Ambion™ mirVana™ miRNA Inhibitor, let-7c positive control

Name: Ambion™ mir Vana™ miRNA Inhibitor, let-7c positive control
SKU: 4464080

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5 nmol

Los inhibidores de miARN son pequeñas moléculas de ARN monocatenario modificadas químicamente diseñadas para unirse e inhibir específicamente las moléculas de miARN endógenas y permitir el análisis funcional del miARN mediante la regulación a la baja de la actividad del miARN.

Ahora hemos lanzado la segunda generación de inhibidores miARN, los inhibidores de miARN mirVana™ que:
• Muestran una mejor potencia que el producto de la competencia principal
• Ofrecen efectos máximos y uniformes in vitro en concentraciones bajas de inhibidor de miARN
• No son tóxicos
• Se dirigen al contenido de Sanger más actualizado
• Se pueden utilizar in vitro e in vivo y le ofrecen uniformidad a lo largo de todo el proyecto de investigación

Los controles positivos y negativos también están disponibles para su uso junto con inhibidores de miARN mirVana™ en experimentos de regulación a la baja de miARN.

Control positivo let-7c de inhibidor de miARN mirVana™
El control positivo let-7c de inhibidor de miARN mirVana™ está diseñado para usarse como control positivo para experimentos de cultivo de células de mamíferos con inhibidores de miARN mirVana™. Se ha demostrado que el miARN endógeno let-7c regula negativamente el ARNm HMGA2 en células cultivadas. La HMGA2 es una proteína cromatina no histona expresada ubicuamente que puede modular la expresión génica a través de cambios en la arquitectura de la cromatina. El miARN de let-7c reduce los niveles de ARNm de la HMGA2. Cuando se transfectan en líneas celulares humanas y de ratón, el inhibidor de miARN de let-7c bloquea el miARN endógeno de let-7c, lo que resulta en un aumento de los niveles de ARNm de HMGA2. Por lo tanto, la actividad del inhibidor del miRNA de let-7c se puede supervisar en células humanas o de ratón usando un PCR de transcripción inversa en tiempo real (RT-PCR) para detectar el ARNm de HMGA2.

Controles de inhibidores de primera generación
Nuestros inhibidores (y controles) de miARN de primera generación, los inhibidores de miARN Ambion™ Anti-miR™, tienen menor especificidad y potencia, además de una especificidad de cadena más baja en comparación con los nuevos inhibidores de miARN mirVana™. Estos inhibidores de primera generación se recomiendan para completar los estudios in vitro de miARN en curso. Para nuevos estudios o estudios in vivo, recomendamos nuestros nuevos inhibidores de miARN mirVana™ y sus correspondientes controles.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Para utilizar con (aplicación)Análisis de ARN sin codificación y Mirna

Etiqueta o tinteno conjugado

Línea de productosmirVana

Tipo de productoInhibidor de miARN

Método de purificaciónPurificado

Cantidad5 nmol

Condiciones de envíoTemperatura ambiente

Tipo de controlControl positivo

RNAi TypeInhibidor de miARN

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Almacenar a -20 °C o menos. No almacenar en un congelador sin escarcha.

Preguntas frecuentes

How can I quantify endogenous miRNA inactivation by mirVana inhibitors?

Using TaqMan miRNA assays, you can measure the level of miRNA of interest. If the miRNA is bound to the synthetic anti-miRs and/or mirVana inhibitors transfected, the duplex should not be detected, indicating efficient miRNA inactivation. Please note, this only works when total RNA sample isolated is not heat denatured when RT primer is added, as heat denaturation will result in complex dissociation and subsequent detection of microRNA by TaqMan miRNA assay even when cells have been transfected properly. Please see the protocol for the TaqMan MicroRNA Cells-to-CT kit (Cat. No. 4391848) for more details.

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How do you introduce mirVana miRNA mimics or inhibitors into cells?

Mimics and inhibitors can be transfected or electroporated into cells using parameters similar to those used for siRNA.

Using mirVana miRNA Mimics- For the following applications, use a cell line that expresses relatively low levels of the mature miRNA of interest.
- Cell density at the time of transfection. In general, 30-70% confluency is recommended.
- Transfection method (traditional or reverse transfection).
- Length of exposure of cells to transfection agent-RNA oligonucleotides complexes.
For many miRNA mimics, maximal activity is achieved after 24 hours, but biological assays may be performed 24-72 hours posttransfection. If you maintain your transfected cells longer than 24 hours, we suggest replacing the existing medium with fresh medium at 24 hours posttransfection, for greater viability of the cells.

Using mirVana miRNA Inhibitors to analyze endogenous miRNA function
For the following applications, use a cell line that expresses relatively high levels of the mature miRNA of interest.
General transfection starting points
mirVana miRNA Mimics and Inhibitors typically work best when transfected at a final concentration of 3-30 nM. Optimization experiments might include a concentration range of 1-100 nM. To increase accuracy and reproducibility when preparing transfection complexes, prepare a dilution of your stock oligonucleotides, and pipet a higher volume of diluted stock.

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What is the turnaround time for your mirVana miRNA Mimic and Inhibitors?

The turnaround time varies depending on the level of purification and whether it is a custom order or not. Please see the approximate timetable below:

Standard purification (5 and 20 nmol), 4 business days
HPLC/in vivo ready (250 nmol), 15 business days
Custom mirVana Mimics and Inhibitors, 15 business days

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I would like to create a custom mirVana mimic and inhibitor. Can I do this?

Yes, please provide us with your unpublished miRNA sequence and we can synthesize a corresponding mirVana mimic or inhibitor by clicking on this link (www5.invitrogen.com/custom-genomic-products/tools/mirna/).

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Can I get the sequence for the mirVana Mimics and Inhibitors negative control?

Negative control sequences require a confidential disclosure agreement while target sequences require prior proof of purchase for release.

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