densité cellulaire) et la surface (taille recommandée : 50 à 300 mm2). Un excès de matériau de départ peut provoquer une obstruction du filtre, ce qui entraîne un rendement médiocre.
- Quantité excessive de paraffine utilisée pour l’enrobage des tissus : chaque fois que possible, l’excès de paraffine doit être coupé avant d’initier le protocole de purification. Pour les méthodes de purification à base de xylène, deux traitements au xylène à température ambiante doivent être suffisants pour un déparaffinage complet. Si vous le souhaitez, un traitement plus rigoureux de 37 à 55°C peut être effectué pendant 30 minutes maximum. Après le déparaffinage du xylène, il est essentiel d’éliminer complètement l’éthanol à 100 % et de sécher les pastilles après les deux lavages à l’éthanol à 100 %. La méthode à microbilles magnétiques utilise de nouveaux produits chimiques pour traiter la paraffine qui limite l’entrée à des coupes de 20 µm.
Les kits ADN/ARN FFPE Ultra MagMAX sont conçus pour un isolement rapide, efficace et automatique de l’ARN total et de l’ADN des échantillons FFPE à l’aide de particules magnétiques Invitrogen MagMAX. Les kits Invitrogen MagMAX FFPE NA offrent des flux de travaux plus rapides et utilisent des réactifs moins toxiques, sans sacrifier la qualité du processus. Ces kits permettent d’obtenir un rendement et une pureté d’acide nucléique comparables à ceux du système à filtre RecoverAll le plus performant de sa catégorie. Les kits MagMAX FFPE NA surpassent les produits dotés de protocoles similaires et permettent d’obtenir des rendements d’ARN et d’ADN comparables à ceux des protocoles plus longs, plus dangereux et à faible débit.
La procédure du kit d’isolement de l’acide nucléique total RecoverAll exige un délai de manipulation d’environ 45 minutes et peut généralement être réalisée en moins d’un jour pour l’isolement de l’ARN. Les échantillons FFPE sont déparaffinés à l’aide d’une série de lavages au xylène et à l’éthanol. Ils sont ensuite soumis à une digestion rigoureuse de la protéase avec une durée d’incubation adaptée à la récupération de l’ARN ou de l’ADN. Les acides nucléiques sont purifiés à l’aide d’une méthodologie rapide de filtre en verre qui inclut un traitement de nucléase sur filtre et sont élués dans l’eau ou le tampon à faible teneur en sel fourni.
Ressources techniques
Articles TechNotes
- Extraction d’acides nucléiques d’échantillons FFPE
- Quantification précise et sensible des microARN à partir de tissus FFPE - TechNotes 16(1) : Cette étude décrit l’isolement et la mesure précise de l’expression des miARN à partir d’échantillons au formol ou fixés au formol et enrobés en paraffine (FFPE).
- Isolement plus rapide des acides nucléiques des tissus FFPE - TechNotes 16(1) : Applied Biosystems a amélioré le protocole inhérent au kit d’isolement d’acide nucléique total Ambion RecoverAll pour les tissus FFPE, engendrant ainsi une réduction considérable du temps de traitement.
- Analyse optimisée de l’expression génétique à partir d’échantillons FFPE - TechNotes 14(3) : Le protocole optimisé qui est présenté ici peut être utilisé pour quantifier de manière fiable les niveaux d’expression d’ARNm en utilisant l’ARN isolé des échantillons FFPE et la RT-PCR en temps réel.
- Récupération des rendements élevés d’acide nucléique total à partir de tissus fixés au formol et enrobés de paraffine (FFPE) - TechNotes 12(3) : Le nouveau kit RecoverAll d’Ambion permet aux chercheurs d’isoler l’ADN et/ou l’ARN (y compris le microARN) des échantillons FFPE. Les acides nucléiques récupérés sont idéaux pour diverses applications en aval telles que l’analyse par biopuces, la qRT-PCR et l’analyse des mutations.
- Analyse de microARN à partir de l’ARN extrait d’échantillons fixés au formol et enrobés de paraffine (FFPE) et fraîchement congelés
- Corrélation élevée des données de quantification des miARN à partir de tissus FFPE appariés et congelés instantanément à l’aide des dosages de microARN TaqMan
- Génotypage de l’ADN à partir d’échantillons FFPE humains - Fiable et reproductible : Note d’application
- Extraction et quantification optimisées de l’ARN à partir d’échantillons FFPE pour les analyses de l’expression génétique
- Protocole : Préparation de la bibliothèque d’ARN FFPE pour le séquençage SOLiD
- Kit d’isolement d’acide nucléique total RecoverAll™
Conseils relatifs à la paillasse
Vos données
- Identification des signatures d’ARNm liées au cancer dans les échantillons patient FFPE : Le laboratoire Yeatman du H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, FL) étudie les signatures d’expression génétique qui définissent les cancers du côlon, du sein et autres.
