Das Thermo Scientific NHS-Fluorescein Antikörpermarkierungskit ist ein Mehrkomponentenkit mit einem Hochleistungsderivat des Farbstoffs Fluorescein, das zur einfachen und zuverlässigen Markierung von Antikörpern, Proteinen und anderen Molekülen für die Verwendung als Fluoreszenzsonden aktiviert ist.
Merkmale des Kits:
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Einfach—Praktisches Kit mit NHS-Fluorescein zur Markierung und Aufreinigung von Antikörpern in ca. einer Stunde
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Aminspezifische Markierung—Die Isothiocyanatvariante von Fluorescein markiert Antikörper und andere aufgereinigte Proteine effizient an primären Aminen (lysinseitige Ketten)
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Optimiertes Kitverfahren—Nach dem Standardprotokoll entstehen Antikörper mit ausgezeichneten Farbstoff:Protein-Verhältnissen für optimale Aktivität und Fluoreszenz.
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Fluore zum Einmalgebrauch—keine Notwendigkeit zum Abwiegen winziger Pulvermengen; Kits enthalten Einwegfläschchen mit Reagenz
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Effiziente Aufreinigung—Kits enthalten Aufreinigungsharz und anwenderfreundliche Spin-Säulen, die nicht reagierten Farbstoff schnell und effizient entfernen und eine hervorragende Proteinrückgewinnung gewährleisten
NHS-Fluorescein wird mit der Funktionsgruppe
N-Hydroxy-Succinimidyl-Ester (
NHS-Ester) aktiviert. Im Vergleich zu FITC hat das NHS-Ester-Derivat bei Vorhandensein anderer Nukleophile eine größere Spezifität gegenüber primären Aminen und bildet nach der Markierung stabilere Anbindungen. Pierce Amine-reactive Fluorescein Dyes sind oft eine Mischung aus Isomeren mit reaktiven Gruppen, die sich an den Positionen 5 und 6 des unteren Rings befinden. Die Eigenschaften dieser Isomere sind hinsichtlich der Erregungs- und Emissionsspektren nicht unterscheidbar, und für Proteinanwendungen ist es nicht erforderlich, ein spezifisches Isomer zu isolieren.
Merkmale von NHS-Fluorescein:
• Alternative Bezeichnung: 5/6-FAM SE
• Chemische Bezeichnung: 5/6-Carboxyfluorescein-Succinimidyl-Ester
• Molekülmasse: 473,4
• Erregungsquelle: 488 nm-Spektrallinie, Argon-Ion-Laser
• Erregungswellenlänge: 494 nm
• Emissionswellenlänge: 518 nm
• Extinktionskoeffizient: > 70.000 M
-1 cm
-1• CAS Nr.: 117548-22-8
• Reinheitsgrad: >90% nach HPLC
• Löslichkeit: Löslich in DMF oder DMSO
• Reaktive Gruppen: NHS-Ester, reagiert mit primären Aminen bei pH-Werten von 7,0 bis 9,0
Anwendungen:• Markieren von Antikörpern für die Verwendung als Immunfluoreszenzsonden
• Markieren von Oligonukleotiden als Hybridisierungssonden
• Nachweis von Proteinen in Gelen und auf Western Blots
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