Pierce™ GST Spin Purification Kit, 1 mL

Dieses Thermo Scientific Pierce GST-Spin-Aufreinigungskit enthält Pierce Glutathion-Spin-Säulen und Pufferkomponenten für ein schnelles, anwenderfreundliches Format zur Aufreinigung von GST-Fusionsproteinen aus zellulären Lysaten.

Merkmale der Glutathion-Agarose:

• Hohe Kapazität— bindet mindestens 40 mg gereinigtes rekombinantes GST-Protein pro Milliliter Harz
• Hohe Ausbeute und Reinheit—reinigt beständig mindestens 10 mg GST-markiertes Protein pro Milliliter Harz mit mehr als 90 % Reinheit
• Kosteneffektiv— das Harz ist kostengünstig und kann mindestens fünf Mal ohne Verringerung des Bindungsvermögens und Reinigungsleistung wiederverwendet werden
• Vielseitig—eignet sich gut zur Aufreinigung von GST-Fusionsproteinen aus bakteriellen Lysaten oder zur Verwendung mit vorgereinigten GST-markierten Proteinen zur Reduzierung von Proteininteraktionen
• Kompatibel— validiert und effektiv für die Verwendung mit Thermo Scientific Zelllysereagenzien zur Extraktion und Aufreinigung aus Bakterien- oder Säugetierzellkulturen

Das Glutathion wird durch sein zentrales Sulfhydryl auf 6 % vernetztes Agarose-Harz immobilisiert. Die Aufreinigung von GST-Fusionsproteinen mit Glutathion(GSH)-Agarose-Beads ist gut dokumentiert und bietet eine hochreine Affinitätsreinigung in einem Schritt. Egal, ob Sie große Mengen rekombinanter Proteinen von überexprimierenden E. Coli-Lysaten reinigen oder Protein-Wechselwirkungen untersuchen möchten, bei denen mit GST markierte Köderproteine beteiligt sind – Pierce Glutathion Agarose-Harz ist für solche Applikationen optimal.

Thermo Scientific Pierce Glutathion-Agarose wird auch in drei Volumina Harz-Suspension, kompletten GST-Aufreinigungs-Kits, zwei Größen von FPLC-fähigen Chromatographie-Kassetten und 96-Well-Filterplatten für hohe Durchsatzanforderungen angeboten.

Pierce Glutathion-Agarose reinigt effektiv hohe Konzentrationen überexprimierter GST-markierter Fusionsproteine von bakteriellen Lysaten wie z. B. solchen, die sich mit Thermo Scientific B-PER-Extraktionsreagenzien für bakterielle Proteine gewinnen lassen.

Pierce Glutathion-Agarose zeigt sowohl bei Batch- als auch bei Spin-Säulen-basierten Verfahren in unterschiedlichen Maßstäben gute Leistungen. Die Leistung entspricht oder übertrifft die gängiger GSH-Harze anderer Anbieter.

Pierce Glutathion-Agarose ist eine hochwertige, stabile und belastbare Affinitätsunterstützung. Tests bestätigen, dass die Leistung auch nach mindestens fünf Wiederverwendungen nicht nachlässt. Diese Daten zeigten, dass das Harz während des normalen Gebrauchs sehr widerstandsfähig gegen strukturelle Degradation oder Ausbluten der Liganden ist.

Die Expression und Aufreinigung rekombinanter Proteine ist ein zentraler Punkt in der Proteinregulation sowie in Struktur- und Funktionsstudien. Die meisten rekombinanten Proteine werden als Fusionen mit kurzen Affinitätstags oder kleine Proteine wie beispielsweise Glutathion-S-Transferase (GST) exprimiert. Dieses Protein bindet speziell an reduziertes Glutathion (GSH) unter nahezu neutralen, nicht denaturierenden Bedingungen (z. B. Tris-Puffer). Gebundenes Protein lässt sich leicht durch Konkurrenzverschiebung mit einem Puffer dissoziieren (eluieren), der freie, reduzierte GSH enthält (oxidiertes Glutathion, GSSH ist für diesen Zweck nicht effektiv). Wenn Proteine von Interesse als Fusionen mit GST exprimiert werden und Glutathion an einen festen Träger immobilisiert wird, ermöglicht dieses Protein-Substrat-System eine Affinitätsreinigung rekombinanter Proteine sowie verschiedene andere Experimente mit diesen Proteinen.

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