- Effets de la coloration LCM sur la RT-PCR en temps réel : Une étude est décrite pour démontrer que le kit de coloration LCM Ambion peut être utilisé avec succès sur les tissus fixés au formol et enrobés en paraffine (FFPE) sans compromettre le rendement ou la qualité de l’ARN extrait.
Note d’application
Bulletin de produits
Quel kit d’isolement d’ARN végétal vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Parfait pour les échantillons difficiles (tissus et graines de conifères) | Rapide et simple d’utilisation | Rétablissement efficace aux valeurs de consigne des micro-ARN et petits ARN | Rapide et entièrement automatisé | |
|---|---|---|---|---|
| Réactif pour l’ARN végétal | Mini kit d’ARN PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Kit d’isolement d’ARN total MagMAX-96 | |
| Meilleure vente | ✓ | |||
| Types d’ARN isolés | grandes molécules d’ARN uniquement | grandes molécules d’ARN uniquement | Petites et grandes molécules d’ARN | grandes molécules d’ARN uniquement |
| Temps de préparation | 60 minutes | <20 minutes | 30 minutes | <45 minutes |
| Quantité de matériau de départ | 1 g max. | <250 mg | 0,5 à 250 mg | 10 mg max. |
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | |||
| Produits compatibles | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants |
Éliminer les polysaccharides
L’un des principaux problèmes liés à l’isolement de l’ARN végétal est la présence de biomolécules problématiques, comme des composés polyphénoliques et des polysaccharides. L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion minimise un grand nombre de ces contaminants grâce à l’ajout de polyvinylpyrrolidone, un polymère de poids moléculaire élevé qui se lie aux polyphénoliques et polysaccharides et à une étape de centrifugation avant extraction.
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la préservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries d’animaux intacts. Elle réduit la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide en vue d’un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’extraction d’ARN de tissus vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Méthode de référence pour un ARN intact et ultra-pur | Méthode simple, fiable et rapide | Format de plateau de filtre rapide et pratique, basé sur colonne, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique basée sur colonne à partir d’une entrée d’échantillon limitée (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique pour les petites espèces d’ARN | Purification TRIzol + par colonne de la plus haute pureté, aucune précipitation requise | Format HTP, capable de récupérer l’ARN de toutes tailles (y compris les microARN) | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Réactif TRIzol | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’ARN micro-échelle PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Système de purification d’ARN TRIzol Plus | Isolement d’ARN total MagMAX mirVana | |
| Meilleure vente | ✓ | ||||||
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonne de silice rapide et pratique dans un format de plaque de filtration | Colonnes de silice rapides et pratiques | Extraction organique combinée à des colonnes de silice pratiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 20 minutes | 30 minutes | 1 heure | <1 heure |
| Quantité de matériau de départ | 100 mg max. | 10 mg à 100 mg | 10 cellules à 10 mg | 10 mg max. | 250 mg max. de tissus | 100 mg max. | 50 mg max. |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | |||||
| Taille de la préparation | 100 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 50 préparations | 96 préparations |
Rendements d’ARN à partir de tissus d’animaux
La teneur en ARN peut varier considérablement entre les tissus, les types de cellules, les états physiologiques, etc. Ce tableau fournit des consignes générales pour l’estimation des rendements d’ARN à partir d’une grande variété de cellules et de tissus.
Tableau 1. L’ARN total type produit 1 mg de tissus différents.
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la conservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries animaux intacts. Elle élimine la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide pour un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’isolement d’ARN végétal vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Rapide et entièrement automatisé | Rapide et simple d’utilisation | Conçu pour les parois de cellules de levure rigides tout en conservant les profils d’expression | Format de plaque de filtration basé sur colonne rapide et pratique, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | |
|---|---|---|---|---|
| Platinum Taq MagMAX pour kit d’isolement d’ARN total sur biopuces | Mini kit d’ARN PureLink | Kit RiboPure Yeast | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | |
| Meilleure vente | ✓ | |||
| Comprend des microbilles spécialisées pour la lyse cellulaire | Non | Non | Microbilles de zirconium | Non |
| Méthode d’isolement | Format évolutif et flexible pour une pureté optimale ; comprend extraction organique et microbilles magnétiques | Colonne de silice rapide et pratique | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice | Colonne de silice rapide et pratique au format de plaque de filtration à 96 puits |
| Temps de préparation | <1 heure | 20 minutes | 90 minutes (comprend le traitement par DNase) | 20 minutes |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 5 x 106 cellules | Jusqu’à 5 x 108 cellules | Jusqu’à 3 x 108 cellules | 1,8 ml de cellules de levure fraîches en phase log (OD660 = 0,6-0,8) |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | |||
| Taille du kit | 96 préparations | 50 préparations | 50 préparations | 96 préparations |
Ressources techniques
Contrairement aux cellules eucaryotes, la levure et de nombreuses souches bactériennes sont protégées par des parois cellulaires qui peuvent être difficiles à rompre. Dans un premier temps, une lyse cellulaire efficace (généralement via une perturbation mécanique ou un prétraitement enzymatique) est nécessaire avant toute procédure d’isolement de l’ARN.
