CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0
CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0
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CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0

CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar la membrana plasmática con proteína cian fluorescente (CFP) enMás información
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Número de catálogoCantidad
C106061 vial
Número de catálogo C10606
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 vial
CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo de etiquetar la membrana plasmática con proteína cian fluorescente (CFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

¿Desea etiquetar otras estructuras celulares? Obtenga más información sobre las herramientas de etiquetado de proteínas fluorescentes CellLight™

Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la CFP fusionada a la secuencia de miristoilación/palmitoilación de la tirosina cinasa Lck, mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de membrana plasmática-CFP en células vivas sin teñir las membranas internas, así como utilizar múltiples colorantes de seguimiento o rastreo para obtener imágenes de procesos celulares dinámicos

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en las células de mamíferos y son adecuadas para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1.

Tecnología BacMam
CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0, es una construcción fusionada de la secuencia de miristoilación/palmitoilación de la tirosina cinasa Lck y CFP que se dirige de forma precisa y específica a la membrana celular-CFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ColorAzul
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteCFP (proteína cian fluorescente)
EmisiónVisible
Intervalo de longitud de onda de excitación435⁄485
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, microscopio de fluorescencia
FormularioLíquido
Línea de productosCellLight
Cantidad1 vial
Condiciones de envíoHielo húmedo
TécnicaIntensidad de fluorescencia
Tipo de etiquetaProteína fluorescente
Tipo de productoMembrana plasmática
SubCellular LocalizationMembrana plasmática
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar de 2 °C a 6 °C, protegido de la luz. No congelar.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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What cell types can the CellLights products be used with?

The first generation BacMam reagents were shown to efficiently transduce over 90 cell types, including stable cell lines and primary cells. With BacMam 2.0, it is now possible to also efficiently transduce primary neurons and stem cells.

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Citations & References (6)

Citations & References
Abstract
Relocalization of junctional adhesion molecule A during inflammatory stimulation of brain endothelial cells.
Authors:Stamatovic SM, Sladojevic N, Keep RF, Andjelkovic AV,
Journal:Mol Cell Biol
PubMed ID:22733993
'Junctional adhesion molecule A (JAM-A) is a unique tight junction (TJ) transmembrane protein that under basal conditions maintains endothelial cell-cell interactions but under inflammatory conditions acts as a leukocyte adhesion molecule. This study investigates the fate of JAM-A during inflammatory TJ complex remodeling and paracellular route formation in brain endothelial ... More
Improved throughput traction microscopy reveals pivotal role for matrix stiffness in fibroblast contractility and TGF-ß responsiveness.
Authors:Marinkovic A, Mih JD, Park JA, Liu F, Tschumperlin DJ,
Journal:Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol
PubMed ID:22659883
'Lung fibroblast functions such as matrix remodeling and activation of latent transforming growth factor-ß1 (TGF-ß1) are associated with expression of the myofibroblast phenotype and are directly linked to fibroblast capacity to generate force and deform the extracellular matrix. However, the study of fibroblast force-generating capacities through methods such as traction ... More
Exosomes reflect the hypoxic status of glioma cells and mediate hypoxia-dependent activation of vascular cells during tumor development.
Authors:Kucharzewska P, Christianson HC, Welch JE, Svensson KJ, Fredlund E, Ringnér M, Mörgelin M, Bourseau-Guilmain E, Bengzon J, Belting M,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:23589885
'Hypoxia, or low oxygen tension, is a major regulator of tumor development and aggressiveness. However, how cancer cells adapt to hypoxia and communicate with their surrounding microenvironment during tumor development remain important questions. Here, we show that secreted vesicles with exosome characteristics mediate hypoxia-dependent intercellular signaling of the highly malignant ... More
Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.
Authors:Boyce FM, Bucher NL,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:8637876
This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More
BacMam technology and its application to drug discovery.
Authors:Ames RS, Kost TA, Condreay JP,
Journal:Expert Opin Drug Discov
PubMed ID:23488908
The recombinant baculovirus/insect cell system was firmly established as a leading method for recombinant protein production when a new potential use for these viruses was revealed in 1995. It was reported that engineered recombinant baculoviruses could deliver functional expression cassettes to mammalian cell types; a system which has come to ... More