Kit de proliferación de células CFSE CellTrace™ para citometría de flujo
Kit de proliferación de células CFSE CellTrace™ para citometría de flujo
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Kit de proliferación de células CFSE CellTrace™ para citometría de flujo

El kit de proliferación de células CFSE CellTrace™ se emplea para el etiquetado de células in vitro e in vivoMás información
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Número de catálogoSuficiente para
C34554180 reacciones
C3457020 reacciones
Número de catálogo C34554
Precio (MXN)
-
Suficiente para:
180 reacciones
El kit de proliferación de células CFSE CellTrace™ se emplea para el etiquetado de células in vitro e in vivo con el fin de determinar varias generaciones mediante una dilución con tintes a través de citometría de flujo.

• Rendimiento superior: la tinción brillante y de un solo pico permite la visualización de varias generaciones
• Estabilidad de la señal a largo plazo: estable en las células durante varios días después de la tinción
• No tóxico: la tinción no afecta negativamente a la salud celular
• Protocolo de tinción sencillo y sólido

Consulte la guía de selección para todos los kits de proliferación celular CellTrace™ para citometría de flujo.

Tinción fluorescente superior
Un análisis correcto de proliferación mediante dilución de tinte (consulte la figura siguiente) requiere un tinte muy brillante para distinguir las células etiquetadas con fluorescencia de las autofluorescencias después de varias divisiones celulares. La intensa tinción fluorescente proporcionada por el tinte CFSE CellTrace™ permite visualizar ocho o más generaciones de células proliferantes antes de que la señal se vea desbordada por la auto-fluorescencia celular intrínseca. Resultados de tinción homogéneos y consistentes con muy poca variación de fluorescencia entre las células de una población, por lo que se pueden ver distintas generaciones sin necesidad de un software de modelado complejo.

Retención de la señal a largo plazo
A diferencia de las tinciones que marcan la membrana lipídica de las células, el colorante CellTrace™ CFSE atraviesa fácilmente la membrana plasmática y se une de manera covalente en el interior de las células donde el colorante fluorescente estable y bien conservado está diseñado para proporcionar una señal coherente, incluso después de varios días dentro del cultivo celular.

No tóxico
La tinción CellTrace™ CFSE se adhiere covalentemente a todas las aminas libres en la superficie y el interior de las células y muestra poca citotoxicidad, con un efecto mínimo observado en la capacidad proliferativa o biología de las células. Los investigadores han utilizado el etiquetado CFSE SE para demostrar que las células hematopoyéticas trasplantables proliferan in vitro en respuesta a la estimulación mediante un cóctel de factor de crecimiento.

Protocolo de tinción sencillo y sólido
El kit de proliferación de células CellTrace™ CFSE tiene viales prácticos de un solo uso de colorante seco que permiten realizar experimentos a pequeña escala sin necesidad preparar cantidades excesivas de colorante. Se prepara una solución madre mediante la disolución del contenido de un vial en dimetilsulfóxido (DMSO) anhidro antes del uso. Para teñir 1 ml de células en un medio sin proteínas, se suele emplear 1 µl de esta solución madre. Las células deben teñirse durante 20 minutos a temperatura ambiente mediante una agitación suave. A continuación, un breve lavado con un medio completo eliminará cualquier coorante que pudiera quedar en la solución.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónKit de proliferación celular CellTrace™, 180 reacciones, CFSE, liofilizado, método de detección de fluorescencia, 492/517 nm de longitud de onda de etiquetado/emisión, excitación/tinción de CFSE CellTrace™, almacenamiento de –5 a –30 °C, para su uso con citómetros de flujo
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteOtras etiquetas o colorantes
FormularioLiofilizado
FormatoTubo(s)
CantidadUn kit
Tipo de reactivoCFSE y compuestos relacionados
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
SolubilidadDMSO (dimetilsulfóxido)
Suficiente para180 reacciones
Emission492⁄517
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de proliferación, Citometría de flujo
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Línea de productosCellTrace
Tipo de productoKit de proliferación celular
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene 10 viales de CellTrace™ CFSE (polvo liofilizado) y 1 vial de DMSO (500 μl). Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I'm trying to label my cells in suspension and track them over time by labeling with CFDA SE, but after labeling them they will no longer adhere to a surface (whereas unlabeled cells adhere well). I've tried to label at 10 and 20 µM. What is causing this?