Une gamme de produits développés par les experts en ARN Ambion vous aidera à isoler les rendements élevés d’ARN pur et intact à partir de bactéries et de levures.
Quel kit d’isolement d’ARN bactérien vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Aucune procédure de lyse | Rapide et facile, 20 min | Format de plaque de filtration basé sur colonne rapide et pratique | HTP, 45 min | Idéal pour les bactéries à Gram positif difficiles à lyser | |
|---|---|---|---|---|---|
| Kit d’isolement d’ARN bactérien TRIzol Max avec réactif d’amélioration bactériologique TRIzol & Max | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’isolement d’acide nucléique total MagMAX | Kit RiboPure-Bacteria | |
| Meilleure vente | ✓ | ||||
| Comprend des microbilles spécialisées pour la lyse cellulaire | Non | Non | Non | Microbilles de zirconium | Microbilles de zirconium |
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonne de silice rapide et pratique au format de plaque de filtration à 96 puits | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 45 minutes | 1 heure |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 1 x 108 cellules | Jusqu’à 1 x 109 cellules | Jusqu’à 1 x 109 cellules | Jusqu’à 0,3 g d’échantillons solides ou 175 µl d’échantillons liquides | Jusqu’à 109 cellules |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | |||
| Taille du kit | 100 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 100 préparations | 50 préparations |
Ressources techniques
L’analyse virale d’échantillons biologiques (animaux, insectes, plantes, champignons, bactériens) et environnementaux (eau, air, aliments) est de plus en plus effectuée à l’aide de stratégies de test moléculaire qui exigent un ARN viral ou un ADN des échantillons testés. La purification de l’ARN viral pose des défis uniques pour obtenir une récupération et une sensibilité de détection adéquates. Les experts en ARN Ambion ont développé des produits de purification d’ARN optimisés pour offrir un rendement, une pureté et une intégrité d’ARN viral maximum à partir d’une vaste gamme de types d’échantillons dans plusieurs formats.
“L’ARN viral très concentré du mini-kit d’ARN/ADN viral PureLink constitue un outil pour l’analyse en aval plus sensible et délicate des génomes viraux”
Dongning Wang, PhD, au laboratoire de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Duke University
Caractéristiques du produit
| Application en aval la mieux adaptée | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Produit | Format | RT-PCR en temps réel | Analyse par biopuces | Séquençage | Transfert Northern | Clonage |
ARN total | ||||||
| Mini kit d’ARN/ADN viral PureLink | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ✓ | |||
| Kit RNAqueous | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX AI⁄ND | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques | ✓ | ✓ | |||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 AI⁄ND | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
ADN/ARN | ||||||
| Kit de purification d’ADN/ARN viral PureLink Pro 96 | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’acide nucléique total MagMAX | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
| Acides nucléiques viraux Dynabeads SILANE | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques, compatible avec l’automatisation | |||||
| Kit iPrep PureLink Virus | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 (5 x 96 rxns) | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
MicroARN | ||||||
| Kits d’isolement de miARN mirVana | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ||||
| Kit d’isolement de miARN mirVana (sans phénol - achat séparément requis) | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ||||
| Réactif TRIzol LS | Lyse en réactif TRIzol, réactif en une étape | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |
ARNm | ||||||
| Kit Dynabeads mARN DIRECT | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques | ✓ | ✓ | |||
| Micro kit Dynabeads mARN DIRECT | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques | ✓ | ✓ | |||
Resources
Nucleic Acid Purification and Analysis Support Center
Find tips, troubleshooting help, and resources for your nucleic acid purification & analysis applications.
