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Invitrogen™

EBioscience™ Annexin V Apoptose-Detektionskits

Die Kits verwenden das per Viabilitätsfarbstoff konjugierte Annexin V, um Phosphatidylserin (PS), einen frühen Marker der Apoptose, auf der extrazellulären Membran zu kennzeichnen.
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KatalognummerMengeAnregung/EmissionKonjugat
88-8008-74200 TestsPCP-eFluor 710
88-8005-74200 Tests488, 535/520, 617FITC, Propidiumiodid
88-8006-7250 Tests405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8006-74200 Tests405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8007-74200 Tests650, 535/660, 617APC, Propidiumiodid
88-8008-7250 TestsPCP-eFluor 710
BMS500FI-100100 Tests488, 535/520, 617FITC, Propidiumiodid
BMS500FI-2020 Tests488, 535/520, 617FITC, Propidiumiodid
BMS500FI-300300 Tests488, 535/520, 617FITC, Propidiumiodid
88-8102-7250 TestsPE, 7-AAD
88-8102-74200 TestsPE, 7-AAD
88-8103-7250 TestsPE/Cy7
88-8103-74200 TestsPE/Cy7
BMS500BT-100
auch als BMS500BT/100 bezeichnet
100 TestsNA, 535/NA, 617Biotin, Propidiumiodid
BMS500BT-20
auch als BMS500BT/20 bezeichnet
20 TestsNA, 535/NA, 617Biotin, Propidiumiodid
BMS500BT-300
auch als BMS500BT/300 bezeichnet
300 TestsNA, 535/NA, 617Biotin, Propidiumiodid
88-8005-7250 Tests488, 535/520, 617FITC, Propidiumiodid
88-8007-7250 Tests650, 535/660, 617APC, Propidiumiodid
Katalognummer 88-8008-74
Preis (EUR)
458,65
Exklusiv online
510,00
Ersparnis 51,35 (10%)
Each
Menge:
200 Tests
Konjugat:
PCP-eFluor 710
Preis (EUR)
458,65
Exklusiv online
510,00
Ersparnis 51,35 (10%)
Each
Unterscheiden Sie Zellen, die eine frühe oder späte Apoptose durchlaufen, ganz einfach mit eBioscience- und Annexin V Apoptose-Nachweiskits für die Durchflusszytometrieanalyse. Diese Kits verwenden das per Viabilitätsfarbstoff konjugierte Annexin V, um Phosphatidylserin (PS), einen frühen Marker der Apoptose, auf der extrazellulären Membran zu kennzeichnen. Bei der späten Apoptose geht die Zellintegrität verloren. Sowohl Annexin V als auch der Viabilitätsfarbstoff durchqueren PS und binden es auf dem Inneren der Plasmamembran.
Annexine sind eine Familie calciumabhängiger phospholipidbindender Proteine, die bevorzugt Phosphatidylserin (PS) binden. Unter normalen physiologischen Bedingungen befindet sich PS vorwiegend in der Innenschichtder Plasmamembran. Nach Einleitung der Apoptose verliert PS seine asymmetrische Verteilung über die Phospholipid-Doppelschicht und verlagert sich in die extrazelluläre Membran, wobei Zellen als Ziele der Phagozytose markiert werden. Sobald es sich an der an der Außenfläche der Membran befindet, kann PS durch fluoreszierendes Annexin V calciumabhängig nachgewiesen werden.

Im Anfangsstadium der Apoptose schließt die Plasmamembran Viabilitätsfarbstoffe wie Propidiumiodid (PI), 7-AAD oder fixierbare Viabilitätsfarbstoffe wie eFluor 450 aus. Diese Zellen färben sich zwar mit Annexin V, aber nicht mit einem Viabilitätsfarbstoff, was eine Differenzierung der Zellen im Anfangsstadium der Apoptose ermöglicht. Im späten Stadium der Apoptose verliert die Zellmembran jedoch ihre Integrität, wodurch Annexin V auch auf PS im Inneren der Zelle zugreifen kann. Mit einem Viabilitätsfarbstoff können diese apoptotischen und nekrotischen Zellen im Spätstadium (Annexin V, Viabilitätsfarbstoff-positiv) aus den apoptotischen Zellen im Frühstadium (Annexin V-positiv, Viabilitätsfarbstoff-negativ) aufgelöst werden.

Die derzeit mit den eBioscience Annexin V Apoptose-Nachweiskits erhältlichen Viabilitätsfarbstoffe umfassen FITC, eFluor 450, Allophycocyanin (APC), Phycoerythrin (PE), PE-Cyanin7 und Biotin.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
BeschreibungeBioscience Annexin V Apoptose-Nachweiskit PerCP-eFluor 710
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluoreszenzmikroskop, Durchflusszytometer
Kitinhalt• Annexin V Bindungspuffer (10x), 1 Flasche (100 ml)
• Annexin V PerCP-eFluor 710, 1 Fläschchen (1 ml)

Hinweis: Fixierbare Viabilitätsfarbstoffe eFluor 450 wird nicht für die Verwendung mit Annexin V Apoptose-Nachweiskits empfohlen.
ProdukttypApoptose-Nachweiskit
Menge200 Tests
VersandbedingungNasseis
KonjugatPCP-eFluor 710
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
2 bis 8 °C. Vermeiden Sie Temperaturschwankungen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I use eFluor 450-conjugated antibodies with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits?

Yes, eFluor 450-conjugated antibodies are compatible with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits.

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I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I fix my cells after annexin V staining?

Yes, this is possible. We have established protocols for annexin V staining combined with intracellular staining of lymphocytes that can be found here. The most important step is to leave some binding buffer in the suspension when fixation is started. Compared to staining of live cells, the intensity of the annexin V signal may be somewhat reduced.