ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ con tampón Gold y MgCl2
ADN polimerasa AmpliTaq Gold&trade; con tampón Gold y MgCl<sub>2</sub>
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Applied Biosystems™

ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ con tampón Gold y MgCl2

El ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ es una forma químicamente modificada de ADN polimerasa AmpliTaq™ que requiere activación térmica. Características deMás información
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Número de catálogoCantidad
431774225.000 unidades
4311806250 unidades
43118161000 unidades
43118203000 unidades
43118185000 unidades
Número de catálogo 4317742
Precio (CLP)
-
Cantidad:
25.000 unidades
Pedido a granel o personalizado
El ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ es una forma químicamente modificada de ADN polimerasa AmpliTaq™ que requiere activación térmica. Características de esta enzima:

• Enzima de inicio en caliente química automatizada para aumentar la especificidad, la sensibilidad y el rendimiento
• La activación térmica de liberación prolongada mejora la sensibilidad en amplificaciones de bajo número de copias
• La PCR multiplex realizada con éxito ahorra tiempo y reactivos
• Incluye el tampón para PCR GeneAmp™ 10X PCR Gold Buffer con MgCl2

Activación de inicio en caliente
La enzima modificada se proporciona en un estado inactivo. Tras la activación térmica, el modificador se libera de manera permanente, lo que regenera la enzima activa. La amplificación de PCR de inicio en caliente resultante proporciona mayor sensibilidad, especificidad y rendimiento sobre las técnicas de PCR convencionales.

Mayor especificidad, mayor rendimiento
La ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ se puede activar parcial o completamente en un paso de calor pre-PCR, o se puede permitir que se active lentamente de una manera de liberación de tiempo durante los pasos de desnaturalización del ciclo térmico. Con o sin un paso de activación térmica anticipado limitado, la enzima activa se libera lentamente durante el ciclo térmico para corresponderse a la concentración del molde y aumentar la especificidad. El rendimiento del producto específico aumenta porque los reactivos no se desperdician en la formación de productos no deseados. Puesto que la ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ es una enzima de inicio en caliente de naturaleza química, no hay que preocuparse por la contaminación biológica.

El tampón GeneAmp™ 10X PCR Gold se ha formulado para activar con flexibilidad y eficacia la ADN polimerasa AmpliTaq Gold™, lo que se traduce en una amplificación por PCR muy específica y sólida. La fuerza iónica y el pH del tampón GeneAmp™ 10X PCR Gold se han optimizado para proporcionar una temperatura de activación y un intervalo de tiempo más amplios cuando se utilizan junto con ADN polimerasa AmpliTaq Gold™.

ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360 para un rendimiento superior
También está disponible ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360 para un rendimiento de PCR aún mejor. En comparación con el ADN polimerasa AmpliTaq Gold™, el ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ 360 se ha purificado mediante un proceso de separación patentado adicional para eliminar contaminantes de secuencias de ADN bacteriano de la preparación de la enzima. Cuando se utiliza con el tampón mejorado 360 Gold, esta enzima ultrapura, además de sus capacidades de inicio en caliente, reduce los resultados de falsos positivos, amplifica las secuencias objetivo de bajo nivel y potencia la amplificación de una variedad de moldes. También se incluye con este producto un potenciador 360 GC para trabajar con plantillas con gran cantidad de GC complejas.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Actividad exonucleasa5' - 3'
Fidelidad (frente a Taq)1 X
FormatoTubo
Inicio en calienteInicio en caliente integrado
N.º de reacciones20.000 reacciones
Sobrante3'-A
PolimerasaADN polimerasa AmpliTaq Gold
Tipo de productoADN polimerasa
Cantidad25.000 unidades
Formato de reacciónComponentes separados
Condiciones de envíoDry Ice
Tamaño (producto final)5 kb o menos
Material de partidaADN
Concentración5 U/μl
Para utilizar con (aplicación)Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceBajo
Velocidad de reacciónEstándar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene 5 cajas en total, cada una de las cuales incluye lo siguiente:
• Cinco tubos (200 µl a 5 U/µl) de ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ (250 unidades por tubo)
• 20 tubos (1,5 ml) de tampones GeneAmp™ Gold 10X (150 mm de Tris-HCl, con un pH de 8,0, y 500 mm de KCl)
• 20 tubos (1,5 ml) de cloruro magnésico de 25 mm.