SARS-CoV-2 testing
- Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
- DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
- Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
- Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products
Quel kit d’extraction d’ARN d’un échantillon sanguin vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Optimisé pour les échantillons liquides | Kit spécialisé de déplétion d’érythrocytes non nucléés | Format de plaque de filtration à 96 colonnes, pour les besoins de HTP | HTP optimisé pour la purification à partir d’échantillons sanguins stabilisés | Format HTP, capable de récupérer l’ARN de toutes tailles (y compris les microARN) | Rendement d’ARN élevé directement à partir du sang total, pas besoin d’isoler les WBC | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRIzol LS | Kit de sang d’ARN total PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | MagMAX pour kit d’isolement d’ARN de tubes de prélèvement sanguin stabilisés | Isolement d’ARN total MagMAX mirVana | Kit RiboPure Blood | |
| Meilleure vente | ✓ | |||||
| Réactifs de stabilisation compatibles | EDTA, héparine, citrate, ARNlater | EDTA, héparine, citrate | EDTA, héparine, citrate | Tubes Tempus ou PaxGene | EDTA ou citrate | EDTA, héparine, citrate, ARNlater |
| Réactif de stabilisation inclus | ✓ RNAlater | |||||
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonnes de silice rapides et pratiques dans un format de plaque | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend une extraction organique et une colonne de silice (aucune précipitation requise) |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 12 tubes en 2 heures | 96 échantillons en <1 heure | 30 minutes | |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | ✓ |
Pour de plus amples informations sur la manipulation de sang, consultez nos articles techniques :
Protocoles complémentaires
- Protocole de fractionnement sanguin pour le prélèvement de globules blancs
- Isolement de petits ARN à l’aide du kit RiboPure Blood
Conseils relatifs à la paillasse
Articles TechNotes
- Conseils et astuces pour manipuler des échantillons sanguins
- Extraction du microARN des échantillons sanguins - TechNotes 13(1)
- Récupération d’ARN à haut débit à partir d’échantillons de mammifères, de plantes et de virus - TechNotes 13(1)
- Amélioration de l’isolement d’ARN pour l’analyse d’échantillons et bien plus - TechNotes 10(3)
- Amélioration du profilage d’expression génétique avec les échantillons sanguins de souris - TechNotes 13(4)
- Méthodes améliorées pour le profilage d’expression génétique à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 13(3)
- Amélioration de la sensibilité des biopuces grâce aux échantillons d’ARN de sang total - TechNotes 12(3)
- Isolement de l’ARN des globules blancs capturés par un nouveau système de filtration - TechNotes 12(4)
- Isolement de l’ARN à faible et haut débit à partir d’échantillons de tissus exempts de cellules et de sang - TechNotes 13(2)
- Expression de miARN dans les globules blancs - TechNotes 11(3)
- Obtention de l’ARN de la plus haute qualité à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 16(1)
- Purification d’ARN directement à partir de sang total - TechNotes 11(4)
- Quantification de miARN à partir de quelques gouttes de sang de souris - TechNotes 14(4)
- Gros plan sur la recherche : Données de biopuces supérieures à partir des échantillons sanguins - TechNotes 14(4)
- Extraction d’ARN à partir du sang : Choisir le meilleur système pour vos études d’expression génétique - TechNotes 14(2)
- ARN de sang total de souris pour le profilage d’expression - TechNotes 13(3)
- Isolement d’ARN robuste à haut débit à partir d’échantillons sanguins - TechNotes 12(3)
- Profilage d’expression génétique supérieur avec des échantillons de sang total humain - TechNotes 14(3)
- ARN total de sang total pour le profilage d’expression - TechNotes 12(2)
La purification de l’ARN à partir de cellules en culture a toujours été une procédure très répétitive, chronophage et exigeante en main d’œuvre, impliquant souvent l’utilisation de produits chimiques organiques toxiques. Les produits développés par nos experts en ARN vous permettent d’isoler l’ARN d’un rendement, d’une pureté et d’une intégrité maximum à l’aide de plusieurs formats technologiques (extraction organique, colonnes en fibre de verre, billes magnétiques et combinaisons de ces formats).
Vous pouvez également analyser des lysats cellulaires cultivés sans isoler au préalable l’ARN. En un temps considérablement réduit, vous obtiendrez des résultats de qPCR équivalents ou supérieurs à ceux de l’ARN purifié. Les produits Invitrogen comme les gammes de produits Cells-to-CT et Single Cell-to-CT offrent des performances et des avantages exceptionnels en termes de manipulation.
