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pCR™8/GW/TOPO™ TA-Klonierungskit mit One-Shot™ TOP10 E. Coli

Katalognummer	Menge
K250020	20 Reaktionen

Katalognummer K250020

Preis (EUR)

1.024,00

Menge:

20 Reaktionen

Preis (EUR)

1.024,00

Das pCR™8/GW/TOPO™ TA-Klonierungskit bietet eine einfache Klonierung in 5 Minuten und Zugriff auf die Gateway™ Rekombinations-Klonierungsvektor-Plattform. Unser PCR™8 TOPO™ TA Vektor enthält eine minimale MCS, so dass Sie mehr von Ihrem Einsatz und weniger des Vektors sequenzieren können.

Mit unseren patentierten att-Stellen ist der PCR™8 Vektor die einfachste Möglichkeit, einen Entry-Klon zu erstellen, was den Zugriff über Gateway™ Rekombinations-Klonierung auf verschiedene Expressionsvektoren ohne umständliche Sub-Klonierung erleichtert. So sparen Sie wertvolle Forschungszeit.

Das pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit bietet:

• att-Stellen für eine schnelle Rekombination in eine Vielzahl von Gateway™ Zielvektoren
• 3´-T-Überhänge für die direkte Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• Sequenzierprimer-Stellen innerhalb von 55 bp der Einfügestelle gewährleisten, dass Sie mehr Insert und weniger Vektoren sequenzieren
• Spectinomycin-Resistenzgen für eine robuste Auswahl an E. coli
• EcoRI-Schnittstellen zu beiden Seiten der Einfügestelle des PCR-Produkts ermöglichen die problemlose Exzision von Inserts

Dieses Kit enthält One Shot™ TOP10 chemisch kompetente E. coli.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

KlonierungsmethodeTopo™ mit Gateway™

Anzahl Reaktionen20 reactions

ProduktlinieOne Shot

ProdukttypTA-Klonierungskit

Menge20 Reaktionen

VektorpCR

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Das pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit enthält den TOPO™ angepassten, gebrauchsfertigen pCR™8/GW/TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, Gateway Vorwärts- und Rückwärts-Sequenzierprimer, Kontroll-Template und PCR-Primer, One Shot™ TOP10 chemisch kompetente E. coli chemisch kompetente E. coli, S.O.C.- Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. One Shot™ E. coli bei -80 °C lagern. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. Alle Reagenzien bleiben bei ordnungsgemäßer Lagerung garantiert 6 Monate stabil.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.

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