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Invitrogen™
EnzChek™ Caspase-3 Activity Assay Kits
Nachweis von Apoptose in Zellextrakten und gereinigten Enzympräparaten mit EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kits mit Z-DEVD-AMC Substrat oder Z-DEVD-R 110 Substraten.
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| Katalognummer | Marker oder Farbstoff |
|---|---|
| E13183 | AMC (7-Amin-4-methylkumarin) |
| E13184 | Rhodamin 110 |
Katalognummer E13183
Preis (EUR)
940,00
Each
Marker oder Farbstoff:
AMC (7-Amin-4-methylkumarin)
Preis (EUR)
940,00
Each
Das EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kit ermöglicht den einfachen und zuverlässigen Nachweis der Caspase-3-Aktivitäts-vermittelten Apoptose, das speziell entwickelte Substrate nutzt, die bei Spaltung durch das Caspase-3-Enzym fluoreszieren. Das EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kit ist entweder mit dem Z-DEVD-AMC- oder Z-DEVD-R 110-Substrat erhältlich, das bei proteolytischer Spaltung durch Caspase -3/7 ein helles Fluoreszenzprodukt liefert.
Das EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kit ermöglicht den Nachweis von Apoptose durch eine einfache und zuverlässige Methode zur Messung der Caspase-3/7-Aktivität. Mit dem Kit kann die Aktivität von Caspase-3/7 in Zellextrakten und aufgereinigten Enzympräparaten mit einem Fluorometer oder Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät kontinuierlich gemessen werden.
Zu den wichtigsten Merkmalen des EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kit gehören:
• Fluoreszenztest mit standardmäßigen Fluorescein-(FITC)-Anregungs-/Emissionseinstellungen
• Format ermöglicht die kontinuierliche Messung der Caspase-3/7-Aktivität in Zellextrakten
• Fluoreszierende und enzymatische Kontrollen enthalten
Das aus Aminomethylcoumarin (AMC) abgeleitete Substrat (Z-Asparaginsäure-Glutaminsäure-Valin-Asparaginsäure (DEVD)-AMC, das im EnzChek Caspase-3-Aktivitätskit enthalten ist, ist im UV-Bereich schwach fluoreszierend (Anregung/Emission maximal ˜330/390 nm), liefert jedoch ein helles, blau-fluoreszierendes Produkt (Anregung/Emission maximal ˜342/441 nm) nach proteolytischer Spaltung. Das Kit kann zur kontinuierlichen Messung der Aktivität von Caspase-3 und eng verwandten Proteasen in Zellextrakten und aufgereinigten Enzympräparaten mit einem Fluorometer oder Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät verwendet werden.
Das im EnzChek Caspase-3 Aktivität-Assay Kit verwendete Rhodamin 110-basierte Substrat (Z-DEVD-R110) ist eine nicht-fluoreszierende Bisamidverbindung, die bei der enzymatischen Spaltung in einem zweistufigen Prozess in das fluoreszierende Monoamid und dann in das noch stärker fluoreszierende R110-Produkt umgewandelt wird. Beide Hydrolyseprodukte weisen spektrale Eigenschaften auf, die denen von Fluorescein ähnlich sind, wobei die Wellenlängen der Spitzenanregung und Emission jeweils 496 nm und 520 nm aufweisen.
Neben den Substraten enthält das EnzChek Caspase-Aktivität-Assay-Kit den reversiblen Aldehydhemmer Ac-DEVD-CHO sowie einen AMC- oder R 110-Referenzstandard. Der Ac-DEVD-CHO-Hemmer bestätigt, dass die Fluoreszenzsignale sowohl in induzierten als auch in Kontrollzellpopulationen auf die Aktivität von Caspase-3/7 Protease zurückzuführen sind. Der Referenzstandard ermöglicht die Quantifizierung der Menge von AMC oder R110, die in der Reaktion freigesetzt wird.
Zu den wichtigsten Merkmalen des EnzChek Caspase-3-Aktivität-Assay-Kit gehören:
• Fluoreszenztest mit standardmäßigen Fluorescein-(FITC)-Anregungs-/Emissionseinstellungen
• Format ermöglicht die kontinuierliche Messung der Caspase-3/7-Aktivität in Zellextrakten
• Fluoreszierende und enzymatische Kontrollen enthalten
Das aus Aminomethylcoumarin (AMC) abgeleitete Substrat (Z-Asparaginsäure-Glutaminsäure-Valin-Asparaginsäure (DEVD)-AMC, das im EnzChek Caspase-3-Aktivitätskit enthalten ist, ist im UV-Bereich schwach fluoreszierend (Anregung/Emission maximal ˜330/390 nm), liefert jedoch ein helles, blau-fluoreszierendes Produkt (Anregung/Emission maximal ˜342/441 nm) nach proteolytischer Spaltung. Das Kit kann zur kontinuierlichen Messung der Aktivität von Caspase-3 und eng verwandten Proteasen in Zellextrakten und aufgereinigten Enzympräparaten mit einem Fluorometer oder Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät verwendet werden.