Quel kit d’isolement d’ARN des cellules en culture vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| ARN intact ultra-pur | Format de colonne rapide et pratique pour l’ARN (>200 nt) | Format de plateau de filtre rapide et pratique, basé sur colonne, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique basée sur colonne à partir d’une entrée d’échantillon limitée (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique pour les petites espèces d’ARN | Système complet pour cellules à qRT-PCR sans purification d’ARN | |
| Réactif TRIzol | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’ARN micro-échelle PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Kits Cells-to-CT | |
| Meilleure vente | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 20 minutes | 30 minutes | <10 minutes |
| Méthode de lyse cellulaire | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Lyse à l’isothiocyanate de guanidine non-toxique | Extraction organique suivie d’une précipitation à l’alcool | Lyse Cells-to-CT |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 1 x 107 cellules | 5 x 106 à 1 x 108 cellules | 5 x 106 à 1 x 108 cellules | Jusqu’à 5 x 105 cellules | 102 à 107 cellules de culture | 10 à 100 000 cellules |
| Application | Toutes les méthodes d’expression d’ARN | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | qRT-PCR, NGS | Analyse de microARN | qRT-PCR |
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la conservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries animaux intacts. Elle élimine la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide pour un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’extraction d’ARN des échantillons FFPE vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Isolement à faible débit d’ARN et d’ADN à partir de la même coupe FFPE | Isolement évolutif de l’ARN et de l’ADN à partir de la même coupe FFPE | |
|---|---|---|
| Kit d’isolement d’acide nucléique total RecoverAll pour FFPE | Kit ADN/ARN FFPE Ultra MagMAX | |
| Temps de préparation | 4,5 heures (temps total pour 16 échantillons) 2,5 heures de main-d’œuvre | 4 heures (temps total pour 96 préparations) 1 heure de main-d’œuvre |
| Produit fini extrait | ARN total, microARN, ADNg | ARN total, microARN, ADNg |
| Méthode d’isolement | purification de colonne | purification de billes mag. |
| Déparaffinage requis | ✓ | ✓ |
| Compatible avec l’automatisation (post-déparaffinage) | ✓ (scripts pour KF Flex et Duo Prime) | |
| Plage d’échantillons FFPE compatible | coupes jusqu’à 4 x 20 microns (tissu de 300 mm2) | coupes jusqu’à 2 x 20 microns (tissu de 300 mm2) |
| Volume de l’échantillon | ADN purifié de ~50 µl ARN purifié de ~50 µl | ADN purifié de ~50 ul ARN purifié de ~50 µl |
| Compatible avec les panels d’ADN Ion AmpliSeq (par ex. panel Cancer Hotspot v2) | ✓ | ✓ |
| Compatible avec les panels d’ADN Ion AmpliSeq (par ex. cancer ARN et fusion ARN) | ✓ | ✓ |
Pourquoi l’isolement d’ARN d’échantillons FFPE est-il si difficile ?
La récupération d’ARN de qualité à partir d’échantillons FFPE peut être une tâche difficile. Le processus de fixation entraîne une réticulation entre les acides nucléiques et les protéines, et modifie de manière covalente l’ARN en ajoutant des groupes monométhyliques aux bases. Ainsi, les molécules sont rigides et sensibles au cisaillement mécanique, et les réticules peuvent compromettre l’utilisation de l’ARN comme substrat pour la transcription inverse. Par conséquent, pour utiliser les tissus FFPE comme source pour l’analyse de l’expression génétique, une méthode fiable est nécessaire pour l’extraction de l’ARN de la matrice réticulée.
Comment pouvez-vous améliorer vos chances de réussite avec des tissus FFPE ?
Plusieurs facteurs peuvent avoir un impact sur la qualité globale et le rendement de l’ARN isolé des tissus FFPE. Voici quelques recommandations pour répondre à plusieurs facteurs clés :
- Approvisionnement de tissus en amont et préparation des échantillons de tissus : si possible, les tissus doivent être fixés dans l’heure suivant la résection chirurgicale. Une importante dégradation de l’ARN peut se produire avant la fin du processus de fixation. Le temps de fixation optimal est de 12 à 24 heures, avec du formol neutre tamponné ou du paraformaldéhyde. Les tissus fixés doivent être minutieusement déshydratés avant le processus d’enrobage.
- Stockage de bloc : le stockage de blocs sans faces coupées, dans la mesure du possible, empêche les dommages continus dus à l’exposition à l’oxygène atmosphérique, à l’eau et à d’autres facteurs environnementaux comme la lumière et l’infestation (champignons, insectes, etc.).
- Type, taille et quantité de tissu utilisés pour l’isolement d’ARN : l’épaisseur de tissu recommandée est de 10-20 µm. Le nombre de coupes utilisées est déterminé par le type de tissu (qui a un impact sur la densité cellulaire) et la surface (taille recommandée : 50 à 300 mm2). Un excès de matériau de départ peut provoquer une obstruction du filtre, ce qui entraîne un rendement médiocre.
- Quantité excessive de paraffine utilisée pour l’enrobage des tissus : chaque fois que possible, l’excès de paraffine doit être coupé avant d’initier le protocole de purification. Pour les méthodes de purification à base de xylène, deux traitements au xylène à température ambiante doivent être suffisants pour un déparaffinage complet. Si vous le souhaitez, un traitement plus rigoureux de 37 à 55°C peut être effectué pendant 30 minutes maximum. Après le déparaffinage du xylène, il est essentiel d’éliminer complètement l’éthanol à 100 % et de sécher les pastilles après les deux lavages à l’éthanol à 100 %. La méthode à microbilles magnétiques utilise de nouveaux produits chimiques pour traiter la paraffine qui limite l’entrée à des coupes de 20 µm.
