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General

预制克隆是以甘油菌形式于-80度的条件下运输。我们建议您收货后尽快制备一份新鲜的克隆甘油菌。以下是一些额外的建议:

  • 确定培养预制克隆时所采用的抗生素是否正确。
    • 通过查看载体图谱以确定克隆所携带的抗性基因
    • 检查预制克隆甘油菌的管盖颜色,并通过下面信息确定该克隆应使用哪种抗生素:
      • 黄色盖子:Zeocin
      • 紫色盖子:氯霉素
      • 红色盖子:羧苄青霉素或氨苄青霉素
      • 绿色盖子:卡那霉素

序列信息有误可能由以下原因造成:

  • 数据库信息错误 – GenBank里的cDNA克隆有大约12.5%的错误率,这表明GenBank数据库的序列与您获得的预制克隆序列可能不完全匹配。
  • 生产实验室挑克隆有误 - 这些预制克隆储存在96孔板中(BACs一般保存于384孔板中),因此在挑克隆的过程中可能会出现人为失误。如果是这种情况,更换一次可能会有帮助。Ultimate™ ORF预制克隆不是储存在孔板上而是储存在单独的管中,因此出现这种可能的几率很小。
  • 板内预制克隆交叉污染 - 与第二条原因相似,这些孔间可能会产生交叉污染。因此,我们始终建议对任何特定培养物都进行多个克隆分析。

注意:除了Ultimate™ORF克隆,其它预制克隆并不能保证与GenBank序列完全匹配,并且由于等位突变及异构突变,可能存在一个或多个碱基的差异。

  • 我们过去可能有这个克隆,但是因为它不能正常生长,可能已经从预制克隆库中删除了。
  • 如果这是一个最近构建的新克隆,我们可能需要一些时间来储存它。我们只提供6个月到1年前进入到NCBI数据库中的克隆。
  • 请查看ATTC( www.attc.org )或Open Biosystems (www.openbiosystems.com)是否有此克隆。

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