Sistema de control de calidad RNaseAlert™

El sistema de control de calidad Ambion™ RNaseAlert™ detectar la actividad de la ARNasa en un ensayo fluorimétrico práctico y sensible que proporciona resultados en tiempo real. Contienen suficientes reactivos para 5 × 96 ensayos de alto rendimiento.

• Detecta hasta 3,5 x 10^-7 unidades (∼0,5 pg) de RNasa A, con un fluorímetro
• Ensayo sencillo y directo de 30 min
• Controle la actividad de la RNasa en las fracciones de la columna durante la purificación de proteínas
• Utilícelo con el sistema de control de calidad DNaseAlert™ para detectar cuantitativamente tanto las RNasas como las DNasas en una misma muestra

El sistema de control de calidad RNaseAlert™ utiliza un nuevo sustrato de ARN marcado con una molécula de indicador fluorescente (flúor) en un extremo y un supresor en el otro. En ausencia de ARNasas, la proximidad física del supresor reduce la fluorescencia del flúor a niveles extremadamente bajos. Sin embargo, cuando hay ARNasas, el sustrato ARN se escinde y se crea una separación espacial entre el flúor y el supresor en la solución. Esto hace que el flúor emita una señal verde brillante cuando una luz de la longitud de onda apropiada hace que se excite. La fluorescencia se puede detectar fácilmente con un fluorímetro basado en filtro o en monocromador. Dado que la fluorescencia del sustrato RNaseAlert™ aumenta con el tiempo cuando hay actividad de ARNasa, los resultados monitorizados con un fluorímetro pueden evaluarse de forma cinética. La secuencia del sustrato RNaseAlert™ se ha optimizado cuidadosamente para detectar varias ARNasas, incluidas la ARNasa A, la ARNasa T1, la ARNasa I, la nucleasa microcócica, la nucleasa S1, la nucleasa de judía mungo y la Benzonase™.

Protocolo rápido y práctico
El procedimiento RNaseAlert™ se configura en solo unos minutos. El sustrato fluorescente liofilizado se reconstituye en el tubo suministrado y se incuba con la solución de ensayo durante unos minutos. Después de esto, los resultados se leen en un fluorímetro. Las muestras que emiten una fluorescencia notable en comparación con el control negativo están contaminadas y no se deben combinar con el ARN. El agua libre de nucleasas y la ARNasa A se proporcionan para su uso como controles.

Producto acompañante:
el sistema RNaseAlert™ también es totalmente compatible con el sistema de control de calidad Ambion™ DNaseAlert™ (SKU n.º AM1970). Dado que el sustrato DNaseAlert™ contiene una etiqueta fluorescente con un espectro distinto al de RNaseAlert™, los dos kits se pueden utilizar simultáneamente con un fluorímetro para análisis cuantitativos en tiempo real de ARNasas y DNasas dentro de una sola muestra.