Les kits ADN/ARN FFPE Ultra MagMAX sont conçus pour un isolement rapide, efficace et automatique de l’ARN total et de l’ADN des échantillons FFPE à l’aide de particules magnétiques Invitrogen MagMAX. Les kits Invitrogen MagMAX FFPE NA offrent des flux de travaux plus rapides et utilisent des réactifs moins toxiques, sans sacrifier la qualité du processus. Ces kits permettent d’obtenir un rendement et une pureté d’acide nucléique comparables à ceux du système à filtre RecoverAll le plus performant de sa catégorie. Les kits MagMAX FFPE NA surpassent les produits dotés de protocoles similaires et permettent d’obtenir des rendements d’ARN et d’ADN comparables à ceux des protocoles plus longs, plus dangereux et à faible débit.
La procédure du kit d’isolement de l’acide nucléique total RecoverAll exige un délai de manipulation d’environ 45 minutes et peut généralement être réalisée en moins d’un jour pour l’isolement de l’ARN. Les échantillons FFPE sont déparaffinés à l’aide d’une série de lavages au xylène et à l’éthanol. Ils sont ensuite soumis à une digestion rigoureuse de la protéase avec une durée d’incubation adaptée à la récupération de l’ARN ou de l’ADN. Les acides nucléiques sont purifiés à l’aide d’une méthodologie rapide de filtre en verre qui inclut un traitement de nucléase sur filtre et sont élués dans l’eau ou le tampon à faible teneur en sel fourni.
Ressources techniques
Articles TechNotes
- Extraction d’acides nucléiques d’échantillons FFPE
- Quantification précise et sensible des microARN à partir de tissus FFPE - TechNotes 16(1) : Cette étude décrit l’isolement et la mesure précise de l’expression des miARN à partir d’échantillons au formol ou fixés au formol et enrobés en paraffine (FFPE).
- Isolement plus rapide des acides nucléiques des tissus FFPE - TechNotes 16(1) : Applied Biosystems a amélioré le protocole inhérent au kit d’isolement d’acide nucléique total Ambion RecoverAll pour les tissus FFPE, engendrant ainsi une réduction considérable du temps de traitement.
- Analyse optimisée de l’expression génétique à partir d’échantillons FFPE - TechNotes 14(3) : Le protocole optimisé qui est présenté ici peut être utilisé pour quantifier de manière fiable les niveaux d’expression d’ARNm en utilisant l’ARN isolé des échantillons FFPE et la RT-PCR en temps réel.
- Récupération des rendements élevés d’acide nucléique total à partir de tissus fixés au formol et enrobés de paraffine (FFPE) - TechNotes 12(3) : Le nouveau kit RecoverAll d’Ambion permet aux chercheurs d’isoler l’ADN et/ou l’ARN (y compris le microARN) des échantillons FFPE. Les acides nucléiques récupérés sont idéaux pour diverses applications en aval telles que l’analyse par biopuces, la qRT-PCR et l’analyse des mutations.
- Analyse de microARN à partir de l’ARN extrait d’échantillons fixés au formol et enrobés de paraffine (FFPE) et fraîchement congelés
- Corrélation élevée des données de quantification des miARN à partir de tissus FFPE appariés et congelés instantanément à l’aide des dosages de microARN TaqMan
- Génotypage de l’ADN à partir d’échantillons FFPE humains - Fiable et reproductible : Note d’application
- Extraction et quantification optimisées de l’ARN à partir d’échantillons FFPE pour les analyses de l’expression génétique
- Protocole : Préparation de la bibliothèque d’ARN FFPE pour le séquençage SOLiD
- Kit d’isolement d’acide nucléique total RecoverAll™
Conseils relatifs à la paillasse
Vos données
- Identification des signatures d’ARNm liées au cancer dans les échantillons patient FFPE : Le laboratoire Yeatman du H. Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute (Tampa, FL) étudie les signatures d’expression génétique qui définissent les cancers du côlon, du sein et autres.
- Effets de la coloration LCM sur la RT-PCR en temps réel : Une étude est décrite pour démontrer que le kit de coloration LCM Ambion peut être utilisé avec succès sur les tissus fixés au formol et enrobés en paraffine (FFPE) sans compromettre le rendement ou la qualité de l’ARN extrait.
