Pierce™ Antibody Clean-up Kit

El kit de limpieza de anticuerpos Thermo Scientific Pierce sirve para eliminar la BSA, la gelatina y otras proteínas estabilizadoras de las soluciones madre de anticuerpos antes de los procedimientos de etiquetado y conjugación químicos basados en aminas.

Características del kit de limpieza de anticuerpos:

• Rápido: elimina la proteína portadora de las soluciones de anticuerpos en la mitad del tiempo necesario para purificar los anticuerpos mediante los procedimientos de purificación de las proteínas A o G.
• Delicado: no es necesario neutralizar o desalar para mitigar los efectos de los tampones de elución más duros.
• Completo: las columnas desaladoras suministradas proporcionan un intercambio de tampón sencillo en el tampón de purificación requerido o un intercambio rápido en el tampón final de elección.
• Económico: contiene reactivos suficientes para realizar 10 reacciones de limpieza de anticuerpos.

Se trata de un kit completo y fácil de usar para eliminar la BSA y las proteínas estabilizadoras de la gelatina (hasta 1 %) de las muestras de IgG. El protocolo utiliza el gel Melon de Thermo Scientific para unir estas proteínas de almacenamiento de uso frecuente, lo que permite que el anticuerpo fluya en forma purificada. El anticuerpo se recupera en un tampón sin aminas ni carboxilos, listo para su uso en aplicaciones posteriores como la biotinilación, el etiquetado fluorescente, el entrecruzamiento, la inmovilización y la fragmentación enzimática (por ejemplo, la preparación de fragmentos Fab).

La seroalbúmina bovina (BSA) y la gelatina se añaden a menudo a las soluciones de anticuerpos purificados como estabilizadores para almacenamiento a largo plazo. La inclusión de 0,2 a 1 % (de 2 a 10 mg/ml) de BSA o gelatina ayuda a estabilizar las soluciones de anticuerpos diluidas. Por lo general, estas proteínas añadidas no interfieren con los métodos de inmunodetección; sin embargo, su presencia en la solución sí interfiere con las sustancias químicas de conjugación amino-reactivas, que son la base de la mayoría de los métodos de biotinilación, etiquetado de colorantes fluorescentes, fragmentación de anticuerpos e inmovilización covalente. En estos métodos, el anticuerpo debe aislarse de las proteínas estabilizadoras, y el kit de limpieza de anticuerpos lo logra de forma eficiente.

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