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Citas y referencias (2)
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Epi5™ Episomal iPSC Reprogramming Kit
El kit episomal de reprogramación de iPSC Epi5™ proporciona un conjunto fácil de usar y altamente eficiente de 5 vectoresMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A15960 | 1 Kit |
Número de catálogo A15960
Precio (CLP)
1.706.932
Each
Cantidad:
1 Kit
Precio (CLP)
1.706.932
Each
El kit episomal de reprogramación de iPSC Epi5™ proporciona un conjunto fácil de usar y altamente eficiente de 5 vectores episómicos diseño del Dr. Okita en el laboratorio del profesor Yamanaka del centro de investigación y aplicación de células iPS (CiRA) de la Universidad de Kioto. Este sistema produce células madre pluripotentes inducidas por humanos (iPSCs) libres de virus y de transgenes, con eficiencias en el rango de 0,04 a 0,3 %, dependiendo del tipo de célula que se reprograme.
Las características del kit episomal de reprogramación de iPSC Epi5™ incluyen:
• Fácil de usar y muy eficiente: al no necesitar moléculas pequeñas durante la reprogramación y la supresión añadida de p53 mejoran la generación (1) de IPSC
• Se puede utilizar en todas las etapas de la investigación de IPSC: la reprogramación sin transgenes ni virus le permite su uso desde para la investigación básica hasta para la preclínica
• Flexibilidad en el sistema de medios: se puede utilizar en sistemas de medios sin alimentadores o basados en alimentadores
Crear iPS transgénicos y libres de virus
Los vectores episómicos son un sistema bien descrito para producir iPSC sin transgenes ni virus, lo que proporciona una fuente de iPSC para todas las etapas de investigación de células madre pluripotentes. Otros métodos de reprogramación, como el lentivirus, contienen transgenes que se pueden integrar en el genoma huésped, lo que puede perturbar el genoma o producir resultados impredecibles.
Como vectores oriP/EBNA1, estos vectores episómicos contienen cinco factores de reprogramación (Oct4, Sox2, Lin28, Klf4, y L-Myc) y se replican extracromosómicamente una vez por ciclo celular. A esta tasa de replicación, los episomas se pierden a una tasa de aproximadamente el 5 % por generación celular. Este sistema muestra una generación mejorada de IPSC a través de la supresión de p53, y la inclusión de L-Myc ha demostrado ser más potente y específica que la de c-Myc durante la generación de IPSC (1) humana.
Sistema fácil de usar
Este kit de dos viales proporciona el sistema óptimo para la reprogramación de vectores episómicos y elimina la necesidad de utilizar moléculas pequeñas en el medio de reprogramación. Los vectores episomales se introducen en la célula mediante electroporación. Recomendamos el uso del sistema de transfección Neon™ para la electroporación, que aporta flexibilidad en el volumen y, por tanto, en el número de células necesarias para la reprogramación.
Flexibilidad en la selección de sistemas de medios
El kit epistomal de reprogramación de IPSC Epi5™ puede utilizarse con varios tipos de células y sistemas de medios. Los protocolos para los fibroblastos y las células sanguíneas CD34+ están disponibles en la reprogramación con o sin alimentador.
1. Okita K, Matsumara Y, Sato Y, et al. A more efficient method to generate integration free human iPS cells. Nature Methods 8, 409 - 412, 2011.
Las características del kit episomal de reprogramación de iPSC Epi5™ incluyen:
• Fácil de usar y muy eficiente: al no necesitar moléculas pequeñas durante la reprogramación y la supresión añadida de p53 mejoran la generación (1) de IPSC
• Se puede utilizar en todas las etapas de la investigación de IPSC: la reprogramación sin transgenes ni virus le permite su uso desde para la investigación básica hasta para la preclínica
• Flexibilidad en el sistema de medios: se puede utilizar en sistemas de medios sin alimentadores o basados en alimentadores
Crear iPS transgénicos y libres de virus
Los vectores episómicos son un sistema bien descrito para producir iPSC sin transgenes ni virus, lo que proporciona una fuente de iPSC para todas las etapas de investigación de células madre pluripotentes. Otros métodos de reprogramación, como el lentivirus, contienen transgenes que se pueden integrar en el genoma huésped, lo que puede perturbar el genoma o producir resultados impredecibles.
