RNaseAlert™ QC-System

Das Ambion ™ RNaseAlert™ QK-System ist die RNase-Aktivität in einem praktischen und empfindlichen fluormetrischen Assay erkennt, der Ergebnisse in Echtzeit liefert. Mit ausreichend Reagenzien für 5 × 96 Hochdurchsatz-Assays.

• Erkennt bereits 3,5 x 10^-7 Einheiten (∼0,5 pg) RNase A mit einem Fluorimeter
• Unkomplizierter und einfacher 30-minütiger Assay
• Überwachen der RNase-Aktivität in Säulenfraktionen während der Proteinaufreinigung
• Zur Verwendung mit dem DNaseAlert™ QK-System zur quantitativen Erkennung von RNasen und DNasen in derselben Probe

Das RNaseAlert™ QK-System verwendet ein neuartiges RNA-Substrat das mit einem fluoreszierenden Reportermolekül (Fluor) an einem Ende und einem Quencher am anderen Ende markiert ist. Wenn keine RNasen vorhanden sind, dämpft die physikalische Nähe des Quenchers die Fluoreszenz vom Fluor auf extrem niedrige Konzentrationen. Wenn RNasen vorhanden sind, wird das RNA-Substrat jedoch gespalten, und Fluor und Quencher werden räumlich in Lösung getrennt. Dadurch gibt Fluor ein hellgrünes Signal aus, wenn es durch Licht der entsprechenden Wellenlänge angeregt wird. Die Fluoreszenz kann mit einem filterbasierten oder monochromatorbasierten Fluorometer leicht erkannt werden. Da bei Vorhandensein von RNase-Aktivität die Fluoreszenz des RNaseAlert™ Substrats mit der Zeit zunimmt, können die mit einem Fluorometer überwachten Ergebnisse kinetisch ausgewertet werden. Die Sequenz des RNaseAlert™ Substrats wurde sorgfältig optimiert, um mehrere RNasen zu erkennen, darunter RNase A, RNase T1, RNase I, Mikrokokken-Nuklease, S1-Nuklease, Mungbohnen-Nuklease und Benzonase™.

Schnelles und praktisches Protokoll
Das RNaseAlert™ Verfahren benötigt für die Einrichtung nur wenige Minuten. Das lyophilisierte und fluoreszierende Substrat wird im mitgelieferten Röhrchen rekonstituiert und für einige Minuten mit der Testlösung inkubiert. Die Ergebnisse werden dann auf einem Fluorometer abgelesen. Proben, die im Vergleich zur Negativkontrolle deutlich fluoreszieren, sind kontaminiert und sollten nicht mit RNA verwendet werden. Nukleasefreies Wasser und RNase A werden als Kontrollen angeboten.

Zubehörprodukt:
RNaseAlert™ ist außerdem vollständig kompatibel mit dem Ambion™ DNaseAlert™ QK-System (SKU# AM1970). Da das DNaseAlert™ Substrat einen fluoreszierenden Tag enthält, der sich spektral von RNaseAlert™ unterscheidet, können die beiden Kits gleichzeitig mit einem Fluorometer für quantitative Echtzeitanalysen von RNasen und DNasen in einer einzigen Probe verwendet werden.