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12337016
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AccuPrime™ GC-reiche DNA-Polymerase wurde entwickelt, um eine hochergiebige, hochspezifische Amplifikation schwer zu amplifizierender Templates, wie z. B. solche mit > 65 % GC-Gehalt, zu ermöglichen. Das Kit bietet eine Auswahl an Puffern für die Amplifikation genomischer DNA-Ziele (Puffer A) oder nicht-GC-reicher cDNA, Plasmid und Lambda-basierter Ziele (Puffer B). Vorteile der AccuPrime™ GC-reichen DNA-Polymerase:
• Ausbeute – hohe Ausbeute für Ziele bis zu 5 kb Länge • Spezifität – AccuPrime™ akzessorische Proteine für verbesserte PCR-Spezifität • Empfindlichkeit – Empfindlichkeit bis zu 5 ng der Template-DNA
Robuste und spezifische Amplifikationen Die AccuPrime™ Puffer enthalten thermostabile Proteine, die die Primer-Template-Hybridisierung während der PCR verbessern und so die Spezifität der Reaktion erhöhen. Die Polymerase selbst stammt vom Archaebakterium Pyrolobus fumarius und weist eine 5 Mal höhere Prozessivität als Taq DNA-Polymerase auf. Sie bleibt auch nach 4 Stunden bei 95 °C aktiv.
Definition einer Einheit Eine Einheit der AccuPrime™ GC-reichen DNA-Polymerase ist die Enzymmenge, die benötigt wird, um in 30 Minuten bei 74 °C 10 nmol dNTPs in säureunlösliches Material einzubinden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für die Diagnostik bestimmt.
Specifications
Wiedergabetreue (vs. Taq)2X
Hot-StartIntegrierter Heißstart
Anzahl Reaktionen200 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymeraseAccuPrime GC-reiche DNA-Polymerase
Menge200 Reaktionen
ReaktionsformatSeparate Komponenten
VersandbedingungNass- oder Trockeneis
Größe (Endprodukt)5 kb oder weniger
Volumen100 μl
Zur Verwendung mit (Anwendung)Heißstart-PCR
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitStandard
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 1x 100 μl AccuPrime GC-reiche DNA-Polymerase (2 E/µl) • 1x 1 ml 5X AccuPrime GC-reicher Puffer A • 1x 1 ml 5X AccuPrime GC-reicher Puffer B • 1x 1 ml 50 mM MgSO4
Lagerung bei -20 °C.
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
My oligonucleotide does not appear to be the right length when I checked by gel electrophoresis. Why is this?
Oligos should be run on a polyacrylamide gel containing 7 M urea and loaded with a 50% formamide solution to avoid compressions and secondary structures. Oligos of the same length and different compositions can electrophorese differently. dC's migrate fastest, followed by dA's, dT's, and then dG's. Oligos containing N's tend to run as a blurry band and generally have a problem with secondary structure.
The primers I am using worked for PCR initially, but over time, have stopped working. What happened?
Primers should be aliquoted for single use before PCR set-up. Heat just the aliquoted primers to 94 degrees for 1 min. Quick chill the primer on ice before adding to the PCR reaction. Some primers may anneal to themselves or curl up on themselves.
I don't see a pellet in my oligo tube order. Should I ask for a replacement?
The drying method dries the primer in a thin layer along the sidewalls of the tube instead of the bottom, therefore a pellet is not always visible and should still be ready to use.
There is a ball-shaped pellet at the bottom of my oligo tube. What is this and can I still use my oligo?
If the oligo was overheated, it will appear as a ball-shaped pellet attached to the bottom of the tube. This should not affect the quality of the oligo, and the oligo should be readily soluble in water.
There is a green color in my lyophilized oligo. Can I still use it?
If an oligo appears green in color, this is most likely due to ink falling into the tube. The oligo should still be fully functional. The color can be removed by doing an ethanol precipitation.