Como vectores oriP/EBNA1, estos vectores episómicos contienen cinco factores de reprogramación (Oct4, Sox2, Lin28, Klf4, y L-Myc) y se replican extracromosómicamente una vez por ciclo celular. A esta tasa de replicación, los episomas se pierden a una tasa de aproximadamente el 5 % por generación celular. Este sistema muestra una generación mejorada de IPSC a través de la supresión de p53, y la inclusión de L-Myc ha demostrado ser más potente y específica que la de c-Myc durante la generación de IPSC (1) humana.
Sistema fácil de usar
Este kit de dos viales proporciona el sistema óptimo para la reprogramación de vectores episómicos y elimina la necesidad de utilizar moléculas pequeñas en el medio de reprogramación. Los vectores episomales se introducen en la célula mediante electroporación. Recomendamos el uso del sistema de transfección Neon™ para la electroporación, que aporta flexibilidad en el volumen y, por tanto, en el número de células necesarias para la reprogramación.
Flexibilidad en la selección de sistemas de medios
El kit epistomal de reprogramación de IPSC Epi5™ puede utilizarse con varios tipos de células y sistemas de medios. Los protocolos para los fibroblastos y las células sanguíneas CD34+ están disponibles en la reprogramación con o sin alimentador.
1. Okita K, Matsumara Y, Sato Y, et al. A more efficient method to generate integration free human iPS cells. Nature Methods 8, 409 - 412, 2011.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de clonaciónNinguno
Tipo de entregaTransfección
Para utilizar con (aplicación)Reprogramación e ingeniería de células madre
Para utilizar con (equipo)Electroporador, sistema de transfección Neon
de control principalel
Línea de productosEpi5
Tipo de productoKit episomal de reprogramación de iPSC
PromotorCAG
Etiqueta de proteínaNinguno
Cantidad1 Kit
Origen de replicaciónOrigen de pUC
Gen marcadorNinguno
Agente de selección (eucariótico)Ninguno
VectorEBNA OriP
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Dos tubos. Almacenar a entre -5 y -20 °C.
Preguntas frecuentes
Can I use pen/strep or other antibiotics for episomal reprogramming of cells?
Can I reprogram mouse cells with the Epi5 Episomal iPSC Reprograming Kit (Cat. No. A15960)?
When generating iPSCs using the Epi5 Episomal iPSC Reprogramming Kit (Cat. No. A15960), how confluent should my cells be on the day of transfection?
How many reprogramming experiments can I perform with the Epi5 Episomal iPSC Reprogramming Kit (Cat. No. A15960)?
Which kits do you offer for stem cell reprogramming?
Citations & References (2)
Citations & References
Abstract
An optogenetic approach for assessing formation of neuronal connections in a co-culture system.
Journal:
PubMed ID:25742527
'Here we describe a protocol to generate a co-culture consisting of 2 different neuronal populations. Induced pluripotent stem cells (iPSCs) are reprogrammed from human fibroblasts using episomal vectors. Colonies of iPSCs can be observed 30 days after initiation of fibroblast reprogramming. Pluripotent colonies are manually picked and grown in neural
Generation of human iPSCs from cells of fibroblastic and epithelial origin by means of the oriP/EBNA-1 episomal reprogramming system.
Journal:
PubMed ID:26088261
The prospect of therapeutic applications of the induced pluripotent stem cells (iPSCs) is based on their ability to generate virtually any cell type present in human body. Generation of iPSCs from somatic cells has opened up new possibilities to investigate stem cell biology, to better understand pathophysiology of human diseases,