human neural stem cells

即用型人神经干细胞 (hNSC) 具有优良的增殖和多能分化潜能。 源自NIH认可的H9 (WA09) 人胚胎干细胞 (hESC),每管GIBCO® hNSC细胞含有超过1 × 106个活细胞。

  • 具有正常人类染色体核型,具有恒定的高纯度
  • 采用经验证的实验方案,可分化为神经元细胞、少突胶质细胞和星形胶质细胞
  • 使用StemPro® NSC SFM培养基贴壁培养时,具有稳定的增殖能力

Gibco®人神经干细胞试剂盒的组分

  1. 人神经干细胞 (>1 x 106个细胞)
  2. StemPro® NSC SFM培养基 (KnockOut™ DMEM/F-12、StemPro® NSC SFM添加剂、重组碱性FGF蛋白和重组EGF蛋白)

细胞贴壁培养时的扩增能力

StemPro® NSC SFM培养基使人NSC细胞在进行贴壁培养时,扩增良好 (图1)。

GIBCO®为下列培养条件提供详细实验方案:
贴壁培养方案

human neural stem cells

图1.
相差显微镜 (10倍) 拍摄复苏后在StemPro® NSC SFM培养基中培养的GIBCO® hNSC细胞第1天 (图中A部分) 和第3天 (图中B部分) 的照片。

超过80%的人NSC细胞保持未分化的表型

StemPro® NSC SFM完全培养基中的碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 可维持GIBCO® hNSC细胞的非分化状态。 Human NSCs cultured in StemPro® NSC SFM stain positive for the neural stem cell-type specific markers nestin and SOX2, and the proliferation marker Ki67 (>80%) (Figure 2).

human neural stem cells   图 2. StemPro® NSC SFM培养基中培养的GIBCO® hNSC在P3通道的荧光图片 (20X),并对NSC表型标志物巢蛋白 (绿色) 和增殖标识物Ki67 (红色) 进行了染色。 细胞核用DAPI (蓝色荧光) 复染。 大约90%的未分化NSC标志物巢蛋白和增殖标志物Ki67染色结果为阳性。 无Oct4染色阳性说明培养物中没有残余的hESC细胞。

人NSC细胞的分化潜能

一旦撤除培养基中的bFGF和EGF,GIBCO® hNSC细胞可自发分化为神经元细胞、少突胶质细胞或星形胶质细胞。 此外,在选择分化培养基中可向特定的细胞谱系分化 (图3)。
参见人NSC细胞的自发分化实验方案

human neural stem cells

图3.
StemPro® NSC SFM培养基中培养的GIBCO® hNSC细胞荧光图片 (20倍),显示经过3次传代后,可分化为神经元细胞、少突胶质细胞或星形胶质细胞。 一旦进入定向分化,细胞即开始失去非分化NSC细胞标志物巢蛋白的表达,而分化细胞标志物Dcx、GalC和GFAP表达都是阳性。 在定向分化前,对非分化NSC细胞标志物巢蛋白 (红色) 和SOX2 (绿色) 进行染色 (图中A部分)。 然后细胞分别分化为神经元细胞和星形胶质细胞,分别对神经元细胞标志物Dcx (绿色) (图中B部分)、少突胶质细胞标志物GalC (红色) (图中C部分) 或者星形胶质细胞标志物GFAP (绿色) (图中D部分) 进行染色。 图中B到D部分的细胞核用DAPI (蓝色) 进行复染。