Pierce™ Fab Preparation Kit
Pierce™ Fab Preparation Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Fab Preparation Kit

Los kits de preparación de fragmentos Fab Thermo Scientific Pierce utilizan la papaína inmovilizada para digerir los anticuerpos de IgGMás información
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Número de catálogoCantidad
4498510 muestras de anticuerpos con 0,25-4 mg de IgG cada una
Número de catálogo 44985
Precio (MXN)
-
Cantidad:
10 muestras de anticuerpos con 0,25-4 mg de IgG cada una
Pedido a granel o personalizado
Los kits de preparación de fragmentos Fab Thermo Scientific Pierce utilizan la papaína inmovilizada para digerir los anticuerpos de IgG de humano o de ratón con el fin de separar los fragmentos Fab y Fc y purificar posteriormente los fragmentos Fab con proteína A agarosa.

Características del kit de preparación de fragmentos Fab:

Alta capacidad: utilice el kit de tamaño estándar para fragmentar IgG de 0,25 a 4 mg.
Productos de digestión sin enzimas: la papaína inmovilizada (resina de agarosa granulada) ayuda al control de la reacción de digestión y a la eliminación total de fragmentos de anticuerpos resultantes de la enzima proteolítica.
Adecuado para humanos y otras especies de IgG: el procedimiento del kit está optimizado para los anticuerpos IgG humanos, de ratón y de conejo. La digestión basada en papaína es eficaz para algunas otras especies y subclases de IgG (por ejemplo, cabra y cerdo), aunque la fase de purificación requiere que el anticuerpo se una de manera eficaz a la proteína A. (Nota: Para obtener los mejores resultados con IgG1 de ratón, utilice el número de pieza 44980).
Proporciona fragmentos Fab listos para usar: la digestión y la recuperación final de fragmentos Fab purificados se produce en un tampón de fosfato de sodio de pH neutro adecuado para su almacenamiento o para su uso inmediato en aplicaciones convencionales
Completo: los kits incluyen todos los reactivos necesarios para preparar y purificar fragmentos de anticuerpos
Rápido: el formato de centrifugación reduce enormemente el tiempo de procesamiento de las muestras
Flexible: se incluyen protocolos flexibles para múltiples especies y subclases de IgG, así como para el tamaño y la concentración de la muestra.
Eficiente: mayor rendimiento y pureza de las muestras

Estos kits de preparación de fragmentos Fab son adecuados para IgG humanos, de conejo, de ratón, así como para otras especies y subclases de IgG. La reacción de la digestión de anticuerpos de papaína se realiza en prácticas columnas de centrifugación desechables que permiten extraer con eficacia la proteasa inmovilizada y recuperar por completo los fragmentos de IgG. Los kits también incluyen tampones y columnas de centrifugación NAb de proteína A Thermo Scientific para purificar eficazmente los fragmentos resultantes. La proteína A se une a los fragmentos Fc y a la IgG sin digerir, lo que permite recuperar los fragmentos Fab puros de la fracción no retenida. Los kits también incluyen columnas de desalación por centrifugación Thermo Scientific Zeba para preparar la muestra de IgG rápidamente sin dilución en lugar de utilizar pasos de diálisis que requieren mucho tiempo.

Los kits utilizan papaína, una cisteína endopeptidasa inespecífica, para escindir enzimáticamente la IgG completa justo por encima de la región bisagra y crear dos fragmentos Fab y un fragmento Fc independientes por molécula de anticuerpo. Puesto que la papaína se proporciona inmovilizada como resina de agarosa en gránulos, la reacción de digestión se detiene fácilmente al extraer la resina de la solución de IgG; como resultado, se obtienen productos de digestión sin enzimas.

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónKit de preparación de fragmentos Fab Pierce
Cantidad10 muestras de anticuerpos con 0,25-4 mg de IgG cada una
Línea de productosPierce
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Suficiente para: 10 muestras de anticuerpos, cada una contiene de 0,25 a 4 mg de IgG
• Agarosa de papaína Pierce, 1,25 ml
• Cisteína-HCI, 1g
• Tampón de digestión de fragmentos Fab, 120 ml
• 1 columna de centrifugación de Nab Proteína A Plus, 1 ml
• 2 envases de PBS (cada uno hace 500 ml)
• Tampón de elución de IgG, 120 ml
• 10 columnas de desalación por centrifugación Zeba, MWCO de 7000, 2 ml
• 10 columnas de centrifugación, 0,8 ml
• 30 tubos de microcentrífugas, 2 ml

Almacenar a 4–8 °C.

Preguntas frecuentes

Can I reuse the immobilized digestion enzymes in the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

No. For best results, use the immobilized enzyme once and discard after use.

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How long does IgG digestion take using the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit?

The digestion time is a function of the IgG concentration and source. For rabbit, mouse and human IgG, optimized digestion times are given in the instructions for each kit. Digestion times listed in the product instructions result in 80-90% digestion, although efficiency varies depending on IgG preparation and source.

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In the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit, when digesting an IgG that does not bind to Protein A, how do I purify the Fab and F(abÁ)2 fragments?

If the IgG is a species or subclass that does not bind to Protein A, researchers can immobilize an antibody specific for the desired fragment. For example, to purify digested rat IgG2a, use the Aminolink Plus Immobilization Kit (Cat. No. 44894) to immobilize goat anti-rat Fc antibody. Our Tech Tip #34 and other web resources list IgG binding properties of Protein A. (Because Protein G and Protein A/G bind Fab fragments, they are not effective for this application.)

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Can I purchase the immobilized enzymes (proteases) from the Thermo Scientific IgG Fragmentation kit separately?

Yes. The three immobilized enzymes are available in 5 mL package sizes as shown below:

• Immobilized Ficin, Cat. No. 44881
• Immobilized Papain, Cat. No. 20341
• Immobilized Pepsin, Cat. No. 20343

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How many Thermo Scientific IgG Fragmentation kits are available and which enzymes are included?

There are six Thermo Scientific IgG fragmentation kits:

• Fab Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44985
• Fab Micro Preparation Kit (Papain), Cat. No. 44685
• F(abÁ)2 Preparation Kit (Pepsin), Cat. No. 44988
• F(abÁ)2 Micro Preparation Kit, (Pepsin), Cat. No. 44688
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44980
• Mouse IgG1 Fab and F(abÁ)2 Micro Preparation Kit (Ficin), Cat. No. 44680

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Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
A novel MARV glycoprotein-specific antibody with potentials of broad-spectrum neutralization to filovirus.
Authors:Zhang Y,Zhang M,Wu H,Wang X,Zheng H,Feng J,Wang J,Luo L,Xiao H,Qiao C,Li X,Zheng Y,Huang W,Wang Y,Wang Y,Shi Y,Feng J,Chen G
Journal:eLife
PubMed ID:38526940
Marburg virus (MARV) is one of the filovirus species that cause deadly hemorrhagic fever in humans, with mortality rates up to 90%. Neutralizing antibodies represent ideal candidates to prevent or treat virus disease. However, no antibody has been approved for MARV treatment to date. In this study, we identified a ... More
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Authors:
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PubMed ID:32581046
Biophysical characterization and structure of the Fab fragment from the NIST reference antibody, RM 8671.
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