This dye will bind to proteins via primary amines. Too high of a concentration can lead to cell toxicity or unintended modification of cell function. The solution is to reduce the concentration and/or staining time, or to go with a non-protein-binding tracking reagent, such as Qtracker cell labeling reagents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I want to do a cell migration study for around 4 hours and need to fluorescently label the cells with a dye. What do you recommend?

Calcein, AM and FDA (fluorescein diaceate) are examples of some dyes used for this application. Since these dyes are not incorporated or covalently attached to any cellular components, they may have a short retention time as some cell types may actively efflux the dye out of the cells. The CellTracker and CellTrace dyes include either a mild thiol-reactive chloromethyl group or amine-reactive succinnimidyl ester group to allow for covalent binding to cellular components, providing for better retention. As with any reagent, one should empirically determine retention times for the cell type used.

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I labeled my cells with Calcein, AM, but when I imaged the next day, there was no fluorescence from Calcein. Why?

Calcein, AM is a good choice for cell tracking and as a general cytoplasmic stain. However, it doesn't bind to anything and may be actively pumped out of the cells within a couple hours, which is likely what happened. The retention of Calcein within live cells is dependent upon the inherent properties of the cell type and culture conditions.

For long-term imaging, you may wish to consider a reactive cytoplasmic stains such as CFDA, SE or the CellTracker and CellTrace dyes.

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What is the shelf life of CellTrace CFSE Cell Proliferation Kit (Cat. No. C34554, C34570)?

CellTrace CFSE Cell Proliferation Kit is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended (in freezer (-5 to -30 degrees C) and protected from light). Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf).

For staining with CellTrace CFSE Cell Proliferation Kit, for flow cytometry (Cat. No. C34554 or C34570), up to how many cells can I have in 1 mL volume?

The cell concentration can be up to 1 x 10E7 cells/mL.

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Citations & References (3)

Citations & References
Abstract
Optimized staining and proliferation modeling methods for cell division monitoring using cell tracking dyes.
Authors:Tario JD, Humphrey K, Bantly AD, Muirhead KA, Moore JS, Wallace PK,
Journal:J Vis Exp
PubMed ID:23271219
'Fluorescent cell tracking dyes, in combination with flow and image cytometry, are powerful tools with which to study the interactions and fates of different cell types in vitro and in vivo.(1-5) Although there are literally thousands of publications using such dyes, some of the most commonly encountered cell tracking applications ... More
Appraising the suitability of succinimidyl and lipophilic fluorescent dyes to track proliferation in non-quiescent cells by dye dilution.
Authors:Filby A, Begum J, Jalal M, Day W,
Journal:
PubMed ID:25802116
Successful completion of the cell cycle usually results in two identical daughter progeny. This process of generational doubling is termed proliferation and when it occurs in a regulated fashion the benefits range from driving embryonic development to mounting a successful immune response. However when it occurs in a dis-regulated fashion, ... More
TLR4 signaling induced by lipopolysaccharide or paclitaxel regulates tumor survival and chemoresistance in ovarian cancer.
Authors:Szajnik M, Szczepanski MJ, Czystowska M, Elishaev E, Mandapathil M, Nowak-Markwitz E, Spaczynski M, Whiteside TL,
Journal:Oncogene
PubMed ID:19826413
Toll-like receptors (TLRs) expressed on immune cells trigger inflammatory responses. TLRs are also expressed on ovarian cancer (OvCa) cells, but the consequences of signaling by the TLR4/MyD88 pathway in these cells are unclear. Here, TLR4 and MyD88 expression in OvCa tissues (n=20) and cell lines (OVCAR3, SKOV3, AD10, A2780 and ... More