Note d’application
Bulletin de produits
Quel kit d’isolement d’ARN végétal vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Parfait pour les échantillons difficiles (tissus et graines de conifères) | Rapide et simple d’utilisation | Rétablissement efficace aux valeurs de consigne des micro-ARN et petits ARN | Rapide et entièrement automatisé | |
|---|---|---|---|---|
| Réactif pour l’ARN végétal | Mini kit d’ARN PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Kit d’isolement d’ARN total MagMAX-96 | |
| Meilleure vente | ✓ | |||
| Types d’ARN isolés | grandes molécules d’ARN uniquement | grandes molécules d’ARN uniquement | Petites et grandes molécules d’ARN | grandes molécules d’ARN uniquement |
| Temps de préparation | 60 minutes | <20 minutes | 30 minutes | <45 minutes |
| Quantité de matériau de départ | 1 g max. | <250 mg | 0,5 à 250 mg | 10 mg max. |
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | |||
| Produits compatibles | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants | L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion supprime les contaminants végétaux courants |
Éliminer les polysaccharides
L’un des principaux problèmes liés à l’isolement de l’ARN végétal est la présence de biomolécules problématiques, comme des composés polyphénoliques et des polysaccharides. L’aide à l’isolement de l’ARN végétal Ambion minimise un grand nombre de ces contaminants grâce à l’ajout de polyvinylpyrrolidone, un polymère de poids moléculaire élevé qui se lie aux polyphénoliques et polysaccharides et à une étape de centrifugation avant extraction.
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la préservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries d’animaux intacts. Elle réduit la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide en vue d’un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’extraction d’ARN de tissus vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Méthode de référence pour un ARN intact et ultra-pur | Méthode simple, fiable et rapide | Format de plateau de filtre rapide et pratique, basé sur colonne, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique basée sur colonne à partir d’une entrée d’échantillon limitée (ARN >200 nt) | Méthode rapide et pratique pour les petites espèces d’ARN | Purification TRIzol + par colonne de la plus haute pureté, aucune précipitation requise | Format HTP, capable de récupérer l’ARN de toutes tailles (y compris les microARN) | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Réactif TRIzol | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’ARN micro-échelle PureLink | Kits d’isolement de miARN mirVana | Système de purification d’ARN TRIzol Plus | Isolement d’ARN total MagMAX mirVana | |
| Meilleure vente | ✓ | ||||||
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonne de silice rapide et pratique dans un format de plaque de filtration | Colonnes de silice rapides et pratiques | Extraction organique combinée à des colonnes de silice pratiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 20 minutes | 30 minutes | 1 heure | <1 heure |
| Quantité de matériau de départ | 100 mg max. | 10 mg à 100 mg | 10 cellules à 10 mg | 10 mg max. | 250 mg max. de tissus | 100 mg max. | 50 mg max. |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | |||||
| Taille de la préparation | 100 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 50 préparations | 96 préparations |
Rendements d’ARN à partir de tissus d’animaux
La teneur en ARN peut varier considérablement entre les tissus, les types de cellules, les états physiologiques, etc. Ce tableau fournit des consignes générales pour l’estimation des rendements d’ARN à partir d’une grande variété de cellules et de tissus.
Tableau 1. L’ARN total type produit 1 mg de tissus différents.
Préserver et stabiliser votre ARN
La solution RNAlater est largement utilisée pour la conservation de l’ARN dans les tissus, organes, cellules et bactéries animaux intacts. Elle élimine la nécessité de traiter immédiatement les échantillons pour l’isolement de l’ARN ou de les congeler dans de l’azote liquide pour un traitement ultérieur.
Ressources techniques
Quel kit d’isolement d’ARN végétal vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Rapide et entièrement automatisé | Rapide et simple d’utilisation | Conçu pour les parois de cellules de levure rigides tout en conservant les profils d’expression | Format de plaque de filtration basé sur colonne rapide et pratique, pour 96 échantillons (ARN >200 nt) | |
|---|---|---|---|---|
| Platinum Taq MagMAX pour kit d’isolement d’ARN total sur biopuces | Mini kit d’ARN PureLink | Kit RiboPure Yeast | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | |
| Meilleure vente | ✓ | |||
| Comprend des microbilles spécialisées pour la lyse cellulaire | Non | Non | Microbilles de zirconium | Non |
| Méthode d’isolement | Format évolutif et flexible pour une pureté optimale ; comprend extraction organique et microbilles magnétiques | Colonne de silice rapide et pratique | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice | Colonne de silice rapide et pratique au format de plaque de filtration à 96 puits |
| Temps de préparation | <1 heure | 20 minutes | 90 minutes (comprend le traitement par DNase) | 20 minutes |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 5 x 106 cellules | Jusqu’à 5 x 108 cellules | Jusqu’à 3 x 108 cellules | 1,8 ml de cellules de levure fraîches en phase log (OD660 = 0,6-0,8) |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | |||
| Taille du kit | 96 préparations | 50 préparations | 50 préparations | 96 préparations |
Ressources techniques
Contrairement aux cellules eucaryotes, la levure et de nombreuses souches bactériennes sont protégées par des parois cellulaires qui peuvent être difficiles à rompre. Dans un premier temps, une lyse cellulaire efficace (généralement via une perturbation mécanique ou un prétraitement enzymatique) est nécessaire avant toute procédure d’isolement de l’ARN.
