ARNip de control positivo de factor VII in vivo Ambion™

Los controles ARNip Ambion™ in vivo
• Controles de ARNip validados para optimizar experimentos de ARNip dirigidos a las transcripciones con y sin codificación
• Funcionalidad de control positivo de ARNip probada en varias líneas celulares comunes
• Demostración funcional de que los controles negativos tienen efectos mínimos en la proliferación y viabilidad celulares
• Inclusión de modificaciones de Silencer™ Select para una mayor especificidad o de modificaciones Ambion™ in vivo para una mayor estabilidad
• Para su uso en células de ratón

¿Qué son los ARNip Ambion™ in vivo?
Los ARNip Ambion™ in vivo se han diseñado utilizando el algoritmo Silencer™ Select demostrado e incorporan modificaciones químicas para una mayor estabilidad del suero con administración in vivo. La estabilidad del suero añadida no compromete el rendimiento de los ARNip. Se ha demostrado que el ARNip Ambion™ in vivo no es tóxico in vivo (ratón) ni inmunogénico (ensayos celulares). En los ensayos celulares, los ARNip Ambion™ in vivo presentan una potencia equivalente o mejor que los ARNip Silencer™ Select. El resultado es una mayor confianza en sus experimentos con ARNi in vivo, una mejor atenuación cuando se combina con una solución de administración eficiente y la garantía de efectos no específicos limitados.

ARNip de control positivo de factor VII (FVII)
El ARNip In Vivo Ready de factor VII Ambion™ In Vivo proporciona un control positivo para experimentos que involucran el suministro de ARNip Ambion™ In Vivo a ratones. El factor VII (FVII⁄F7; también conocido como proconvertina) es una proteasa serina dependiente de la vitamina K que funciona como una proteína central en la cascada de coagulación. El FVII se sintetiza en el hígado y se segrega al plasma donde circula en forma inactiva. Después de la entrega del ARNip de objetivo FVII al hígado, la reducción se puede medir cuantificando los niveles de la proteína FVII en sangre mediante ensayos cromogénicos robustos, comercialmente disponibles. Además, las muestras de sangre se pueden recoger del mismo animal en múltiples puntos temporales después de la inyección de ARNip. Estas características permiten realizar mediciones de reducción mucho más rápidas y eficaces para el FVII que para objetivos genéticos que requieren una cuantificación de los niveles de ARNm en el tejido hepático, lo que convierte al FVII en un control ideal para la administración de ARNip in vivo.

Control de calidad
Ambion™ sintetiza y purifica cada ARNip Ambion™ in vivo en instalaciones de vanguardia para satisfacer los más altos estándares de calidad. Como parte de nuestros rigurosos procedimientos de control de calidad, cada oligonucleótido de ARN se somete a análisis mediante espectrometría de masas MALDI-TOF y se emplea un HPLC analítico para controlar la pureza. Para proporcionar la máxima calidad, también evaluamos cada ARNip recocido mediante electroforesis de gel para confirmar que las cadenas se recuecen correctamente. El resultado es un ARNip de máxima calidad que está purificado y listo para su uso.

Controles in vivo Ready
Nuestros ARNip de control “in vivo Ready” están sujetos a ese nivel adicional de purificación y pruebas requeridas para la introducción de ARNip en animales. Después de la purificación mediante HPLC y recocido, cada ARNip se purifica aún más utilizando un proceso que elimina el exceso de sal a través de una membrana semipermeable. El resultado es un ARNip muy puro con un contenido de sal mínimo, adecuado para aplicaciones in vivo. A continuación, los ARNip in vivo se esterilizan mediante filtración y se prueban para detectar la presencia de endotoxinas. A concentraciones de 50 μM en presencia de agua desionizada, los ARNip in vivo Ready contienen inferior al 5,0 mM Na+, inferior al 0,06 mM K+ y inferior al 0,02 mM Mg2+.