NeuCode™ Lysine-080

Thermo Scientific™ NeuCode™ Aminosäuren erhöhen den für die metabolische Markierung von Proteinen für die Massenspektrometrieanalyse erreichbaren Multiplexing-Wert. NeuCode™ Lysin-080 (3,3,4,4,5,5,6,6-D8 L-Lysin-2HCl) kann auch mit herkömmlichen SILAC verwendet werden, um die Flexibilität von Multiplexing-Optionen zu verbessern oder die Komplexität der Analyse zu verringern.

Allgemeine Merkmale der NeuCode SILAC-Markierung:
• Markierungseffizienz – 100 % Markierungsintegration in Proteine lebender Zellen ohne Toxizität
• Kompatibel – Kann mit vorhandenen SILAC-Aminosäuren gemultiplext werden
• Zeitsparend – Keine 100%ige Markierungsintegration erforderlich, wenn nur schwere Aminosäuren verwendet werden
• Hochwertige Supplemente – Schwere Aminosäuren mit einer Isotopenreinheit von >98 %

Die stabile Isotopenmarkierung mit Aminosäuren in der Zellkultur (SILAC) ist eine leistungsstarke Methode zur Identifizierung und Quantifizierung relativer differenzieller Veränderungen in komplexen Proteinproben. Die NeuCode metabolische Markierung ähnelt SILAC, unterscheidet sich jedoch dadurch, dass bei der Markierung nur schwere Aminosäuren verwendet werden. Die erhöhte Multiplex-Fähigkeit von NeuCode Aminosäuren ist durch das Einbeziehen von Massenfehlern aus zusätzlichen Neutronen in den stabilen Isotopen möglich. Diese kleinen Massenunterschiede können mit hochauflösenden Massenspektrometern (Thermo Scientific™ Orbitrap™ Elite™, Q Exactive™, Orbitrap™ Fusion™ Tribrid™ und Orbitrap™ Fusion™ Lumos™ Tribrid™ Massenspektrometern) angezeigt werden. Die Verwendung nur schwerer Aminosäuren macht die 100%ige Integration von Aminosäuren überflüssig, die für SILAC (sowohl schwer als auch leicht) verwendet werden, und kann besonders für Studien mit Primärzellen nützlich sein.

NeuCode Aminosäuren werden zusammen mit speziellen Zellkulturmedien verwendet, in denen essentielle Aminosäuren fehlen. Schweres L-Lysin wird für die SILAC-Analyse von Peptiden verwendet, die mit Trypsin oder LysC verdaut wurden. NeuCode Lysin-080 kann mit 4,4,5,5-D₄ L-Lysin oder ¹³C₆ ¹⁵N₂ L-Lysin für Duplexexperimente verwendet und mit leichtem Lysin für Triplex-Experimente kombiniert werden.

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