Une gamme de produits développés par les experts en ARN Ambion vous aidera à isoler les rendements élevés d’ARN pur et intact à partir de bactéries et de levures.
Quel kit d’isolement d’ARN bactérien vous convient le mieux ?
| Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | Commander maintenant | |
| Aucune procédure de lyse | Rapide et facile, 20 min | Format de plaque de filtration basé sur colonne rapide et pratique | HTP, 45 min | Idéal pour les bactéries à Gram positif difficiles à lyser | |
|---|---|---|---|---|---|
| Kit d’isolement d’ARN bactérien TRIzol Max avec réactif d’amélioration bactériologique TRIzol & Max | Mini kit d’ARN PureLink | Kit de purification d’ARN total PureLink Pro 96 | Kit d’isolement d’acide nucléique total MagMAX | Kit RiboPure-Bacteria | |
| Meilleure vente | ✓ | ||||
| Comprend des microbilles spécialisées pour la lyse cellulaire | Non | Non | Non | Microbilles de zirconium | Microbilles de zirconium |
| Méthode d’isolement | Extraction organique de haute pureté (requiert une précipitation alcoolique) | Colonne de silice rapide et pratique | Colonne de silice rapide et pratique au format de plaque de filtration à 96 puits | Format évolutif et flexible grâce aux microbilles magnétiques | Plus grande pureté et facilité d’utilisation ; comprend extraction organique et colonne de silice (aucune précipitation requise) |
| Temps de préparation | 1 heure | 20 minutes | 20 minutes | 45 minutes | 1 heure |
| Quantité de matériau de départ | Jusqu’à 1 x 108 cellules | Jusqu’à 1 x 109 cellules | Jusqu’à 1 x 109 cellules | Jusqu’à 0,3 g d’échantillons solides ou 175 µl d’échantillons liquides | Jusqu’à 109 cellules |
| Compatible avec des cadences élevées | ✓ | ✓ | |||
| Taille du kit | 100 préparations | 50 préparations | 96 préparations | 100 préparations | 50 préparations |
Ressources techniques
L’analyse virale d’échantillons biologiques (animaux, insectes, plantes, champignons, bactériens) et environnementaux (eau, air, aliments) est de plus en plus effectuée à l’aide de stratégies de test moléculaire qui exigent un ARN viral ou un ADN des échantillons testés. La purification de l’ARN viral pose des défis uniques pour obtenir une récupération et une sensibilité de détection adéquates. Les experts en ARN Ambion ont développé des produits de purification d’ARN optimisés pour offrir un rendement, une pureté et une intégrité d’ARN viral maximum à partir d’une vaste gamme de types d’échantillons dans plusieurs formats.
“L’ARN viral très concentré du mini-kit d’ARN/ADN viral PureLink constitue un outil pour l’analyse en aval plus sensible et délicate des génomes viraux”
Dongning Wang, PhD, au laboratoire de Feng Gao, MD, Duke Human Vaccine Institute, Duke University
Caractéristiques du produit
| Application en aval la mieux adaptée | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Produit | Format | RT-PCR en temps réel | Analyse par biopuces | Séquençage | Transfert Northern | Clonage |
ARN total | ||||||
| Mini kit d’ARN/ADN viral PureLink | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ✓ | |||
| Kit RNAqueous | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX AI⁄ND | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques | ✓ | ✓ | |||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 AI⁄ND | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
ADN/ARN | ||||||
| Kit de purification d’ADN/ARN viral PureLink Pro 96 | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’acide nucléique total MagMAX | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ✓ | |||
| Acides nucléiques viraux Dynabeads SILANE | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques, compatible avec l’automatisation | |||||
| Kit iPrep PureLink Virus | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques | ✓ | ||||
| Kit d’isolement d’ARN viral MagMAX-96 (5 x 96 rxns) | Lyse à base de sel chaotropique, particules magnétiques, traitement dans 96 puits, compatible avec l’automatisation | ✓ | ||||
MicroARN | ||||||
| Kits d’isolement de miARN mirVana | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ||||
| Kit d’isolement de miARN mirVana (sans phénol - achat séparément requis) | Lyse à base de sel chaotropique, filtre à base de silice | ✓ | ||||
| Réactif TRIzol LS | Lyse en réactif TRIzol, réactif en une étape | ✓ | ✓ | ✓ | ✓ | |
ARNm | ||||||
| Kit Dynabeads mARN DIRECT | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques | ✓ | ✓ | |||
| Micro kit Dynabeads mARN DIRECT | Lyse à base de sel chaotropique, microbilles magnétiques | ✓ | ✓ | |||
Resources
Nucleic Acid Purification and Analysis Support Center
Find tips, troubleshooting help, and resources for your nucleic acid purification & analysis applications.
SARS-CoV-2 testing
- Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
- DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
- Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
- Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products
Protégez votre ARN et conservez-le en sécurité
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