Almacenar a una temperatura de entre -15 y -30 °C.

Preguntas frecuentes

What is the difference between AmpliTaq Gold polymerase and Platinum Taq polymerase?

Both AmpliTaq Gold and Platinum Taq are hot-start enzymes that allow you to set up your reactions on the benchtop without the need for ice. AmpliTaq Gold is a chemically-modified hot-start enzyme, provided in an inactive state. Heat activates the enzyme, with full activity after 10 min at 95 degrees C. Platinum Taq is an antibody-mediated hot-start enzyme. The anti-Taq antibodies bind and inactivate the enzyme, until the heat denaturation step of the PCR reaction (30 sec to 2 min), which activates the enzyme.

When using AmpliTaq Gold DNA polymerase, under what conditions would one choose a two-temperature vs. three-temperature PCR?

A two-temperature PCR is commonly used when the primer annealing temperatures are above 60 degrees C. Use a three-temperature PCR when the templates have high G+C content and/or secondary structure, or desired primer annealing temperatures are below 60 degrees C. Please consult the Product Insert for more information on the use of AmpliTaq Gold DNA polymerase.

Is there anything to prevent AmpliTaq Gold DNA polymerase from extending from the 3’ end of a TaqMan probe in a 5’ nuclease assay?

Yes. There is a phosphate group on the 3' end of all TaqMan probes that prevents such extension.

How does AmpliTaq Gold DNA Polymerase differ from AmpliTaq DNA Polymerase?

AmpliTaq Gold DNA Polymerase is a modified form of AmpliTaq DNA Polymerase that contains a proprietary chemical (or so-called hot start molecule) bound to the enzyme's active site. In order to activate the AmpliTaq Gold DNA Polymerase fully, we recommend an initial activation step of 95 degrees C for 10 min when using GeneAmp 10X PCR Buffer I and/or GeneAmp 10X PCR Buffer II and Mg in one of our thermal cyclers. When using GeneAmp 10X PCR Gold Buffer, activation time can be reduced to 5 minutes. Once activation is complete, you can proceed with your standard PCR cycling program (denaturing, annealing, extension, etc).

Does AmpliTaq Gold DNA Polymerase contain exonuclease (proofreading) activity?

No, AmpliTaq Gold DNA polymerase does not contain proofreading activity, however fidelity in PCR amplifications utilizing this enzyme may be improved. High fidelity can be achieved by: 1. Decreasing the final concentration of each nucleotide to 40-50 uM. 2. Using the lowest MgCl2 concentration possible. 3. Using less enzyme. 4. Decreasing extension times. 5. Using the highest annealing temperature possible. 6. Using as few cycles as possible.

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Citations & References (2)

Citations & References
Abstract
Approaches to determine expression of inflammatory cytokines.
Authors:Amsen D, de Visser KE, Town T,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:19347295
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A phase 1 study of a vaccine targeting preferentially expressed antigen in melanoma and prostate-specific membrane antigen in patients with advanced solid tumors.
Authors:Weber JS, Vogelzang NJ, Ernstoff MS, Goodman OB, Cranmer LD, Marshall JL, Miles S, Rosario D, Diamond DC, Qiu Z, Obrocea M, Bot A,
Journal:J Immunother
PubMed ID:21760528
Preferentially expressed antigen in melanoma (PRAME) and prostate-specific membrane antigen (PSMA) are tumor-associated antigens implicated in cellular differentiation, genetic stability, and angiogenesis. MKC1106-PP is an immunotherapeutic regimen cotargeting PRAME and PSMA, comprised of a recombinant plasmid (pPRA-PSM encoding fragments derived from both antigens) and 2 peptides (E-PRA and E-PSM derived ... More