Das im EnzChek Caspase-3 Aktivität-Assay Kit verwendete Rhodamin 110-basierte Substrat (Z-DEVD-R110) ist eine nicht-fluoreszierende Bisamidverbindung, die bei der enzymatischen Spaltung in einem zweistufigen Prozess in das fluoreszierende Monoamid und dann in das noch stärker fluoreszierende R110-Produkt umgewandelt wird. Beide Hydrolyseprodukte weisen spektrale Eigenschaften auf, die denen von Fluorescein ähnlich sind, wobei die Wellenlängen der Spitzenanregung und Emission jeweils 496 nm und 520 nm aufweisen.
Neben den Substraten enthält das EnzChek Caspase-Aktivität-Assay-Kit den reversiblen Aldehydhemmer Ac-DEVD-CHO sowie einen AMC- oder R 110-Referenzstandard. Der Ac-DEVD-CHO-Hemmer bestätigt, dass die Fluoreszenzsignale sowohl in induzierten als auch in Kontrollzellpopulationen auf die Aktivität von Caspase-3/7 Protease zurückzuführen sind. Der Referenzstandard ermöglicht die Quantifizierung der Menge von AMC oder R110, die in der Reaktion freigesetzt wird.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
BeschreibungEnzChek Caspase-3 Assay-Kit Nr. 1, Z-DEVD-AMC-Substrat
Anregung/Emission342/441 (Spaltsubstrat)
Zur Verwendung mit (Geräte)Fluorometer, Mikrotiterplatten-Lesegerät
MarkertypAndere Labels oder Farbstoffe
Marker oder FarbstoffAMC (7-Amin-4-methylkumarin)
Anzahl Reaktionen500 Assays (Reaktionsvolumen 100 μl pro Assay)
ProduktlinieEnzChek
ProdukttypCaspase-Assay-Kit
Menge500 Assays
VersandbedingungRaumtemperatur
LagerungsbedingungenBei -5 bis -30 °C lagern und vor Licht schützen.
NachweisverfahrenFluoreszenz
FormatKüvetten, 96-Well-Platte
Unit SizeEach
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
I am planning to use the EnzChek Caspase-3 Assay Kit #1 with Z-DEVD-AMC substrate. What are the fluorescence excitation/emission maxima of the cleaved substrate?
Zitierungen und Referenzen (53)
Zitierungen und Referenzen
Abstract
Journal:
PubMed ID:9078237
Jun NH2-terminal kinase (JNK) prevents nuclear beta-catenin accumulation and regulates axis formation in Xenopus embryos.
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:17060633
'Jun NH(2)-terminal kinases (JNKs) regulate convergent extension movements in Xenopus embryos through the noncanonical Wnt/planar cell polarity pathway. In addition, there is a high level of maternal JNK activity spanning from oocyte maturation until the onset of gastrulation that has no defined functions. Here, we show that maternal JNK activation
VDAC-dependent permeabilization of the outer mitochondrial membrane by superoxide induces rapid and massive cytochrome c release.
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:11739410
'Enhanced formation of reactive oxygen species (ROS), superoxide (O2*-), and hydrogen peroxide (H2O2) may result in either apoptosis or other forms of cell death. Here, we studied the mechanisms underlying activation of the apoptotic machinery by ROS. Exposure of permeabilized HepG2 cells to O2*- elicited rapid and massive cytochrome c
One-step cellular caspase-3/7 assay.
Journal:Biotechniques
PubMed ID:12765032
Protease involvement in fodrin cleavage and phosphatidylserine exposure in apoptosis.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:8940103
'A detailed kinetic analysis of three extranuclear end points of apoptosis, phosphatidylserine exposure, alpha-fodrin degradation, and plasma membrane blebbing, was performed and compared with nuclear fragmentation and the activation of the interleukin-1beta-converting enzyme (ICE)-like proteases in Jurkat T lymphocytes stimulated by anti-Fas monoclonal antibody (anti-Fas mAb) and in monocytic U937